王曉亮 ，李知新 ，王進香 ，閆曉芹 ，周秀玲 ，宋權儒，周海寧，張玉玲，吳亞文，王 磊，張成蓮，張和平，楊春生

（1.寧夏動物疾病預防控制中心，寧夏 銀川 750002；2.寧夏動物衛(wèi)生監(jiān)督所，寧夏 銀川 750002）

2009—2010年寧夏部分地區(qū)養(yǎng)殖戶分別從外省引進不同數(shù)量的3月齡-2歲肉牛，經長途販運到達本地后1周內發(fā)病，主要表現(xiàn)為咳嗽、關節(jié)炎，部分牛便血。采集病變肺臟，經中國農業(yè)科學院哈爾濱獸醫(yī)研究所進行病原分離鑒定和PCR檢測，證實為牛傳染性支原體肺炎。為了摸清由本病在各地區(qū)引起的疫情和流行情況，本實驗室采集我區(qū)發(fā)生的4起牛支原體肺炎的疫區(qū)及其周邊地區(qū)牛血清495份，羊血清46份進行血清學調查。

1 材料與方法

1.1 血清樣本的采集

2009年3月—2010年11月，采集疫區(qū)牛血清298份，采集疫區(qū)周邊地區(qū)牛血清197份，羊血清46份。寧夏地區(qū)均未對相關動物進行牛支原體疫苗接種。

1.1.2 主要檢測試劑和方法

采用牛支原體間接ELISA試劑盒進行檢測。比利時牛支原體肺炎間接ELISA抗體檢測試劑盒（批號:SMYC10I13）購自青島瑞爾生物技術有限公司，嚴格按照試劑盒說明書進行操作。

2 結果

2.1 外調牛與本地牛接觸后臨床發(fā)病情況

表1 引進牛及農戶自養(yǎng)牛一周內臨床發(fā)病情況

由表1看出，外地染疫牛經長途販運引進無疫區(qū)后，可在一周內迅速發(fā)病，嚴重者引起死亡，臨床發(fā)病率為12.1%～95%，死亡率為2.6%～5.0%。由于當?shù)嘏]有進行牛支原體疫苗接種，因此，可在當?shù)赝优Ｖg迅速傳播并引發(fā)死亡，臨床發(fā)病率為11.5%～100%不等，死亡率為1.0%～30%。由于疫區(qū)飼養(yǎng)隔離較好，因此在疫區(qū)外地區(qū)調查牛并未見臨床發(fā)病現(xiàn)象。

2.2 引進牛進入本地引發(fā)疫情后的抗體檢測

表2 引進牛引發(fā)疫情后的ELISA檢測情況

引進牛經長途販運后一周，除死亡牛外，對疫區(qū)牛只全群進行血樣采集，ELISA檢測發(fā)現(xiàn)，引進牛牛支原體血清抗體陽性率為78.9%～100%；農戶原存欄牛與染疫牛同居飼養(yǎng)后，牛支原體抗體陽性率為24.2%～100%，表明陰性牛與陽性牛接觸后牛支原體可在群間迅速擴散；疫區(qū)外牛只血清抗體檢測全部為陰性；同時還發(fā)現(xiàn)，當?shù)鼐d羊與染疫牛同居后，牛支原體抗體檢測陽性率為16.7%和27.5%，表明當?shù)鼐d羊可以感染牛支原體肺炎。

3 討論和分析

研究證明牛支原體是牛呼吸道疾病的主要病因，已成為北美和歐洲牛群中呼吸道疾病和多發(fā)性關節(jié)炎的重要病原。本調查采用牛支原體間接ELISA檢測試劑盒對寧夏發(fā)生4起疫情的地區(qū)及其周邊地區(qū)養(yǎng)牛場進行的血清學調查顯示，外調牛經長途運輸1周后臨床發(fā)病率平均為49.2%，死亡率平均為3.7%；本地與陽性牛接觸1周后臨床發(fā)病率平均為43.3%，死亡率平均為13.6%。這表明疫區(qū)帶菌牛經長途販運后進入非疫區(qū)，不但能在短時間內迅速發(fā)病，而且能夠引起與其有接觸的牛發(fā)病，如若不加控制，死亡數(shù)和感染數(shù)會急劇增加。

本調查結果顯示，與染疫牛同居的綿羊，經檢測有部分為隱形感染。此帶菌羊與其他羊或牛同居后是否會造成感染需作進一步試驗。

關于該病的防控措施，最有效的手段就是對引進牛進行血清學篩查。目前，加拿大、瑞士、比利時已經成功生產檢測牛支原體抗體的試劑盒，在臨床診斷上發(fā)揮了重要作用。我國僅建立了相關分子生物學的診斷方法[1-3]，還未見有商品化的ELISA診斷試劑。臨床上，發(fā)現(xiàn)感染牛應立即隔離。對癥狀輕微的牛臨床上可以使用對支原體敏感的藥物進行治療，如環(huán)丙沙星、泰妙菌素等。由于在調運牛時往往忽視了對牛支原體病檢測，長途運輸?shù)葢币蛩乜蓪е略谛碌牡貐^(qū)大量發(fā)病，因此，建議養(yǎng)殖戶在引進牛時，應隔離飼養(yǎng)并逐頭采血進行血清抗體檢測。對血清抗體陽性牛，應立即實行更為嚴格的隔離措施，密切觀察臨床表現(xiàn)，如若有明顯的臨癥癥狀，建議立即撲殺并無害化處理，決不能將發(fā)病牛進行交易，防止引起更大范圍的流行。

牛支原體引起的牛傳染性支原體肺炎已經成為今年來嚴重威脅我國肉牛養(yǎng)殖安全的一種傳染病，但我國對該病的防控措施和手段還很有限。臨床準確、快速的診斷和牛的調運控制是目前有效防控該病的主要手段。

[1]李大偉，張彥明，黃燦平，等.應用巢式PCR方法檢測牛支原體肺炎[J].中國動物檢疫，2010，27（4）:28-29.

[2]石磊，龔瑞，尹爭艷，等.肉牛傳染性牛支原體肺炎流行的診斷[J].華中農業(yè)大學學報，2008，27（5）:629-633.

[3]李媛，董慧，張美晶，等.牛霉形體PCR檢測方法的建立[J].中國獸醫(yī)科學，2009，39（5）:416-420.