阮殿清,史默怡,李建志,楊麗珍,王亞賢

(1.木蘭縣疾病控制中心,黑龍江 木蘭 151900;2.黑龍江中醫(yī)藥大學(xué),黑龍江 哈爾濱 150040)

有很多中藥具有抗菌消炎的功效,更令人欣喜的是細(xì)菌不易對(duì)中藥產(chǎn)生耐藥性,因?yàn)橹兴幊煞謴?fù)雜,單味藥中也往往同時(shí)含有多種成分,能作用于細(xì)菌代謝的多個(gè)環(huán)節(jié),因此較抗生素不易產(chǎn)生耐藥性。我國有著豐富的中草藥資源,藥用植物種類約為11 020種,其中極少部分作抑菌、抗菌活性研究[1]。

1 實(shí)驗(yàn)材料

1.1 儀器 電熱恒溫培養(yǎng)箱(D NP-9082,杭州匯爾儀器設(shè)備有限公司);醫(yī)用超凈工作臺(tái)(S W-C J-1F D,常州諾基儀器有限公司);分析天平(XP6,瑞士)。

1.2 菌株來源 金黃色葡萄球菌、耐甲氧西林金黃色葡萄球菌、腸球菌、耐萬古霉素腸球菌均從 2010年3～8月黑龍江中醫(yī)藥大學(xué)附屬第一醫(yī)院不同的臨床病人標(biāo)本中分離,實(shí)驗(yàn)前對(duì)菌種進(jìn)行了形態(tài),染色性,生化反應(yīng)和抗原性鑒定。

1.3 實(shí)驗(yàn)中藥 五倍子、黃連、大黃、黃柏、黃芩、赤芍、白頭翁、射干、地丁、敗醬草、金銀花、魚腥草。

1.4 方法

1.4.1 中藥提取液的制備 中藥原藥均由黑龍江中醫(yī)藥大學(xué)附屬第一醫(yī)院藥房提供。采用二次煮沸法[2-3]。稱取中藥黃連 300g,加入蒸餾水 1 000mL,浸泡 20min,強(qiáng)火加熱煮沸,文火煎煮 30min,攪拌,過濾;藥渣再加入蒸餾水 250m L按上法煎熬、過濾;兩次藥液合并濃縮成 300mL,調(diào)pH值至 7.4～7.6,并置離心管中,以 4 000r/min離心 10min;將中藥原液以高壓蒸氣滅菌 8磅 20min滅菌后即為實(shí)驗(yàn)藥液(1m L藥液相當(dāng)于原藥材 1g)。

1.4.2 菌液制備 在無菌條件下,用接種環(huán)分別將金黃色葡萄球菌、耐甲氧西林金黃色葡萄球菌、腸球菌、耐萬古霉素腸球菌等 4種細(xì)菌,分別接種于瓊脂斜面培養(yǎng)基,37℃培養(yǎng) 24h,傳種于無菌肉湯培養(yǎng)基中培養(yǎng)18h,再傳種于無菌肉湯培養(yǎng)基中培養(yǎng) 6h后,用前將菌液濃度 1∶1 000稀釋。

2 實(shí)驗(yàn)方法與結(jié)果

采用中藥抗菌試驗(yàn)試管法[4]測(cè)定藥物的最低抑菌濃度。見表 1,表 2,表 3。

表2 12種中藥對(duì)金黃色葡萄球菌和耐甲氧西林金黃色葡萄球菌抑菌活性對(duì)比

表3 12種中藥對(duì)腸球菌和耐萬古霉素腸球菌抑菌活性對(duì)比

3 討論

由結(jié)果可知,五倍子、黃連、大黃、黃柏、黃芩、赤芍、白頭翁、射干、地丁、敗醬草、金銀花、魚腥草等 12種中草藥對(duì)金黃色葡萄球菌、耐甲氧西林金黃色葡萄球菌、腸球菌、耐萬古霉素腸球菌等 4種菌株均有不同程度抑制活性,其中五倍子、黃連、大黃、黃柏、黃芩對(duì)金黃色葡萄球菌和耐甲氧西林金黃色葡萄球菌有較強(qiáng)的抑菌作用;五倍子、黃連、黃柏、白頭翁、大黃、敗醬草對(duì)腸球菌和耐萬古霉素腸球菌有較強(qiáng)的抑菌活性,而且從表中我們可以看到,中藥對(duì)耐藥菌株和非耐藥菌株抑菌活性無明顯差異。本文所述的 12種中草藥皆為常用的內(nèi)服藥物,可為臨床治療各種感染性疾病提供參考。

[1]段勁生,王梅,胡本進(jìn).中草藥源殺菌劑的研究進(jìn)展[J].安徽農(nóng)業(yè)科學(xué),2007,35(3):755,788.

[2]陳奇.中藥藥理研究方法[M].北京:人民衛(wèi)生出版社,1991:259-262.

[3]黃通旺,楊灝強(qiáng),龐珊.抑制 β-內(nèi)酰胺酶的中草藥篩選研究[J].汕頭大學(xué)學(xué)報(bào),2000,15(2):46-49.

[4]杜思邈,馬麗強(qiáng),孫俊杰,等.苦參提取物體外抗菌實(shí)驗(yàn)研究[J].中醫(yī)藥學(xué)報(bào),2010,38(3):74-76.