朱衛(wèi)國(guó)，李 明

(宜昌人福藥業(yè)有限責(zé)任公司，湖北 宜昌 443005)

小兒復(fù)方福爾可定糖漿是一種治療小兒咳嗽的藥物，其主藥為愈創(chuàng)木酚甘油醚、福爾可定和馬來(lái)酸氯苯那敏。作者在此對(duì)HPLC法測(cè)定條件進(jìn)行了探討，建立了同時(shí)測(cè)定愈創(chuàng)木酚甘油醚、福爾可定和馬來(lái)酸氯苯那敏含量的方法，為小兒復(fù)方福爾可定糖漿的質(zhì)量控制提供了依據(jù)。

1 實(shí)驗(yàn)

1.1 試藥及儀器

小兒復(fù)方福爾可定糖漿(規(guī)格60 mL，批號(hào)為080423)。

乙腈、甲醇均為色譜純，磷酸、三乙胺和庚烷磺酸鈉均為分析純；水為重蒸水；愈創(chuàng)木酚甘油醚、福爾可定和馬來(lái)酸氯苯那敏對(duì)照品，中國(guó)藥品生物制品檢定所。

Agilent 1200型高效液相色譜儀。

1.2 方法

1.2.1 色譜條件與系統(tǒng)適用性條件

用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑。色譜柱：C18(4.6 mm×250 mm，5 μm)，流動(dòng)相：0.05 mol·L-1磷酸二氫鉀(每1000 mL加庚烷磺酸鈉4.0 g、三乙胺1.0 mL，用磷酸調(diào)pH值至2.5)-乙腈-甲醇(50∶20∶30)，流速1 mL·min-1，檢測(cè)波長(zhǎng)：愈創(chuàng)木酚甘油醚為224 nm，福爾可定和馬來(lái)酸氯苯那敏為214 nm。理論板數(shù)按愈創(chuàng)木酚甘油醚峰計(jì)算應(yīng)不低于2000，各峰之間的分離度應(yīng)符合要求。色譜圖見圖1。

1.福爾可定 2.愈創(chuàng)木酚甘油醚 3.馬來(lái)酸氯苯那敏

1.2.2 含量測(cè)定

精密量取供試品(批號(hào)080423)5 mL，置25 mL量瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻，作為供試品溶液。再精密量取供試品溶液5 mL，置100 mL量瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻。精密量取20 μL注入液相色譜儀，記錄色譜圖；另取愈創(chuàng)木酚甘油醚對(duì)照品適量，同法測(cè)定。按外標(biāo)法以峰面積計(jì)算，得小兒復(fù)方福爾可定糖漿中愈創(chuàng)木酚甘油醚含量。

同法測(cè)定小兒復(fù)方福爾可定糖漿中福爾可定和馬來(lái)酸氯苯那敏的含量。

2 結(jié)果與討論

2.1 輔料干擾實(shí)驗(yàn)

按制劑處方配制空白對(duì)照樣品，制成空白對(duì)照品溶液，按色譜條件，取空白對(duì)照品溶液20 μL注入液相色譜儀，記錄色譜圖。結(jié)果表明，輔料不干擾本品主成分的含量測(cè)定。

2.2 標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制

分別精密稱取適量愈創(chuàng)木酚甘油醚、福爾可定和馬來(lái)酸氯苯那敏對(duì)照品，用流動(dòng)相配制成系列濃度的溶液。精密量取20 μL，注入色譜儀中，記錄色譜圖，以峰面積為縱坐標(biāo)、濃度為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，并進(jìn)行線性回歸。結(jié)果表明：愈創(chuàng)木酚甘油醚在16.04～80.20 μg·mL-1、福爾可定在7.96～39.80 μg·mL-1、馬來(lái)酸氯苯那敏在8.16～40.80 μg·mL-1濃度范圍內(nèi)線性關(guān)系良好，回歸方程(n=5)分別為：y=40.89c+33.0(R=0.9999)、y=70.22c+4.9(R=0.9999)和y=30.88c+10.9(R=0.9999)。

2.3 系統(tǒng)適用性

精密量取供試品適量(批號(hào)080423)，制成供試品溶液，精密量取20 μL注入色譜儀，重復(fù)進(jìn)樣5次，記錄峰面積。結(jié)果表明，愈創(chuàng)木酚甘油醚、福爾可定和馬來(lái)酸氯苯那敏的RSD分別為0.09%、0.60%、1.00%。

2.4 穩(wěn)定性

精密量取供試品適量(批號(hào)080423)，制成供試品溶液，分別于0 h、2 h、4 h、6 h、8 h精密量取20 μL注入色譜儀，記錄峰面積。結(jié)果表明，供試品溶液在8 h內(nèi)穩(wěn)定。

2.5 重復(fù)性

取供試品(批號(hào)080423)6份，分別測(cè)定愈創(chuàng)木酚甘油醚、福爾可定和馬來(lái)酸氯苯那敏的含量。結(jié)果表明，愈創(chuàng)木酚甘油醚含量為100.3%，RSD為0.55%；福爾可定含量為105.9%，RSD為0.18%；馬來(lái)酸氯苯那敏含量為100.6%，RSD為0.33%。

2.6 回收率

分別精密稱取愈創(chuàng)木酚甘油醚、福爾可定和馬來(lái)酸氯苯那敏對(duì)照品適量，按處方比例加輔料，用水制成高、中、低(120%、100%、80%)3種含量溶液各3份。精密量取20 μL，按色譜條件測(cè)定。結(jié)果表明，回收率(n=9)分別為：愈創(chuàng)木酚甘油醚99.2%、福爾可定99.0%、馬來(lái)酸氯苯那敏99.5%。

2.7 樣品測(cè)定

精密量取供試品適量，制成供試品溶液；另分別精密稱取愈創(chuàng)木酚甘油醚、福爾可定和馬來(lái)酸氯苯那敏對(duì)照品適量，同法制成對(duì)照品溶液。分別精密量取上述溶液各20 μL，按色譜條件測(cè)定。結(jié)果表明，含量分別為：愈創(chuàng)木酚甘油醚99.0%、99.0%、98.7%，福爾可定99.1%、99.5%、99.4%，馬來(lái)酸氯苯那敏98.7%、98.4%、99.2%。

2.8 討論

2.8.1 檢測(cè)波長(zhǎng)的確定

分別取適量福爾可定、馬來(lái)酸氯苯那敏和愈創(chuàng)木酚甘油醚對(duì)照品，加流動(dòng)相溶解并稀釋制成20 μg·mL-1的溶液。根據(jù)紫外掃描圖譜可知，福爾可定在214 nm波長(zhǎng)處有最大吸收，馬來(lái)酸氯苯那敏在262 nm處有最大吸收，愈創(chuàng)木酚甘油醚在224 nm處有最大吸收。由于樣品組分中福爾可定和馬來(lái)酸氯苯那敏濃度為0.1 mg·mL-1，而愈創(chuàng)木酚甘油醚濃度為4 mg·mL-1，組分之間濃度相差很大，不宜同時(shí)測(cè)定3種組分的含量。福爾可定和馬來(lái)酸氯苯那敏濃度相當(dāng)，且濃度均較低，可以考慮同時(shí)測(cè)定兩者的含量。福爾可定在214 nm波長(zhǎng)處有最大吸收；馬來(lái)酸氯苯那敏在200～250 nm范圍內(nèi)無(wú)最大吸收，但在214 nm波長(zhǎng)處有較大吸收。故選擇214 nm作為福爾可定和馬來(lái)酸氯苯那敏含量測(cè)定的檢測(cè)波長(zhǎng)。愈創(chuàng)木酚甘油醚在224 nm處有最大吸收，故選擇224 nm作為愈創(chuàng)木酚甘油醚含量測(cè)定的檢測(cè)波長(zhǎng)。

2.8.2 流動(dòng)相的選擇[1，2]

參照復(fù)方福爾可定糖漿國(guó)家藥品標(biāo)準(zhǔn)WS1-(X-128)-2003Z，首先選用0.05 mol·L-1磷酸二氫鉀(每1000 mL加4.0 g庚烷磺酸鈉、1.0 mL三乙胺，磷酸調(diào)pH值為3.0)-乙腈=70∶30為流動(dòng)相，結(jié)果分離效果并不理想。后經(jīng)逐步優(yōu)化，選用0.05 mol·L-1磷酸二氫鉀(每1000 mL加4.0 g庚烷磺酸鈉、1.0 mL三乙胺，磷酸調(diào)pH值為2.5)-甲醇-乙腈=50∶30∶20為流動(dòng)相，結(jié)果3組分出峰時(shí)間合適，各組分峰之間的分離度符合要求。

3 結(jié)論

采用HPLC法同時(shí)測(cè)定愈創(chuàng)木酚甘油醚、福爾可定和馬來(lái)酸氯苯那敏的含量。愈創(chuàng)木酚甘油醚在16.04～80.20 μg·mL-1、福爾可定在7.96～39.80 μg·mL-1、馬來(lái)酸氯苯那敏在8.16～40.80 μg·mL-1濃度范圍內(nèi)線性關(guān)系良好，R=0.9999，平均回收率分別為99.2%、99.0%和99.5%(n=9)。該法具有簡(jiǎn)單、快速、靈敏的特點(diǎn)，可同時(shí)測(cè)定愈創(chuàng)木酚甘油醚、福爾可定和馬來(lái)酸氯苯那敏的含量。

[1] WS1-(X-128)-2003Z，復(fù)方福爾可定糖漿[S].

[2] 楊文遠(yuǎn)，吳曉紅.用HPLC法同時(shí)測(cè)定可立停中的愈創(chuàng)木酚甘油醚、馬來(lái)酸氯苯那敏和鹽酸甲基麻黃堿[J].寧夏大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版)，2002，23(4)：352-353，387.