郄彥昭 占秀安 李 星 呼慧娟 王永俠 浙江大學(xué)飼料科學(xué)研究所，杭州 310029

硒是動(dòng)物必需的微量元素之一，參與機(jī)體谷胱甘肽過氧化物酶的合成，甲狀腺激素的代謝，從而保持動(dòng)物健康，促進(jìn)機(jī)體生長(zhǎng)。硒有無機(jī)硒和有機(jī)硒兩種形式。與無機(jī)硒相比，有機(jī)硒在動(dòng)物體內(nèi)具有吸收率高、生物活性強(qiáng)、毒性低、環(huán)境污染小等特點(diǎn)。因此，近年來有機(jī)硒替代無機(jī)硒成為研究熱點(diǎn)。賈建英報(bào)道，妊娠后期母豬日糧中添加酵母硒與亞硒酸鈉相比，極顯著地提高了斷奶個(gè)體重和母豬泌乳力，同時(shí)有提高產(chǎn)活仔數(shù)、初生窩重、斷奶窩重和初生個(gè)體重的趨勢(shì)，而硒代蛋氨酸是酵母硒的主要成分。為此，本試驗(yàn)以高純度DL-硒代蛋氨酸作為有機(jī)硒源，以亞硒酸鈉為對(duì)照，研究母豬補(bǔ)充不同硒源對(duì)后代乳豬組織硒含量、抗氧化功能及代謝的影響，旨在探討硒代蛋氨酸的母體效應(yīng)，為DL-硒代蛋氨酸的產(chǎn)業(yè)化開發(fā)和應(yīng)用提供科學(xué)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

DL-硒代蛋氨酸（純度99.5%），亞硒酸鈉(純度98%)，由Sigma公司提供；試驗(yàn)動(dòng)物為長(zhǎng)×大母豬；試驗(yàn)飼糧為參照NRC（1998）妊娠期和泌乳期母豬營(yíng)養(yǎng)需要配合而成的顆粒狀飼料，日糧組成和營(yíng)養(yǎng)水平見表1。

1.2 試驗(yàn)方法

1.2.1 飼養(yǎng)試驗(yàn)

試驗(yàn)選取妊娠后期、胎次相同的長(zhǎng)×大母豬12頭，按飼養(yǎng)試驗(yàn)要求分為2組，每組6個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)1頭豬，兩組分別飼喂添加了亞硒酸鈉和DL-硒代蛋氨酸的日糧，添加量均為0.3mgSe/kg。試驗(yàn)分妊娠后期（32d）和泌乳期（28d）兩階段，共計(jì)60d，分別飼喂妊娠期和泌乳期日糧。試驗(yàn)?zāi)肛i按時(shí)日喂3次，妊娠后期每次每頭喂料1.3kg，泌乳期每次每頭2kg。乳豬喂乳不喂料直至斷奶。自由飲水，保持產(chǎn)房清潔、通風(fēng)。

1.2.2 樣品采集與保存

飼養(yǎng)試驗(yàn)結(jié)束后，每個(gè)重復(fù)選取體重相近的乳豬（母）1頭，共12頭，耳靜脈采血制備血清，屠宰取肝臟、腎臟、胰臟、胸腺、甲狀腺和肌肉樣品，置于-70℃冰箱保存。

1.2.3 指標(biāo)測(cè)定及方法

乳豬生長(zhǎng)性能指標(biāo)的測(cè)定：初生窩重、斷奶窩重等生長(zhǎng)性能指標(biāo)按常規(guī)方法計(jì)算。

乳豬組織硒含量測(cè)定：稱取0.2 g左右樣品于微波消解罐中，加入1mL過氧化氫，擰緊罐蓋，于微波消解系統(tǒng)內(nèi)消解7min左右，消解至無色透明液，冷卻后取出用超純水定容至10mL，取過濾消化液2mL于10mL試管中，加50%（V/V）的鹽酸溶液1mL，加入5%硫脲和5%抗壞血酸的混合液1mL，反應(yīng)15min后用超純水定容，混勻，于AFS-230a雙道原子熒光光度計(jì)上機(jī)測(cè)定，同樣方法做試劑空白。

表1 試驗(yàn)日糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平（風(fēng)干基礎(chǔ) %）

乳豬組織抗氧化指標(biāo)測(cè)定：總抗氧化能力（TAOC）、谷胱甘肽過氧化物酶（GSH-Px）、超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽（GSH）、丙二醛（MDA）采用試劑盒進(jìn)行測(cè)定，試劑盒購(gòu)自南京建成生物工程研究所。

乳豬血清中激素指標(biāo)測(cè)定：三碘甲腺原氨酸（T3）、甲狀腺素（T4）、游離三碘甲腺原氨酸（FT3）、游離甲狀腺素（FT4）、胰島素（Ins）、胰高血糖素（Glu）和胰島素樣生長(zhǎng)因子-I（IGF-I）采用試劑盒方法測(cè)定，其中T3、T4、FT3、FT4試劑盒購(gòu)自南京建成生物工程研究所，Ins和Glu試劑盒購(gòu)自原子高科股份有限公司，IGF-1試劑盒購(gòu)自上海森雄科技實(shí)業(yè)有限公司。

1.3 數(shù)據(jù)處理

用SPSS16.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，數(shù)據(jù)以平均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（X±SD）表示。

2 結(jié)果與分析

2.1 母豬生產(chǎn)性能和乳豬生長(zhǎng)性能

由表2可知，不同硒源間乳豬初生窩重和初生個(gè)體重?zé)o顯著差異 （P>0.05），但硒代蛋氨酸組斷奶窩重、斷奶個(gè)體重、平均日增重較亞硒酸鈉組分別提高了 8.00%（P<0.05）、9.93%（P<0.05）、12.20%（P<0.05）。

表2 母豬補(bǔ)充不同硒源對(duì)后代乳豬生長(zhǎng)性能的影響（n=6）

2.2 乳豬組織硒含量

由表3可知，與對(duì)照組相比，試驗(yàn)組乳豬肝臟、腎臟、胰臟、肌肉、胸腺和甲狀腺硒含量分別提高了2.54%（P<0.01）、6.94%（P<0.01）、54.29%（P<0.01）、37.37%（P<0.01）、7.69% （P<0.05）和 12.82% （P<0.05）。

2.3 乳豬組織抗氧化指標(biāo)

表4顯示，與亞硒酸鈉組比，硒代蛋氨酸組乳豬肝臟、腎臟、胰臟和肌肉T-AOC分別提高了37.03% （P<0.05）、29.35% （P<0.01）、112.52% （P<0.01）和 14.56%（P<0.05），GSH-Px 活力相應(yīng)地提高了 13.44%（P<0.05）、5.90%（P<0.05）、22.84%（P<0.01）和 22.75%（P<0.05）；胰臟和肌肉中 SOD 活力分別提高了 24.60%（P<0.01）和 17.39%（P<0.01）；腎臟、胰臟和肌肉中GSH含量分別提高了18.19%（P<0.05）、131.14%（P<0.01）和 21.83%（P<0.05）；肝臟、腎臟、胰臟中MDA含量分別降低了7.76%（P<0.05）、11.02%（P<0.05）和 25.55%（P<0.01）。

表3 母豬補(bǔ)充不同硒源對(duì)后代乳豬組織硒含量的影響（n=6）

表4 母豬補(bǔ)充不同硒源對(duì)后代乳豬組織抗氧化指標(biāo)的影響（n=6）

2.4 乳豬血清激素水平

由表5可見，與亞硒酸鈉組比，硒代蛋氨酸組乳豬血清 T3濃度提高了13.89%（P<0.05），T4和Glu濃度分別降低了8.43%（P<0.05）和38.51%（P<0.01），T4/T3和 Glu/Ins值分別降低了 19.66%（P<0.01）和 40.61%（P<0.01），而 FT3、FT4、Ins 和 IGF-1濃度差異不顯著（P>0.05）。

3 討論

3.1 母豬補(bǔ)充不同硒源對(duì)后代乳豬生長(zhǎng)性能的影響

本試驗(yàn)結(jié)果表明，妊娠后期（32 d）和泌乳期（28d）母豬飼添同一硒水平（0.3 mg/kg）DL-硒代蛋氨酸和亞硒酸鈉對(duì)后代乳豬初生窩重、初生個(gè)體重影響差異不顯著（P>0.05），這與Gunter等對(duì)母牛和Yoon等對(duì)母豬研究結(jié)果基本一致。但硒代蛋氨酸組乳豬斷奶窩重、斷奶個(gè)體重和平均日增重顯著高于亞硒酸鈉組，說明硒代蛋氨酸改善了乳豬的生長(zhǎng)性能。而Mahan等報(bào)道，在妊娠母豬產(chǎn)前（6d）補(bǔ)充同一硒水平（0.3mg/kg）酵母硒較亞硒酸鈉有提高后代乳豬斷奶窩重的趨勢(shì)，但差異不顯著。這可能是日糧補(bǔ)充的硒源及時(shí)間不同造成的。

表5 母豬補(bǔ)充不同硒源對(duì)后代乳豬血清激素水平的影響（n=6）

3.2 母豬補(bǔ)充不同硒源對(duì)后代乳豬組織硒含量的影響

本研究結(jié)果表明，母豬補(bǔ)充DL-硒代蛋氨酸較亞硒酸鈉顯著提高了后代乳豬組織硒含量，這與Mahan和Kim的研究結(jié)果基本一致。由于試驗(yàn)期間乳豬喂乳不喂料，因此乳豬組織硒含量的變化是由母體胎盤轉(zhuǎn)移硒水平和乳硒含量不同引起的，可見DL-硒代蛋氨酸較亞硒酸鈉能更為有效地將硒通過胎盤和乳汁傳遞給后代。這主要由硒代蛋氨酸和亞硒酸鈉在體內(nèi)代謝機(jī)制不同引起的。亞硒酸鈉在動(dòng)物腸道中被動(dòng)吸收，而硒代蛋氨酸則以主動(dòng)運(yùn)輸形式吸收。硒隨血液進(jìn)入組織主要分布在腎、肝、胰和脾中，少量蓄積在肌肉、骨骼中。硒不管以何種形式進(jìn)入組織，都與蛋白質(zhì)相結(jié)合。由于硒代蛋氨酸類似于蛋氨酸的分子結(jié)構(gòu)，硒代蛋氨酸可替代蛋氨酸參入到蛋白質(zhì)合成中。因此硒代蛋氨酸組母體組織硒含量較高，通過胎盤和乳汁轉(zhuǎn)移的硒也相應(yīng)較多。在比較硒沉積的組織差異性時(shí)發(fā)現(xiàn)，兩組硒沉積量高低順序均為腎臟>肝臟>胰臟>肌肉>胸腺>甲狀腺，這與Zhan在肥育豬上的研究結(jié)果一致。

3.3 母豬補(bǔ)充不同硒源對(duì)乳豬抗氧化功能的影響

總抗氧化能力（T-AOC）是用于衡量機(jī)體抗氧化系統(tǒng)功能的綜合指標(biāo)。谷胱甘肽過氧化物酶（GSH-Px）和超氧化物歧化酶（SOD）是體內(nèi)的抗氧化酶，發(fā)揮清除體內(nèi)自由基和脂質(zhì)過氧化物的作用，硒半胱氨酸是GSH-Px的活性中心。GSH在GSH-Px的催化作用下與過氧化物反應(yīng)生成無毒的水和醇類。丙二醛（MDA）含量可反映機(jī)體脂質(zhì)過氧化的程度。本研究結(jié)果顯示，在母豬飼糧中添加同一硒水平（0.3mg/kg）的DL-硒代蛋氨酸，較亞硒酸鈉提高了后代乳豬組織GSH-Px和SOD活力及T-AOC、GSH水平，降低了MDA含量。這與Gunter、Awadeh、Pehrson等在母牛及犢牛上和Mahan（2000）在母豬及乳豬上的報(bào)道一致。由此提示，DL-硒代蛋氨酸較亞硒酸鈉增強(qiáng)了后代乳豬的抗氧化能力。

3.4 母豬補(bǔ)充不同硒源對(duì)乳豬激素分泌的影響

甲狀腺激素T4在脫碘酶（DI）的作用下轉(zhuǎn)化為T3，T3的生理效應(yīng)是T4的5～8倍。硒是脫碘酶的重要組成部分。研究證實(shí)，動(dòng)物缺硒能引起肝、腎DI-I活性下降，造成血清T3明顯下降，T4明顯升高；缺硒也能引起垂體、腦和褐色脂肪組織的DI-Ⅱ活性下降，造成垂體和大腦中的T3下降。本試驗(yàn)中，硒代蛋氨酸組后代乳豬血清T3水平顯著高于亞硒酸鈉組，而T4水平顯著低于亞硒酸鈉組。這與Awadeh在妊娠母牛上的研究報(bào)道一致。由此說明，DL-硒代蛋氨酸較亞硒酸鈉能提高后代乳豬機(jī)體的代謝水平。

硒具有降低血糖和調(diào)控胰島素介導(dǎo)的代謝過程等擬胰島素作用。硒缺乏可引起大鼠胰島β細(xì)胞分泌功能改變，胰島分泌儲(chǔ)備減少。胰島素能促進(jìn)脂肪的沉積、蛋白質(zhì)和核酸的合成，而胰高血糖素則加快脂解作用。因此Glu/Ins比值往往決定著脂類合成或分解的方向。本研究結(jié)果顯示，母豬補(bǔ)充DL-硒代蛋氨酸較亞硒酸鈉顯著提高了后代乳豬血清Ins水平，而降低了Glu水平，從而減小了Glu/Ins值。由此提示，DL-硒代蛋氨酸能有效促進(jìn)后代乳豬脂肪的沉積、蛋白質(zhì)和核酸的合成，抑制機(jī)體的脂解作用，進(jìn)而發(fā)揮促進(jìn)乳豬生長(zhǎng)的作用。胰島素樣生長(zhǎng)因子在動(dòng)物生長(zhǎng)、新陳代謝、繁殖等過程中發(fā)揮重要作用。

4 結(jié)論

母豬飼糧補(bǔ)充0.3 mg/kg硒水平的DL-硒代蛋氨酸較亞硒酸鈉可提高后代乳豬組織硒沉積量，增強(qiáng)其抗氧化能力，有效調(diào)節(jié)激素分泌，而促進(jìn)乳豬生長(zhǎng)。

（略）