朱 玲，蔡晨星，吳嬰南

(南京醫(yī)科大學(xué)口腔醫(yī)學(xué)研究所，南京醫(yī)科大學(xué)附屬口腔醫(yī)院兒童牙病科，江蘇南京 210029)

不同飲料對(duì)乳牙釉質(zhì)酸蝕作用初探

朱 玲，蔡晨星，吳嬰南

(南京醫(yī)科大學(xué)口腔醫(yī)學(xué)研究所，南京醫(yī)科大學(xué)附屬口腔醫(yī)院兒童牙病科，江蘇南京 210029)

目的:使用激光熒光法測(cè)定市售飲料對(duì)乳牙釉質(zhì)表面的酸蝕作用。方法:48個(gè)離體乳前牙隨機(jī)分為4組，分別浸泡于可樂、鮮橙汁、優(yōu)酸乳和去離子水中25 h，每5 h換液1次。通過掃描電鏡進(jìn)行釉質(zhì)表面形態(tài)學(xué)觀察，并使用激光熒光診斷儀進(jìn)行定量分析。結(jié)果:可樂組和橙汁組樣本酸蝕脫礦明顯，實(shí)驗(yàn)前后激光熒光值差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，可樂酸蝕脫礦能力顯著高于橙汁。優(yōu)酸乳組脫礦不明顯，且電鏡下可見鈣化物沉積。結(jié)論:軟飲料可造成乳牙釉質(zhì)酸蝕脫礦，應(yīng)當(dāng)控制兒童軟飲料的消耗并建議改變飲用方式。

酸蝕癥;脫礦;飲料

［牙體牙髓牙周病學(xué)雜志，2011，21(1):24］

［Chinese Journal of Conservativedentistry，2011，21(1):24］

酸蝕癥(dental erosion)是指無細(xì)菌參與的情況下，由接觸牙面的酸或其螯合物的化學(xué)侵蝕作用而引起的慢性，病理性的牙體硬組織表面淺層喪失［1］。兒童，作為一個(gè)特殊的團(tuán)體，其酸蝕癥的發(fā)病率相對(duì)較高，有調(diào)查顯示兒童酸蝕癥的發(fā)生與飲料的消耗顯著相關(guān)［2］。隨著人們口腔保健意識(shí)的提高，市售飲料對(duì)于牙齒的酸蝕作用也日益受到關(guān)注。本研究目的在于使用激光熒光法測(cè)定市售飲料對(duì)乳牙釉質(zhì)表面的酸蝕作用，并進(jìn)行組織學(xué)和形態(tài)學(xué)的觀察，為家長(zhǎng)選擇及醫(yī)生建議提供依據(jù)。

1 材料和方法

1.1 樣本制備

江蘇省口腔醫(yī)院兒童牙病科收集因滯留拔除的乳前牙48個(gè)，要求牙冠外形完整，無齲損、無隱裂、無釉質(zhì)發(fā)育不全。常規(guī)清潔牙齒，干燥后，除頰面外其余部分包埋于自凝樹脂中，制作成10 mm×10 mm的試件，再在每個(gè)牙齒頰面留3 mm×3 mm的釉質(zhì)窗，其余部分用抗酸指甲油封閉兩遍。

1.2 飲料選擇及初始pH值測(cè)定

根據(jù)網(wǎng)絡(luò)搜索，選擇本地市場(chǎng)份額最大的飲料品種。①碳酸飲料類:可口可樂;②純鮮果汁類:味全每日C鮮橙汁;③乳酸飲料類:伊利優(yōu)酸乳。所有飲料開瓶后各取50 mL，用酸度計(jì)進(jìn)行pH值測(cè)定。

1.3 實(shí)驗(yàn)分組及樣本處理

48個(gè)乳牙試件隨機(jī)分為可樂組、橙汁組、優(yōu)酸乳組及空白對(duì)照4組，每組12個(gè)。分別浸泡于上述飲料及去離子水中(空白組)，每5 h換液1次，持續(xù)浸泡25 h［3］。取出后沖洗吹干。

1.4 牙齒脫礦程度的定量測(cè)量

分別于實(shí)驗(yàn)前和不同飲料浸泡處理后，采用激光熒光診斷儀DIAGNOdent(Kavo，Biberach，Germany)對(duì)各樣本開窗部位進(jìn)行定量測(cè)量，記錄實(shí)驗(yàn)前后樣本的激光熒光讀數(shù)，即激光熒光值(laser fluorescence value，LF 值)［4］。每次每個(gè)樣本隨機(jī)測(cè)3個(gè)點(diǎn)，重復(fù)測(cè)3次取平均值，每測(cè)一組數(shù)據(jù)前均進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)校正。

1.5 掃描電鏡觀察

各組標(biāo)本經(jīng)飲料浸泡處理后清洗干燥，噴鍍金膜，用掃描電鏡(JSM－6300，日本)在統(tǒng)一放大倍數(shù)下進(jìn)行觀察。

1.6 統(tǒng)計(jì)分析

采用SPSS13.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，用自身配對(duì)的t檢驗(yàn)比較各組實(shí)驗(yàn)前后的激光熒光值的差異;ANOVA方差分析比較各組處理前后激光熒光值的總體差異，并使用LSD法進(jìn)行兩兩比較，檢驗(yàn)水平 α=0.05。

2 結(jié)果

2.1 各類飲料pH值測(cè)量結(jié)果

各類飲料初始pH值分別為:可樂2.38，鮮橙汁 4.01，優(yōu)酸乳 4.06。

2.2 肉眼觀察

經(jīng)飲料浸泡處理后牙面均有不同程度的改變。可樂組牙面有明顯的色素沉著，呈棕褐色;橙汁組牙面失去光澤呈白堊色改變;優(yōu)酸乳組牙面失去光澤，但白堊色改變不明顯;空白組無明顯差異。

2.3 掃描電鏡觀察

不同飲料處理的牙面均呈現(xiàn)出不同程度的破壞。可樂組最重，牙面脫礦嚴(yán)重，可見較多的釉質(zhì)凹陷，可觀察到釉質(zhì)溶解(圖1);橙汁組次之，凹陷較可樂組少且淺(圖2);優(yōu)酸乳組最輕，僅見少量零星小凹陷，此外還可觀察到散在的礦物質(zhì)沉積(圖3);正常乳牙釉質(zhì)表面(圖4)。

2.4 處理前后激光熒光值測(cè)定

實(shí)驗(yàn)前，4組基線熒光值無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＞0.05)，經(jīng)不同飲料浸泡25 h后，可樂組和橙汁組的熒光值較處理前明顯增加，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05);而優(yōu)酸乳組和空白組實(shí)驗(yàn)前后的熒光值均無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＞0.05)。實(shí)驗(yàn)后4組兩兩分析結(jié)果顯示，可樂組的激光熒光值最高，與其他各組相比差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，其次為橙汁組，明顯高于優(yōu)酸乳組和空白組(P＜0.05)(表1)，而優(yōu)酸乳組最低與空白組相比差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)(表1)。

圖1 可樂浸泡后(×1 000)

圖2 橙汁浸泡后(×1 000)

圖3 優(yōu)酸乳浸泡后(×1000)

圖4 正常乳牙釉質(zhì)表面(×1000)

表1 各組實(shí)驗(yàn)前后激光熒光值比較(±s)

表1 各組實(shí)驗(yàn)前后激光熒光值比較(±s)

*與同組實(shí)驗(yàn)前相比P＜0.05;不同字母為各組間相比P＜0.05

分組 實(shí)驗(yàn)前 實(shí)驗(yàn)后可樂組 6.88 ±0.76A 23.53 ±9.82*A橙汁組 6.06 ±1.31A 11.76 ±2.05*B優(yōu)酸乳組 7.10 ±1.51A 7.38 ±1.95C空白組 6.52 ±1.79A 6.46 ±1.83C

3 討論

隨著生活水平的提高，酸性飲料的消耗量也逐年上升，由此引起的酸蝕癥也成為一個(gè)新的口腔問題。兒童青少年作為飲料消費(fèi)的主力軍，其牙齒更容易受到酸的侵襲。有報(bào)道稱，年輕人中軟飲料造成的釉質(zhì)脫礦急劇上升，已經(jīng)代替齲病成為牙齒損壞的第一位因素［5］。

釉質(zhì)由羥磷灰石晶體構(gòu)成，晶體周圍是水－蛋白質(zhì)－脂肪組成的基質(zhì)。當(dāng)飲料接觸釉質(zhì)表面時(shí)，其中的酸通過包圍晶體的多孔性基質(zhì)，接近晶體表面，使晶體發(fā)生溶解，從而造成釉質(zhì)脫礦。其溶解速度受晶體周圍水相中pH值、鈣及磷酸根離子的濃度影響［6］。乳牙羥磷灰石晶體比恒牙小，單位體積內(nèi)晶體表面積的總和大，Ca+2、PO4－3和 OH－1更易被置換，因此較恒牙更易發(fā)生脫礦。市售飲料大部分呈酸性，其pH值處于釉質(zhì)脫礦的臨界pH(5.4～5.5)以下。本研究顯示，可樂組和橙汁組的乳牙釉質(zhì)在掃描電鏡觀察和激光熒光值比較中均發(fā)生了明顯的脫礦，可樂組樣本還可觀察到明顯的色素沉著。而優(yōu)酸乳組樣本脫礦不明顯，掃描電鏡下觀察可見散在的鈣化物沉積。實(shí)驗(yàn)結(jié)果與大多數(shù)研究一致［7－8］。可樂、橙汁的pH值明顯低于臨界值，其所含的碳酸和檸檬酸可對(duì)釉質(zhì)表面造成腐蝕。而優(yōu)酸乳中含有蛋白質(zhì)、乳酸、脂質(zhì)及高濃度的鈣和磷等。其中蛋白質(zhì)多數(shù)以磷酸酪蛋白形式存在，可吸附在釉質(zhì)表面，起屏障作用［9］。而高濃度的鈣和磷也起到抑制脫礦促進(jìn)再礦化的作用［8］，因而在掃描電鏡下可觀察到表面散在的鈣化物沉積。

實(shí)驗(yàn)方法方面，盡管有學(xué)者提出間斷浸泡以模擬生活情況［9］。但通過文獻(xiàn)回顧，近幾年來關(guān)于飲料或溶液酸蝕脫礦的研究都采用了常溫暴露25 h，每 5 h換液的實(shí)驗(yàn)方法，本實(shí)驗(yàn)也是如此［1，3，6－8］。觀察方法上，本實(shí)驗(yàn)不僅采用了掃描電鏡和肉眼的形態(tài)學(xué)觀察，且使用激光熒光診斷儀進(jìn)行定量分析。激光熒光診斷儀是一種運(yùn)用激光激發(fā)熒光反應(yīng)為原理的探測(cè)裝置，具有較高的靈敏度和特異度，可以客觀的反應(yīng)出礦化程度，目前已運(yùn)用于脫礦與再礦化研究之中［4］。探測(cè)部位礦化程度不同，其熒光反應(yīng)也不同，熒光讀數(shù)越高說明脫礦越嚴(yán)重。本研究結(jié)果與同類使用顯微硬度測(cè)量或鈣離子溶出量測(cè)量的研究基本一致，也說明了激光熒光法應(yīng)用于酸蝕脫礦研究的可行性。相比傳統(tǒng)的顯微硬度測(cè)量，激光熒光診斷儀無需在牙面形成壓痕，對(duì)牙面無損傷，可反復(fù)測(cè)量，也將成為今后相關(guān)研究的測(cè)量方法。

市售飲料不僅可造成牙面釉質(zhì)脫礦，其中所含的糖分也可作為細(xì)菌的發(fā)酵底物，在齲病的進(jìn)程中起重要作用。有調(diào)查顯示，4歲兒童飲料的消耗水平與齲齒呈正相關(guān)關(guān)系［10］。許多研究指出，適量添加鈣離子可抵抗飲料的酸蝕脫礦作用［8］，本研究中添加高鈣的優(yōu)酸乳組酸蝕情況明顯好于可樂組和橙汁組，也說明了這一點(diǎn)。這也為飲料制造商提供了一定的理論依據(jù)，然而添加的可行性和食品安全性方面還需要進(jìn)一步深入的研究。

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Dental erosive effects of beverages ondeciduous enamel

ZHU Ling，CAI Chen－xing，WU Ying－nan
(College of Stomatology，Nanjing Medical University，Nanjing 210029，China)

AIM:To evaluate the erosive effect ofdifferent beverages ondeciduous enamel.METHODS:Forth－eightdeciduous teeth was randomlydivided into fourgroups，and eachgroup of teeth were soaked in coladrinks，orange juice，yoghurt anddeionized water respectively.The morphological changes were observed by a scanning electron microscope and quantified by a laser fluorescence system.RESULTS:There was a significantdifference in laser fluorescence value between the coladrinkgroup and the orange juicegroup.The erosive capacity of thedrinks was coladrinks＞orange juice＞yoghurt.CONCLUSION:Beverages can causedental erosion ofdeciduous teeth.It is suggested that beverage consumption by children should be controlled.

dental erosion;demineralization;beverage

R781.1

A

1005－2593(2011)01－0024－03

2010－07－14;

2010－11－22

朱玲(1957－)，女，漢族，江蘇人。主任醫(yī)師，副教授

朱玲，Tel:025－85031837