曹鳳勤, 崔志富, 劉萬學(xué), 符悅冠, 但建國(guó), 劉文慶, 高 熹
(1.海南大學(xué)環(huán)境與植物保護(hù)學(xué)院,儋州 571737; 2.海南農(nóng)墾科學(xué)院,???570206;3.中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院植物保護(hù)研究所,北京 100081; 4.中國(guó)熱帶科學(xué)院環(huán)境與植物保護(hù)所,儋州 571737;5.海南省農(nóng)業(yè)學(xué)校,???571100; 6.云南農(nóng)業(yè)大學(xué)植物保護(hù)學(xué)院,昆明 650201)
螺旋粉虱對(duì)不同甜椒品種的產(chǎn)卵選擇性及與植物中化學(xué)物質(zhì)的相互關(guān)系研究
曹鳳勤1, 崔志富2*, 劉萬學(xué)3, 符悅冠4, 但建國(guó)1, 劉文慶5, 高 熹6
(1.海南大學(xué)環(huán)境與植物保護(hù)學(xué)院,儋州 571737; 2.海南農(nóng)墾科學(xué)院,???570206;3.中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院植物保護(hù)研究所,北京 100081; 4.中國(guó)熱帶科學(xué)院環(huán)境與植物保護(hù)所,儋州 571737;5.海南省農(nóng)業(yè)學(xué)校,???571100; 6.云南農(nóng)業(yè)大學(xué)植物保護(hù)學(xué)院,昆明 650201)
[目的]明確螺旋粉虱對(duì)不同甜椒品種的產(chǎn)卵偏好性及其與甜椒體內(nèi)化學(xué)物質(zhì)含量的關(guān)系。[方法]采用非自由選擇法測(cè)定了螺旋粉虱對(duì)不同甜椒品種的產(chǎn)卵偏好性,并測(cè)定不同甜椒品種體內(nèi)單寧酸、總黃酮、可溶性糖、可溶性蛋白等化學(xué)物質(zhì)含量,分析其與螺旋粉虱產(chǎn)卵選擇的相關(guān)性。[結(jié)果]螺旋粉虱對(duì)‘古風(fēng)7號(hào)’的選擇性最強(qiáng),產(chǎn)卵量顯著高于‘特大型牟一號(hào)’、‘吉星’、‘京椒’、‘特大甜椒八號(hào)’等8個(gè)品種(α=0.05水平),而與‘國(guó)禧205’、‘鄭椒甜寶’、‘古風(fēng)5號(hào)’等7個(gè)品種差異不顯著。不同甜椒品種間的單寧酸含量、總黃酮含量、可溶性糖含量、可溶性蛋白含量存在顯著差異。相關(guān)分析表明,螺旋粉虱對(duì)甜椒品種的選擇性與單寧酸、總黃酮不相關(guān),與可溶性蛋白呈負(fù)相關(guān),與可溶性糖含量呈正相關(guān)。[結(jié)論]螺旋粉虱對(duì)不同甜椒品種的偏好性存在顯著差異,這種差異與甜椒體內(nèi)一些化學(xué)物質(zhì)含量不同有關(guān)。
螺旋粉虱; 產(chǎn)卵選擇性; 化學(xué)物質(zhì); 甜椒
螺旋粉虱(Aleurodicus dispersusRussell),原產(chǎn)于加勒比海地區(qū)和中美洲,屬同翅目(Homoptera),粉虱科(Aleyrodidae),粉虱亞科(Aleurodicinae),復(fù)孔粉虱屬(Aleurodicus),英文名為spiraling whitefly(SWF),1965年首先由 Russell在美國(guó)佛羅里達(dá)州記述為新種,主要在亞洲和太平洋地區(qū)蔓延,是各種水果、蔬菜和花卉作物產(chǎn)量和質(zhì)量的主要制約因素[1]。1988年在我國(guó)臺(tái)灣高雄縣大寮
鄉(xiāng)番石榴植株上發(fā)現(xiàn)螺旋粉虱,由于當(dāng)時(shí)危害輕微,未受重視,次年蔓延至鳳臺(tái)市番石榴園。該蟲入侵臺(tái)灣后快速擴(kuò)散,所到之處蔬菜、果樹、行道樹及景
觀樹種都受到危害,寄主達(dá)64科144種植物[2-4]。作為新入侵種,2006年4月在海南陵水發(fā)現(xiàn)該蟲已傳入海南,目前在海南島蔬菜、果樹、街道綠化樹及觀賞樹木上均有發(fā)現(xiàn),在海南的寄主植物有47科120種[5-7]。
螺旋粉虱主要通過刺吸為害,造成寄主組織營(yíng)養(yǎng)缺乏,嚴(yán)重時(shí)可造成植株落葉,甚至死亡;該蟲分泌的大量蜜露可誘發(fā)煤煙病,影響寄主光合作用、呼吸及散熱功能;同時(shí),螺旋粉虱分泌的大量白色蠟粉及蛹?xì)ち粼谌~片上,使受害植物葉片呈銀白色,影響植株外形的整體美觀[5]。在我國(guó)臺(tái)灣地區(qū),番石榴經(jīng)螺旋粉虱為害4個(gè)月后,其果實(shí)產(chǎn)量損失高達(dá)73%~80%[8]。除此之外,螺旋粉虱也可傳播病害,如在美國(guó)佛羅里達(dá)州的椰子致死黃化?。?],嚴(yán)重影響作物生長(zhǎng)。
甜椒(Capsicum annuum)是海南省重要的蔬菜作物,反季節(jié)銷往北方地區(qū),而且大量輸出到香港和澳門等地區(qū),經(jīng)濟(jì)價(jià)值高。甜椒是螺旋粉虱的潛在寄主植物,如果受到螺旋粉虱的為害,可能造成不可估量的損失。目前,國(guó)內(nèi)外有關(guān)螺旋粉虱與寄主植物相互關(guān)系的研究報(bào)道較少。本文主要進(jìn)行了螺旋粉虱對(duì)不同品種甜椒的產(chǎn)卵選擇性研究,測(cè)定了不同甜椒品種體內(nèi)的化學(xué)物質(zhì)含量,并分析其與螺旋粉虱產(chǎn)卵選擇的相關(guān)性,以期為螺旋粉虱的農(nóng)業(yè)防治工作奠定基礎(chǔ)。
螺旋粉虱成蟲采自海南大學(xué)儋州校區(qū),寄主植物為欖仁樹。
選取15個(gè)甜椒供試品種:‘京椒105’、‘特大甜椒八號(hào)’、‘古風(fēng)1號(hào)’、‘古風(fēng)5號(hào)’、‘古風(fēng)6號(hào)’、‘古風(fēng)7號(hào)’、‘金苗10號(hào)’、‘綠天使’、‘鄭椒甜寶’、‘國(guó)禧205’、‘官爵’、‘富貴’、‘吉星’、‘峰椒甜冠505’、‘特大型牟一號(hào)’的健壯種子,浸種催芽后播種于塑料花盆中。每個(gè)花盆保留1株幼苗,將其置于事先準(zhǔn)備好的大養(yǎng)蟲室內(nèi),定期澆水和施肥,注意防蟲。植株長(zhǎng)到7~8片葉時(shí),待用。
表1 15個(gè)甜椒品種名稱及生產(chǎn)廠家
1.3.1 非選擇產(chǎn)卵試驗(yàn)
選取長(zhǎng)勢(shì)一致的甜椒幼苗(8片真葉),置于60cm×60cm×50cm的養(yǎng)蟲籠內(nèi),每個(gè)籠內(nèi)置1株幼苗,于傍晚接蟲,每個(gè)籠內(nèi)隨機(jī)接入100頭螺旋粉虱成蟲。2d后將蟲源去掉。檢查每個(gè)葉片上的卵粒數(shù)。試驗(yàn)設(shè)3個(gè)重復(fù)。
1.3.2 單寧酸含量的測(cè)定
采用磷鉬酸-磷鎢酸比色法(F-D 法)[10]。稱取新鮮葉片2g,剪碎放于50mL的三角瓶中,加水約50mL,三角瓶用保鮮膜蓋住,置于60℃左右的水中保溫過夜。第2天,將上清液過濾至100mL的容量瓶中,如此重復(fù)3~5次,直到提凈為止(檢查方法:最后一次濾液與FeCl3稀溶液混合不再產(chǎn)生綠色或藍(lán)色)。最后定容至100mL,搖勻。吸取1mL上清液,置于事先盛有70mL蒸餾水的100mL容量瓶中,加入5mL F-D試劑及10mL飽和的Na2CO3溶液,蒸餾水定容至100mL,充分搖勻。30min后,用2100型紫外分光光度計(jì)在760nm波長(zhǎng)處讀取光密度值。用單寧酸繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。
1.3.3 總黃酮含量的測(cè)定
采用索氏回流法[10]。稱取2g葉片,于索氏提取器中,在索氏提取器中用甲醇提取8h,濃縮并轉(zhuǎn)入50mL容量瓶中,用甲醇定容,搖勻。將上述樣品溶液取1mL置10mL容量瓶中,用30%乙醇補(bǔ)充稀釋至5mL。加入0.3mL NaNO2(1∶20),搖勻,放置5min后加入0.3mL AlNO3(1∶10)。6min后再加入2mL 1mol/L NaOH溶液,搖勻,用30%乙醇稀釋至刻度。10min后于波長(zhǎng)510nm處進(jìn)行比色測(cè)定,以試劑為空白對(duì)照。用蘆丁繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。
1.3.4 可溶性糖測(cè)定
采用蒽酮比色法[11],選取與上述試驗(yàn)中相同葉齡和大小的供試植物葉片,剪碎混勻后,稱取1.0g,放入三角瓶中,加入25mL沸水,在沸水浴中煮沸10min,過濾定容至50mL,取5mL二次定容到50mL為待測(cè)液,取待測(cè)液1mL,加蒽酮試劑4mL顯色,在沸水浴中煮沸10min,冷卻后在620nm波長(zhǎng)下測(cè)定光密度,用葡萄糖繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。每個(gè)試驗(yàn)重復(fù)3次,下同。
1.3.5 可溶性蛋白測(cè)定
采用考馬斯亮藍(lán)法[11],選取與上述試驗(yàn)中相同葉齡和大小的供試植物葉片,剪碎混勻后,稱取0.4g,加入5mL蒸餾水研磨后在4 000r/min下離心10min,上清液倒入10mL容量瓶,再向殘?jiān)屑尤?mL蒸餾水,搖勻懸浮后二次離心10min,合并上清液,定容。取上清液0.1mL,加0.9mL蒸餾水及5mL考馬斯亮藍(lán)G-250試劑,混勻,顯色后在595nm波長(zhǎng)下測(cè)定光密度。用牛血清蛋白繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。
采用SAS9.1軟件處理所測(cè)得的數(shù)據(jù)。所有數(shù)據(jù)經(jīng)過正態(tài)性檢測(cè)和轉(zhuǎn)換后,再進(jìn)行方差分析和多重比較。
產(chǎn)卵選擇試驗(yàn)的結(jié)果見表2。方差分析表明,螺旋粉虱對(duì)不同甜椒品種的產(chǎn)卵選擇存在差異(F=5.24,p<0.001)。其中,螺旋粉虱對(duì)‘古風(fēng)1號(hào)’、‘國(guó)禧205’、‘鄭椒甜寶’、‘古風(fēng)7號(hào)’、‘古風(fēng)6號(hào)’產(chǎn)卵選擇性較強(qiáng),‘古風(fēng)1號(hào)’最高著卵量約達(dá)179粒/株,與其他供試品種存在顯著性差異,而對(duì)‘京椒’、‘金苗10號(hào)’、‘特大型牟一號(hào)’等產(chǎn)卵選擇性較差,其中在‘京椒’和‘特大型牟一號(hào)’的著卵量均為0。
表2 螺旋粉虱在不同甜椒品種上的產(chǎn)卵量及不同甜椒品種單寧酸、總黃酮、可溶性蛋白質(zhì)和可溶性糖的含量
不同甜椒品種的單寧酸含量見表2。從表中可以看出‘吉星’的單寧酸含量最高,‘綠天使’的單寧酸含量最低(F=1.34,p=0.242 7>0.05),品種間差異不明顯。對(duì)螺旋粉虱在不同甜椒品種上產(chǎn)卵數(shù)與葉片單寧酸含量進(jìn)行相關(guān)性分析,結(jié)果表明,螺旋粉虱產(chǎn)卵數(shù)與不同甜椒品種葉片單寧酸含量不存在顯著相關(guān)性,相關(guān)系數(shù)為-0.047 32,p=0.867 0>0.05。
不同甜椒品種的總黃酮含量見表2。從表中可以看出‘吉星’總黃酮含量最高,‘京椒105’的總黃酮含量最低(F=22.84,p<0.001),品種間差異達(dá)到了極顯著水平。對(duì)螺旋粉虱在不同甜椒品種上產(chǎn)卵數(shù)與葉片總黃酮含量進(jìn)行相關(guān)性分析,結(jié)果表明,兩者不存在顯著相關(guān)性,相關(guān)系數(shù)為0.130 03,p=0.644 2>0.05。
不同甜椒品種的可溶性糖含量見表2。從表中可以看出‘鄭椒甜寶’的可溶性糖含量最高,‘吉星’的可溶性糖含量最低(F=12.47,p<0.001),品種間差異達(dá)到了極顯著水平。對(duì)螺旋粉虱在不同甜椒品種上產(chǎn)卵數(shù)與葉片可溶性糖含量進(jìn)行相關(guān)性分析,結(jié)果表明,兩者存在顯著相關(guān)性,相關(guān)系數(shù)為0.531 43,p=0.041 5<0.05。
不同甜椒品種的可溶性蛋白質(zhì)含量見表2。從表中可以看出‘古風(fēng)5號(hào)’的可溶性蛋白質(zhì)含量最高,‘古風(fēng)6號(hào)’的可溶性蛋白質(zhì)含量最低(F=28.37,p<0.001),品種間差異達(dá)到了極顯著水平。對(duì)螺旋粉虱在不同甜椒品種上產(chǎn)卵數(shù)與葉片可溶性蛋白質(zhì)含量進(jìn)行相關(guān)性分析,結(jié)果表明,兩者不存在相關(guān)關(guān)系,相關(guān)系數(shù)為-0.417 28,p=0.121 7>0.05。
本文研究表明,螺旋粉虱對(duì)不同品種甜椒的產(chǎn)卵選擇存在顯著差異,總體上選擇性大小依次為‘古風(fēng)1號(hào)’、‘國(guó)禧205’、‘鄭椒甜寶’、‘古風(fēng)7號(hào)’、‘古風(fēng)6號(hào)’最強(qiáng),‘官爵’、‘富貴’等7種次之,最差的是‘金苗10號(hào)大甜椒’、‘京椒105’和‘特大型牟一號(hào)’。
寄主植物的營(yíng)養(yǎng)狀況影響植食性昆蟲的生長(zhǎng)、發(fā)育和繁殖,因而是影響植食性昆蟲選擇寄主的主要因素之一[12]。因此,本文對(duì)寄主植物葉片的單寧酸和總黃酮與螺旋粉虱產(chǎn)卵選擇的關(guān)系進(jìn)行研究,化學(xué)分析表明,葉片單寧酸和黃酮含量在供試品種間存在顯著差異,相關(guān)性分析表明,螺旋粉虱對(duì)不同甜椒品種的寄主選擇性與單寧酸、總黃酮不存在明顯的相關(guān)性,即單寧酸和總黃酮含量與螺旋粉虱的產(chǎn)卵選擇性關(guān)系不大。螺旋粉虱寄主選擇性與葉片糖含量存在顯著的正相關(guān)關(guān)系,而與可溶性蛋白質(zhì)含量相關(guān)關(guān)系不顯著。葉片內(nèi)其他營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的含量,如脂類、維生素、甾醇、無機(jī)鹽和水分等,特別是次生物質(zhì)可能對(duì)螺旋粉虱的寄主選擇性影響更大,還有待做進(jìn)一步的研究。
本文以產(chǎn)卵數(shù)目的多少作為選擇性大小的指標(biāo),其結(jié)果顯示螺旋粉虱在‘京椒105’和‘特大型牟一號(hào)’上的產(chǎn)卵量為0,可以作為螺旋粉虱抗蟲品種,以減輕螺旋粉虱對(duì)甜椒的為害。
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The oviposition preference ofAleurodicusdispersusand its relationship with the plant compounds extracted from different varieties ofCapsicum annuum
Cao Fengqin1, Cui Zhifu2, Liu Wanxue3, Fu Yueguan4,Dan Jianguo1, Liu Wenqing5, Gao Xi6
(1.College of Environmental and Plant Protection,University of Hainan,Danzhou571737,China;2.Hainan Academy of Reclamation Science,Haikou570206,China;
3.Institute of Plant Protection,Chinese Academy of Agricultural Sciences,Beijing100081,China;4.Institute of Environmental and Plant Protection,Chinese Academy of Tropical Agriculture,Danzhou571737,China;5.Hainan School of Agriculture,Haikou571100,China;6.College of Plant Protection,Yunnan Agricultural University,Kunming650201,China)
[Objective]To understand the oviposition preference ofAleurodicusdispersusRussell and its relationship with the plant compounds extracted from different varieties ofCapsicum annuum.[Method]The oviposition preference ofA.dispersusto different varieties of the sweet pepper,C.annuum,was studied by no free-choice method.And the plant compounds extracted were detected.[Result]The most favorite pimientos variety was‘Gufeng 7’.There was significant difference between‘Gufeng 7’and 8 other sweet pepper varieties,including‘Tedaxingmouyihao’,‘Jixing’,‘Jingjiao’and ‘Tedatianjiaoba’.There was no significant difference between‘Gufeng 7’and the other 7 varieties,including‘Guoxi205’and‘Zhengjiaotianbao’.The study showed that there was significant difference in the content of soluble sugars,proteins,tannin,flavone among different pimientoe varieties.[Conclusion]Correlation analysis indicated that the oviposition ofA.dispersuswas positively correlated with the content of soluble sugar in leaves,but it was not correlated with the content of soluble protein,tannin and flavone in leaves.
Aleurodicus dispersus; oviposition; plant compound;Capsicum annuum
S 436.41
A
10.3969/j.issn.0529-1542.2011.05.013
2010-10-11
2011-03-31
公益性行業(yè)(農(nóng)業(yè))科研專項(xiàng)(200803023);“十一五”國(guó)家科技支撐計(jì)劃課題(2006BAD08A17,2006BAD08A15)
* 通信作者 E-mail:zhifu555@163.com