劉海龍 李曉強(qiáng) 李智琴 趙 暉* 張 琪

(1 甘肅奇正藏藥有限公司，甘肅 蘭州 730100；2 首都醫(yī)科大學(xué)中醫(yī)藥學(xué)院，北京 100069)

紅花如意丸具有祛風(fēng)鎮(zhèn)痛，調(diào)經(jīng)血之功效，臨床用于陰道炎、月經(jīng)不調(diào)、痛經(jīng)等多種婦科疾患。而這類婦科疾病的發(fā)生多與體內(nèi)雌、孕激素水平異常有關(guān)，本實(shí)驗(yàn)通過腹腔注射外源性雌激素配合孕激素，建立下丘腦-垂體-性腺軸功能失調(diào)大鼠模型，在該模型上觀察紅花如意丸對(duì)大鼠垂體泌乳素（PRL）、孕酮（P）、雌二醇（E2）水平的影響。

1 材料與方法

1.1 動(dòng)物

SPF級(jí)雌性Wistar大鼠60只，體質(zhì)量180～200g，由軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供，合格證號(hào)：SCXK（軍）2007-004。

1.2 藥物及試劑

紅花如意丸，甘南佛閣藏藥有限公司，批號(hào)100102；桂枝茯苓膠囊，江蘇康緣藥業(yè)股份有限公司，批號(hào)091129；枸櫞酸他莫昔芬片，上海復(fù)旦復(fù)華藥業(yè)有限公司，批號(hào)090508；己烯雌酚注射液，上海通用藥業(yè)股份有限公司，批號(hào)020701；黃體酮注射液，上海通用藥業(yè)股份有限公司，090901；血清垂體泌乳素、孕酮、雌二醇放免檢測藥盒均由北京華英生物技術(shù)研究所提供。

1.3 儀器

放免儀器：r-911全自動(dòng)放免計(jì)數(shù)儀（中國科技大學(xué)實(shí)業(yè)總公司生產(chǎn)）；Biofuge15R低溫離心機(jī)（Heraeus sepatech德國）；JA-1003電子分析天平（上海精科天平廠）。

1.4 方法

1.4.1 分組

健康雌性Wistar大鼠70只，隨機(jī)分為7組：空白對(duì)照組，模型組，他莫昔芬組，紅花如意丸（0.156g/kg，0.469g/kg，1.407g/kg），桂枝茯苓膠囊組，每組10只。

1.4.2 模型制備

方法[1]除空白對(duì)照組大鼠外，其余大鼠腹腔注射雌二醇注射液，0.5mg/（kg·d），注射25d后，腹腔注射黃體酮注射液4mg/（kg·d），連續(xù)注射5d。在造模型開始連續(xù)灌胃給藥30d。

1.4.3 給藥方法

在造模型開始灌胃給藥，紅花如意丸小劑量組0.156g/kg、紅花如意丸中劑量組0.469g/kg、紅花如意丸大劑量組1.407g/kg、陽性對(duì)照組桂枝茯苓膠囊0.326g/kg，他莫昔芬片4.669mg/Kg，均連續(xù)用藥30d。模型組、正常組灌胃給予等容量的生理鹽水。

1.4.4 指標(biāo)檢測

末次給藥后，動(dòng)物禁食12h，麻醉取血，分離血清，放免法檢測血清垂體泌乳素、孕酮、雌二醇。

2 結(jié) 果

和正常組相比，模型組動(dòng)物血清雌二醇（E2）、垂體泌乳素（PRL）顯著增高（P＜0.01）；紅花如意丸（1.407g/kg）、他莫昔芬均能明顯下調(diào)雌二醇的濃度，和模型組相比差異顯著（P＜0.01或P＜0.05）；紅花如意丸（0.469g/kg、1.407g/kg）、桂枝茯苓膠囊組大鼠垂體泌乳素（PRL）含量均明顯低于模型組（P＜0.01或P＜0.05）。見表1。

表1 紅花如意丸對(duì)血清垂體泌乳素、孕酮、雌二醇的影響（±s）

表1 紅花如意丸對(duì)血清垂體泌乳素、孕酮、雌二醇的影響（±s）

注：與模型組比較1）P＜0.05，2）P＜0.01

垂體泌乳素(ug/L)正常 10 38.83±8.402) 9.98±1.62 12.13±4.052)模型 10 51.97±11.51 9.84±1.82 19.09±6.36紅花如意丸 0.156 9 49.60±8.67 10.40±1.64 17.10±6.46紅花如意丸 0.469 9 47.78±13.41 11.78±1.91 13.21±6.761)紅花如意丸 1.407 9 38.92±9.642) 11.13±2.34 11.20±3.812)桂枝茯苓膠囊 0.326 9 46.23±9.71 10.36±1.80 10.35±4.082)他莫昔芬 0.005 9 40.54±9.801) 9.86±1.78 15.00±5.83組別 劑量(g/kg)n 雌二醇(ng/L)孕酮(ug/L)

3 討 論

臨床研究表明，紅花如意丸具有明顯抗痛經(jīng)，治療盆腔炎癥，改善盆腔粘連作用。生理狀態(tài)下，體內(nèi)雌二醇水平和孕酮水平在生殖內(nèi)分泌功能穩(wěn)定和維持方面具有十分重要的意義。臨床女性生殖內(nèi)分泌疾病如月經(jīng)失調(diào)、閉經(jīng)、不孕、子宮肌瘤、子宮內(nèi)膜異位癥等婦科疾患的發(fā)生多與體內(nèi)雌、孕激素水平異常有關(guān)[2-4]。

雌激素可刺激大鼠垂體泌乳素細(xì)胞增生和垂體泌乳素分泌增加，垂體泌乳素含量增加不僅能直接刺激乳腺組織增生，而且進(jìn)一步抑制孕激素的分泌，刺激雌激素的生成，本實(shí)驗(yàn)長期給予外源性雌激素配合孕激素腹腔注射后，模型大鼠出現(xiàn)丘腦-垂體-性腺軸功能失調(diào)，血清雌二醇，垂體泌乳素含量均較正常組明顯提高（P＜0.01）。西醫(yī)常采用雌激素受體部分激動(dòng)劑他莫昔芬與雌二醇競爭雌激素受體，從而達(dá)到減弱雌激素作用的目的[5,6]。本次實(shí)驗(yàn)觀察到他莫昔芬可明顯降低雌、孕激素負(fù)荷大鼠血清雌二醇水平，較模型組差異顯著（P＜0.05），但血清垂體泌乳素和模型組相比沒有明顯差異。紅花如意丸和桂枝茯苓膠囊均能降低雌、孕激素負(fù)荷大鼠垂體泌乳素含量，紅花如意丸（1.407g/kg）還可明顯下調(diào)血清雌二醇含量。本次研究結(jié)果，提示紅花如意丸可通過調(diào)節(jié)垂體-性腺系統(tǒng)功能，改善機(jī)體內(nèi)分泌環(huán)境。對(duì)改善痛經(jīng)、持續(xù)下腹痛及月經(jīng)異常癥狀，防止子宮內(nèi)膜受損，可能具有獨(dú)特的效果，相關(guān)作用及機(jī)理有待于深入研究。

參考文獻(xiàn)

[1]黃國鈞,黃勤挽.醫(yī)藥實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型-制作與應(yīng)用[M].北京:化學(xué)工業(yè)出版社,2008:572.

[2]高婉麗,馮力民,張銘,等.絕經(jīng)期乳腺癌婦女服用他莫昔芬后子宮內(nèi)膜雌、孕激素受體變化及Ki-67的表達(dá)[J].首都醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào),2005,26(5):600.

[3]潘凌亞,吳葆楨,韓美玲.子宮內(nèi)膜異位癥流行病學(xué)研究現(xiàn)狀[J].中華婦產(chǎn)科雜志,1992,27(5):305.

[4]陳忠年,杜心谷,劉伯寧.婦產(chǎn)科病理學(xué)[M].上海:上海醫(yī)科大學(xué)出版社,1996:268.

[5]孫呈勇,田進(jìn).垂體泌乳素的基礎(chǔ)研究[J].中國性科學(xué),2006,15(2):33.

[6]馮光榮,陶文靜.益氣化瘀法對(duì)子宮肌瘤患者血清雌、孕激素水平影響的研究[J].中醫(yī)研究,2009,22(7):52.