馬紅燕，辛建偉，張淑利，王 浩，梁金榜

（延安大學(xué) 化學(xué)與化工學(xué)院，延安大學(xué) 分析化學(xué)研究所，陜西 延安 716000）

磺基水楊酸 －鐵（Ⅲ）顯色體系間接測(cè)定左旋多巴的研究

馬紅燕，辛建偉，張淑利，王 浩，梁金榜

（延安大學(xué) 化學(xué)與化工學(xué)院，延安大學(xué) 分析化學(xué)研究所，陜西 延安 716000）

磺基水楊酸與 Fe（Ⅲ）在 pH＝2.00~3.00的溶液中形成紫紅色磺基水楊酸合鐵（Ⅲ）配離子，左旋多巴的還原性，可將 Fe（Ⅲ）定量還原為 Fe（Ⅱ），使 Fe（Ⅲ）－磺基水楊酸體系的顏色褪去，其吸光度降低值與左旋多巴含量在一定范圍內(nèi)呈良好的線性關(guān)系，據(jù)此提出了基于 Fe（Ⅲ）－磺基水楊酸顯色體系間接分光光度法測(cè)定左旋多巴含量的新方法。對(duì)實(shí)驗(yàn)條件進(jìn)行了研究和選擇。方法線性范圍為4.0×10－7~2.0×10－5mol／L，檢出限為3.1×10－7mol／L，回收率為98.0%~ 101.0%。該方法簡(jiǎn)單、快速、靈敏，用于片劑中左旋多巴的測(cè)定，結(jié)果滿意。

分光光度法；左旋多巴；鐵；磺基水楊酸；顯色體系

左旋多巴 （Levodopa）化學(xué)名稱為3－羥基 －L－酪氨酸，為抗震顫麻痹藥，是體內(nèi)合成去甲腎上腺素、多巴胺等的前體之一，可通過血腦屏障進(jìn)入中樞，經(jīng)多巴脫羧酶作用轉(zhuǎn)化成多巴胺而發(fā)揮作用，與卡比多巴聯(lián)合用藥，在治療帕金森病上取得了顯著療效［1］。盡管這種治療方法已有 30多年的應(yīng)用歷史，但目前仍有不可替代的地位，因此，測(cè)定藥物制劑中左旋多巴的含量具有重要的現(xiàn)實(shí)意義［2］。目前，測(cè)定左旋多巴方法較多，主要有高效液相色譜法［3］、熒光光度法［4］、電化學(xué)發(fā)光法［5］、毛細(xì)管電泳法［6］和薄層色譜法［7］等。而基于 Fe（Ⅲ）與磺基水楊酸顯色體系進(jìn)行左旋多巴含量測(cè)定的研究尚未見文獻(xiàn)報(bào)道。磺基水楊酸與 Fe（Ⅲ）在 pH為2.00~ 3.00的溶液中形成紫紅色磺基水楊酸合鐵（Ⅲ）配離子，溶液在502nm處有最大吸收峰，左旋多巴的存在，可使Fe（Ⅲ）定量還原為Fe（Ⅱ），從而使Fe（Ⅲ）與磺基水楊酸所生成的配合物減少，吸光度值相應(yīng)降低，吸光度的降低值與左旋多巴含量在一定范圍內(nèi)呈良好的線性關(guān)系，據(jù)此提出了基于 Fe（Ⅲ）－磺基水楊酸體系間接測(cè)定左旋多巴含量的光度分析新方法。該方法簡(jiǎn)便、快速、準(zhǔn)確。

1 實(shí)驗(yàn)部分

1.1 儀器與試劑

UVmini－1240紫外可見分光光度計(jì)（日本島津公司）。

左旋多巴標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液：1.00×10－3mol／L，準(zhǔn)確稱取0.0493 g左旋多巴標(biāo)準(zhǔn)品（中國藥品生物制品檢定所），加入 0.001 mol／L的鹽酸10 mL溶解，用蒸餾水定容至 250 mL。使用時(shí)逐級(jí)稀釋至所需濃度；磺 基水 楊 酸 溶 液：0.01 mol／L，準(zhǔn) 確 稱 取1.0944 g磺基水楊酸，以水溶解并定容至500 mL容量瓶中；Fe（Ⅲ）溶液：0.001 mol／L，準(zhǔn)確稱取0.1205 g NH4Fe（SO4）2·12H2O，用5 mL鹽酸（1＋1）加熱溶解，用水定容至250 mL容量瓶中；

高氯酸溶液：0.1 mol／L，準(zhǔn)確移取4.2 mL高氯酸，用蒸餾水定容至500 mL容量瓶中；

所有試劑均為分析純，水為二次石英蒸餾水。

1.2 實(shí)驗(yàn)方法

于25 mL容量瓶中依次加入濃度為0.001 mol／L Fe（Ⅲ）溶液 5.00 mL，左旋多巴標(biāo)準(zhǔn)溶液適量，0.01 mol／L的磺基水楊酸溶液 2.00 mL，0.1mol／L高氯酸溶液1.00 mL，用蒸餾水定容至刻度，搖勻。在紫外可見分光光度計(jì)上用1 cm比色皿，以蒸餾水為參比溶液，在 502 nm定波長(zhǎng)下測(cè)定溶液的吸光度，計(jì)算ΔA（ΔA＝A0－A，A0為不加左旋多巴標(biāo)準(zhǔn)溶液的吸光度，A為加入左旋多巴標(biāo)準(zhǔn)溶液后所測(cè)吸光度）。

2 結(jié)果與討論

2.1 吸收曲線

圖1為磺基水楊酸與Fe（Ⅲ）在高氯酸介質(zhì)中的吸收光譜。由圖 1可知，磺基水楊酸與 Fe（Ⅲ）在 pH＝2.00~3.00的溶液中形成紫紅色磺基水楊酸合鐵（Ⅲ）配離子，其最大吸收波長(zhǎng)為502 nm（曲線1）；左旋多巴的加入，可將 Fe（Ⅲ）還原為 Fe（Ⅱ），使吸光度值有所下降，但最大吸收波長(zhǎng)未變（曲線2）。吸光度降低值 ΔA與左旋多巴濃度在一定范圍內(nèi)呈良好的線性關(guān)系，可用于左旋多巴含量的測(cè)定。

圖1 吸收曲線

2.2 Fe（Ⅲ）用量的選擇

改變Fe（Ⅲ）溶液的濃度，試驗(yàn)其用量對(duì)體系ΔA值的影響。結(jié)果表明，加入0.001 mol／L Fe（Ⅲ）溶液5.00 mL時(shí)，吸光度ΔA大且穩(wěn)定，故選擇加入濃度為0.001 mol／L的Fe（Ⅲ）溶液5.00 mL。

2.3 磺基水楊酸用量的選擇

磺基水楊酸溶液用量在1.50~10.00 mL時(shí)，該體系 ΔA值大且 穩(wěn)定，實(shí)驗(yàn)選 擇 加入 濃 度 為0.01 mol／L的磺基水楊酸溶液2.00 mL。

2.4 高氯酸用量的選擇

據(jù) 文獻(xiàn)報(bào)道，F(xiàn)e（Ⅲ）與磺基水楊酸在pH＝2.00~3.00的溶液中可生成 1∶1的紫紅色配合物；在 pH＝4.00~7.00的溶液中，生成1∶2的橙色配合物；在pH＝8.00~10.00的溶液中，生成1∶3的黃色配合物。本實(shí)驗(yàn)選用在 pH＝2.00~3.00的溶液進(jìn)行測(cè)定，選用高氯酸調(diào)節(jié)溶液酸度。

當(dāng)高氯酸溶液用量在 0.50~5.00 mL時(shí)，吸光度值變化不大，實(shí)驗(yàn)選擇加入1.00 mL 0.1 mol／L高氯酸溶液以控制體系的酸度。

2.5 表面活性劑的選擇

分別依次加入十二烷基磺酸鈉（SLS）、氯化十六烷基吡啶（CPC）、乳化劑（OP）、十二烷基苯磺酸鈉（SDBS）、十六烷基三甲基溴化銨（CTMAB）、十二烷基硫酸鈉（SDS）、β－環(huán)糊精（β－CD）、聚乙烯醇（PVA）等表面活性劑，以試驗(yàn)表面活性劑對(duì)體系有無影響。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，表面活性劑對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果基本無影響。

2.6 穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)

實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，按實(shí)驗(yàn)方法配好溶液后，放置20 min，ΔA即達(dá)最大值，24 h內(nèi)基本不變。

2.7 干擾測(cè)定

在選定實(shí)驗(yàn)條件下，考察了樣品中可能含有的共存物對(duì)左旋多巴測(cè)定的影響。取 2.0×10－6mol／L的左旋多巴標(biāo)準(zhǔn)溶液，以加入干擾物對(duì)體系吸光度值的影響相對(duì)誤差不超過 ±5%為限，實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，1000倍的糊精、D－果糖、葡萄糖、淀粉，500倍的檸檬酸、酒石酸鉀鈉、蔗糖，200倍的羧甲基纖維素鈉，50倍的Ba2＋、Ca2＋、Mg2＋、Cu2＋，15倍的 Cr3＋無干擾。

2.8 線性范圍、精密度和檢出限

在上述選定的實(shí)驗(yàn)條件下，左旋多巴濃度在4.0 ×10－7~2.0×10－5mol／L范圍內(nèi)，其濃度與 ΔA呈良好的線性關(guān)系，線性方程為 ΔA＝15325c＋0.0083，相關(guān)系數(shù)為 0.9983，對(duì) 2.0×10－6mol／L左旋多巴溶液5次平行測(cè)定，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為0.53%；根據(jù)IUPAC的規(guī)定，以3S／S0計(jì)算，本法對(duì)左旋多巴的檢出限為 3.1×10－7mol／L。

2.9 樣品分析

對(duì)同一批號(hào)的左旋多巴片（上海福達(dá)制藥有限公司，批號(hào)：080102），隨機(jī)抽取5片，稱取其總質(zhì)量，研磨，稱取一定量研細(xì)的粉末（相當(dāng)于 0.0493 g左旋多巴），加入0.001 mol／L的鹽酸溶液10 mL攪拌溶解，用水定容至250mL容量瓶中，干過濾，棄去初濾液，得到所需溶液。量取一定量試樣溶液，按實(shí)驗(yàn)方法測(cè)定，同時(shí)進(jìn)行加標(biāo)回收實(shí)驗(yàn)，結(jié)果見表1。

表1 片劑中左旋多巴測(cè)定結(jié)果及方法回收率（n＝5）

［1］孟慧.高效毛細(xì)管電泳法測(cè)定血清中左旋多巴的含量［J］.人民軍醫(yī)，2004，47（6）：323－325.

［2］遲強(qiáng)，梅興國.左旋多巴分析方法研究概況［J］.國際藥物研究雜志，2007，31（5）：369－373.

［3］徐麗灑，孫勇，張麗，等.HPLC法測(cè)定左旋多巴包合物中主藥含量［J］.藥品檢驗(yàn)，2007，18（10）：770－771.

［4］Pagani A P，Cabezón M A，Ibá?ez G A.Simultaneous kinetic－spectrofluorometric determination of levodopa and carbidopa using partial least－squares regression［J］.Analytical Sciences，2009，25（5）：633－638.

［5］馬紅燕，鄭行望，章竹君.流動(dòng)注射電化學(xué)發(fā)光分析法測(cè)定左旋多巴的研究［J］.分析測(cè)試學(xué)報(bào)，2005，24（4）：58－60.

［6］王春，王志，韓丹丹，等.毛細(xì)管電泳法同時(shí)測(cè)定血清中的左旋多巴和甲基多巴［J］.色譜，2006，24（4）：389－391.

［7］楊靜.薄層色譜快速檢驗(yàn)鑒別左旋多巴片［J］.華西藥學(xué)雜志，2007，22（4）：479－480.

［責(zé)任編輯 李曉霞］

Study on the Indirectly Determ ination of Levodopa by Sulfosalicylic Acid－iron（Ⅲ）Color Reaction System MA Hong－yan，XIN Jian－wei，ZHANG Shu－li，

WANG HAO，LIANG Jin－biang
（College of Chemistry and Chemical Engineering，Institute of Analytical Chemistry，Yan an University，Yan an 716000，China）

The sulfosalicylic acid and Fe（Ⅲ）could form a purple－red complex in pH＝2.00~3.00 solution，the reducing nature of levodopa could reduce Fe（Ⅲ）to Fe（Ⅱ），thus the absorbance of the Fe（Ⅲ）－sulfosalicylic system decreased.The absorbance reduction of Fe（Ⅲ）－sulfosalicylic system and the contents of levodopa appeared linear relationships.A new method for the indirectly determination of levodopa has been developed based on the characteristic.Different conditions affecting the absorbance were studied and optimized.Under the optimum experimental conditions，the linear range was 4.0×10－7~2.0×10－5mol／L，the detection limit for levodopa was 3.1×10－7mol／L and the recoverieswere 98.0%－101.0%.Themethod was simple，accurate and sensitive，and has been used to determine the levodopa in tabletswith satisfactory results.

spectrophotometry；levodopa；Fe；sulfosalicylic acid；color reaction

O657.3

A

1004-602X（2011）01-0047-03

2010 -11 -01

陜西省教育廳專項(xiàng)科研基金資助課題（09JK821）；延安市科技局科技計(jì)劃項(xiàng)目（2008ks－20）；延安大學(xué)大學(xué)生科技創(chuàng)新訓(xùn)練計(jì)劃項(xiàng)目

馬紅燕（1966—），女，陜西延安人，延安大學(xué)教授。