甘 窈,高新學(xué),艾 明,陳建梅,黎雪梅,況 利△

(1.重慶醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院心理衛(wèi)生中心 400016;2.山東省濟(jì)寧市精神病防治院精神六科 272051）

自殺是一種因社會(huì)心理沖突而產(chǎn)生的蓄意終止自己生命,有目的、有計(jì)劃的自我毀滅行為。自殺未遂定義為主動(dòng)結(jié)束自己生命,未造成死亡的結(jié)局,包括決心自殺但未死亡和自殺意圖不強(qiáng)而蓄意自傷[1]。以往研究表明,5-羥色胺轉(zhuǎn)運(yùn)體(5-hyd roxytryp tamine transporter,5-H TT)基因可能影響自殺未遂者體內(nèi)的5-羥色胺(5-hyd roxytryp tam ine,5-H T)的傳遞[2]。目前,罹患精神病已被證明是自殺行為的危險(xiǎn)因素[3]。關(guān)于精神病自殺未遂核心家系的5-HTT基因研究在國(guó)內(nèi)尚少,因此,本課題對(duì)5-H TT基因第二內(nèi)含子多態(tài)性(serotonin transporter gene 2 VNTR po lymorphism,5-HTTVNTR)與有精神病的自殺未遂核心家系的相關(guān)性進(jìn)行研究。

1 資料與方法

1.1 一般資料 研究對(duì)象來(lái)自2007年1月至2008年3月重慶醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院心理衛(wèi)生中心住院部、急診科就診的漢族自殺未遂者及其生物學(xué)父母。自殺未遂者納入標(biāo)準(zhǔn):(1)中國(guó)漢族人群;(2)年齡不小于15歲;(3)患有精神疾病(包括精神分裂癥、情感性精神病以及其他精神疾病),并采用DSMIV-TR軸I障礙用臨床定式檢查(structured clinical interview for DSM-IV-TR axis I disorders-patient,SCID-I/P)[4]進(jìn)行評(píng)估及診斷。排除標(biāo)準(zhǔn):排除蓄意自傷類自殺者。本研究共收集86個(gè)核心家系共258人(其中有精神病自殺未遂的核心家系57個(gè))。將所有核心家系成員分成兩組:患者組86例,其中男38例,女48例;年齡16～45歲,平均(32.6±11.8)歲;父母組172例,父、母各 86例。

1.2 測(cè)評(píng)工具 測(cè)評(píng)工具為自編家系調(diào)查表、分子遺傳學(xué)研究家庭問(wèn)卷(family interview for genetic studies,FIGS)以及肖水源自殺意念調(diào)查表[5]。

1.3 研究方法

1.3.1 基因組DNA的制備 采集肘靜脈血5 m L,采用常規(guī)酚-氯仿法抽提全血標(biāo)本基因組DNA。

1.3.2 引物 5-H TTVN TR多態(tài)性位點(diǎn)引物參考文獻(xiàn)[6]。上游引物:5'-GTC GTT GCC GCT CTG AAT GC-3',下游引物 :5'-GAG GGA CTG AGC TGG ACA ACC AC-3',由上海生物工程技術(shù)有限公司合成。聚合酶鏈反應(yīng)(polymerase chain reaction,PCR)擴(kuò)增試劑盒亦由上海生物工程技術(shù)有限公司提供。

1.3.3 PCR反應(yīng) PCR反應(yīng)體系為PCR反應(yīng)液共50μL,含50～100 ng基因組 DNA、10 pmoL引物、1U TaTaRa Ex Taq酶、10×Ex Taq緩沖液(不含 Mg2+)、2.5 mmol/L dNTPs及1.5 mmol/L MgCl2,用雙蒸水補(bǔ)充至50μL。PCR反應(yīng)條件為95℃預(yù)變性4 m in,94℃變性60 s,61℃退火60 s,72℃延伸1 m in,再72℃延伸10 m in,共35個(gè)循環(huán)。將 PCR產(chǎn)物置于2%瓊脂糖凝膠中電泳分離,以溴乙錠染色法檢視各區(qū)帶,與相對(duì)分子質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)物比較各片段的大小。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 一般資料應(yīng)用SPSS13.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行分析。遺傳學(xué)資料采用Spielman RS編寫(xiě)的傳遞不平衡檢驗(yàn)(transmission disequilibrium test,TDT)原理,運(yùn)用 Genehunter 2.1軟件進(jìn)行分析。用Hardy-W einberg平衡檢驗(yàn)分析基因型頻率和基因頻率。計(jì)數(shù)資料用χ2檢驗(yàn),以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 H ardy-Weinberg平衡的吻合度檢驗(yàn) 5-H TTVNTR多態(tài)性位點(diǎn):父母組與患者組基因型頻率和等位基因頻率的總體分布比較差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=0.939,P=0.33;χ2=4.892,P=0.087),見(jiàn)表 1。

表1 患者組及父母組5-H TTVNTR基因型及等位基因頻率的分布[n(%)]

2.2 自殺未遂精神病患者5-H TT基因的2個(gè)多態(tài)性位點(diǎn)TDT分析 在57個(gè)有精神病自殺未遂核心家系中有71個(gè)雜合子父母納入5-H TTVNTR多態(tài)性位點(diǎn)的分析,其中,有29個(gè)10等位基因和42個(gè)12等位基因傳給了患病子女(χ2=2.38,P＞0.05)。提示5-H TTVNTR多態(tài)性位點(diǎn)與有精神病自殺未遂者不存在連鎖不平衡。

表2 自殺未遂精神病患者5-HTTVNTR各位點(diǎn)的 TDT分析(個(gè))

3 討 論

5-HTT基因第二內(nèi)含子區(qū)存在17 bp可變數(shù)目串聯(lián)重復(fù)多態(tài)性(即5-H TTVNTR)。目前,5-H TTVN TR與精神病及自殺行為的家族遺傳研究甚少,且關(guān)聯(lián)性尚不確切。本研究通過(guò)PCR技術(shù)在5-H TTVN TR位點(diǎn)擴(kuò)增出兩個(gè)等位基因10 repeat(簡(jiǎn)稱10)與12 repeat(簡(jiǎn)稱12)組成3種基因型10/10、10/12及12/12,267 bp片段為10 repeat,301 bp為12 repeat。研究表明5-H TTVNTR位點(diǎn)與自殺未遂精神病患者間不存在連鎖不平衡。

國(guó)內(nèi)外對(duì)精神病患者的研究表明5-H TTVNTR基因與精神病自殺行為無(wú)關(guān)[7-12]。Yen等[13]比較了中國(guó)臺(tái)灣160例抑郁癥患者及169名正常人,結(jié)果也提示5-H TTVNTR與自殺行為無(wú)明顯關(guān)聯(lián)。Kohlrausch等[14]研究藥物對(duì)精神分裂癥患者5-H TTVNTR的影響時(shí),也未得到相關(guān)性的結(jié)果。上述研究與本研究結(jié)果一致。盡管5-H TT與某些精神病間存在關(guān)聯(lián),精神病本身是多基因的遺傳疾病,但其中5-H TTVNTR可能與精神疾病并沒(méi)有關(guān)系。此外,有研究報(bào)道顯示自殺性家族史是自殺行為的明顯特征[15]。有研究對(duì)有或無(wú)自殺行為的精神障礙患者進(jìn)行比較,發(fā)現(xiàn)其中自殺未遂患者的親屬中有自殺行為現(xiàn)象比較普遍,自殺行為的風(fēng)險(xiǎn)與遺傳因素及家族傾向有關(guān)[16]。高樹(shù)貴等[17]對(duì)5-H TTVN TR基因型與情感性精神障礙的家系研究也說(shuō)明二者之間不存在連鎖不平衡。因此,目前為數(shù)不多的家系研究提示,5-H TTVN TR與自殺行為的家族遺傳性不一定相關(guān)。

由于本研究以家族作為對(duì)象,樣本收集相對(duì)困難,且主要研究其傳遞是否存在不平衡,故在自殺未遂精神病患者中沒(méi)有細(xì)分患有何種精神疾病。因此,5-H TTVNTR與有精神病的自殺未遂核心家系的相關(guān)性還有待進(jìn)一步更深入細(xì)致的研究與分析。

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