黃 春

(Waters China)

亞硝胺廣泛存在于香煙、糧食、蔬菜、水果、水體、土壤等自然界體中，并且相互遷移.亞硝胺具有致癌作用，很多人對自然界中亞硝胺的形成、遷移及致癌機理進行了大量的研究，從而引起了開發(fā)分析、監(jiān)測水體中亞硝胺方法的需求.

目前，研究分析亞硝胺方法很多，主要集中在對煙草特有的4種亞硝胺.不同的樣品基質(zhì)，對分析工作有不同的要求.例如:分析煙草，就要著重考慮基質(zhì)干擾的問題;分析水體，既要考慮基質(zhì)干擾的問題，更要考慮目標物富集的效果.現(xiàn)在分析方法主要有液質(zhì)及氣質(zhì)方法，困難點都是集中在樣品前處理上.

本文介紹一種能夠直接進樣，全自動、快速地分析水體中4種痕量亞硝胺的在線固相萃取/超高效液質(zhì)聯(lián)用方法.

1 實驗部分

1.1 實驗材料與儀器

N-亞硝基降煙堿(NNN);N-亞硝基新煙草堿(NAT);N-亞硝基假木賊堿(NAB);4-甲基亞硝基吡啶基丁酮(NNK)，由北京卷煙廠提供.

儀器:Waters On-Line SPE UPLC/TQD.色譜柱:UPLC HSS T3 2.1 × 50 mm 1.8 um

1.2 質(zhì)譜方法開發(fā)

啟動Waters提供的自動開發(fā)質(zhì)譜方法的功能:將標液放入瓶中，點擊圖1中start鍵

圖1 儀器工作界面示意圖

1.3 在線固相萃取及超高效液相方法

四元超高壓液相色譜 A=Water;B=Water;C=MeOH+20%ACN;D=33/33/33 MeOH/Acetone/Hexane

二元超高壓液相色譜 A=0.1%FA in Water;B=ACN

2 結(jié)果與討論

2.1 靈敏度

進樣量:15 mL;該系統(tǒng)做標準溶液的最小靈敏度為:NNK=14 ppt;NNN=22 ppt;NAB=12 ppt;NAT=6 ppt

2.2 標準曲線

低于ppb級的水樣15 mL，直接進樣.標準譜圖及標準曲線見圖2和圖3.

圖2 標準譜圖

圖3 標準曲線圖

2.3 自來水基質(zhì)加標實驗

取自來水(加標)15 mL，直接進樣，最小靈敏度為:NNK=50 ppt;NNN=70 ppt;NAB=35 ppt;NAT=40 ppt

2.4 重現(xiàn)性實驗

自來水基質(zhì)水樣(ppb級)5 mL，直接進樣分析，定量重現(xiàn)性RSD%均小于10%.

3 結(jié)論

該系統(tǒng)操作簡單，直接進水樣，即可靈敏、快速、全自動化地監(jiān)測水樣中的亞硝胺.對樣品的富集作用明顯，純化效果好，顯著地減少了水體離子抑制作用，使得該方法分析實際水樣時，靈敏度仍然很高.在On-line SPE/UPLC/Synapt上和在On-line SPE/UPLC/TQD上檢測均可以，后者的靈敏度更高一些，能達到ppt級，這是普通的質(zhì)譜所不能達到的.使用該系統(tǒng)，無需再做回收率等繁瑣的程序，直接做工作曲線、直接進樣、直接得到分析結(jié)果.從前處理、分離、分析均一體化、自動化，所以，分析結(jié)果的重現(xiàn)性很好.由于整個分析均在不間斷密閉管路中進行，溶劑使用量大大減少，極大地保障了操作人員的健康.