來(lái)祝檁 郭超群 李運(yùn)琴
(河南省焦作市中心血站,河南 焦作 454000)
冷沉淀的檢測(cè)指標(biāo)主要是凝血因子Ⅷ和纖維蛋白原(Fbg),臨床上主要用于甲型血友病、血管性假性血友病以及先天性或獲得性纖維蛋白缺乏導(dǎo)致的出血、外科大手術(shù)及大出血的治療,冷沉淀凝血因子質(zhì)量的差異直接影響治療效果。CA-50 和CA-510是希森美康公司CA系列的半自動(dòng)/全自動(dòng)血凝儀,依據(jù)散色光加百分比(去本底)原理,可快速對(duì)血液中的凝血因子進(jìn)行相關(guān)檢測(cè)。為了更好地對(duì)冷沉淀中的Ⅷ因子和Fbg進(jìn)行質(zhì)量控制,本文對(duì)這兩種型號(hào)血凝儀檢測(cè)凝血因子Ⅷ和Fbg的結(jié)果進(jìn)行比較,報(bào)道如下。
半自動(dòng)血凝儀(型號(hào)CA-50,日本Sysmex公司生產(chǎn));全自動(dòng)血凝儀(型號(hào)CA-510,希森美康醫(yī)用電子(上海)有限公司生產(chǎn));因子Ⅷ活性測(cè)定試劑、纖維蛋白原測(cè)定試劑、Owren's Veronal 緩沖液、活化部分凝血活酶時(shí)間測(cè)定試劑(APTT)、CaCl2溶液、Ⅷ因子和纖維蛋白原質(zhì)控品均由希森美康醫(yī)用電子(上海)有限公司提供。
按照儀器使用說(shuō)明書(shū)進(jìn)行操作,在檢測(cè)前用Ⅷ因子和纖維蛋白原質(zhì)控品給CA-50和CA-510重新設(shè)定標(biāo)準(zhǔn)曲線;融化一袋冷沉淀,混勻后分出10份樣品,分別用CA-50和CA-510檢測(cè)其中的Ⅷ因子和Fbg。
采用配對(duì)t檢驗(yàn),結(jié)果如表1所示。
兩種型號(hào)儀器檢測(cè)Ⅷ因子和Fbg結(jié)果無(wú)顯著性差異,但CA-510 的重復(fù)性遠(yuǎn)遠(yuǎn)優(yōu)于CA-50。
影響CA-50檢測(cè)結(jié)果重復(fù)性的最重要的因素就是加樣過(guò)程。因?yàn)槭鞘謩?dòng)加樣且樣品用量非常少(僅有5~10μL),加樣量的微小變化就可以導(dǎo)致檢測(cè)結(jié)果明顯偏高或偏低。在實(shí)際工作中,吸液和加樣的力度很難保持不變。同時(shí),若加樣槍頭與加樣槍結(jié)合不夠緊密,也會(huì)造成吸液及加樣誤差,使檢測(cè)結(jié)果偏低。在使用CA-50時(shí),一方面要盡量準(zhǔn)確加樣,另一方面要注意加第二試劑和第三試劑的速度,速度太慢則儀器感應(yīng)不到,會(huì)終止反應(yīng)。CA-510采用的是自動(dòng)吸取標(biāo)本和試劑,自動(dòng)定標(biāo),自動(dòng)稀釋的一體化操作流程,操作簡(jiǎn)便、快速,定量精準(zhǔn),重復(fù)性好。但檢測(cè)前需處理好樣品及試劑,樣品液面不能有氣泡,否則檢測(cè)時(shí)儀器將認(rèn)為樣品量不足而不處理該樣品;試劑不足則試驗(yàn)會(huì)被迫中止,影響檢測(cè)效率。
表1 不同型號(hào)儀器檢測(cè)冷沉淀中Ⅷ因子和Fbg結(jié)果