劉哲鵬,潘 風,施與群

[1.上海理工大學醫(yī)療器械與食品學院藥物制劑(設備與工藝)研究所,上海200093;2.上海美優(yōu)制藥有限公司產品開發(fā)部,上海201423]

頭孢克洛(cefaclor)為廣譜半合成頭孢菌素類抗生素,對G+菌和G—桿菌效果均較好。鹽酸溴己新(bromhexine hydrochloride)為祛痰藥。將頭孢克洛與鹽酸溴己新制成復方頭孢克洛干混懸劑(siccative compound cefaclor suspension,SCCS),可用于咽炎、扁桃體炎、慢性支氣管炎急性發(fā)作、肺炎、鼻竇炎等的治療,效果良好。干混懸劑藥物吸收快,易儲存、攜帶,病人服用方便,尤其適合吞咽困難的病人服用[1,2]。由于頭孢菌素類藥物對濕、熱等外界條件比較敏感,因此對于SCCS的處方工藝開發(fā)難度較大,特別是在研究過程中常會出現(xiàn)藥物降解產物含量超標、藥物含量均勻度不合格等問題,影響了產品質量和臨床應用[3,4]。本研究針對 SCCS處方工藝開展研究,得到合適處方,并考察樣品的穩(wěn)定性,最終得到可以進行臨床研究的處方工藝條件。

1 儀器和試藥

1.1 儀器 D IONEX P680型高效液相色譜儀(美國戴安公司);GL-5型干法制粒機(浙江明天機械有限公司);RCZ-6CZ型藥物溶出度儀(上海黃海藥檢儀器有限公司);低溫光照儀(藥物制劑國家工程研究中心);GSP-9050MBE型隔水式恒溫培養(yǎng)箱(上海博訊實業(yè)有限公司醫(yī)療設備廠);BPS-250C恒溫恒濕箱(上海一恒科技有限公司)。

1.2 藥品和試劑 頭孢克洛原藥(蘇州中聯(lián)化學制藥有限公司,含量99.68%,批號20109194);頭孢克洛對照品(中國藥品生物制品檢定所,含量93.2%,批號130481-200503);鹽酸溴己新原藥(浙江萬邦藥業(yè),含量100.4%,批號H090205);鹽酸溴己新對照品(上海市食品藥品檢驗所標定,含量99.8%,批號040918);羧甲基纖維素鈉(安徽山河藥用輔料有限公司);羧甲基淀粉鈉(永日化學工業(yè)股份有限公司);蔗糖(蘇州市中泰藥用輔料有限公司);甜菊素(天津南大凱泰藥業(yè)有限公司);枸櫞酸(浙江省臺山市新寧制藥有限公司);日落黃(上海染料研究所有限公司);桔子香精(上?？兹赶憔懔嫌邢薰?;硬脂酸鎂(浙江省海鹽六和淀粉化工有限公司);微粉硅膠(上海昌為醫(yī)藥輔料技術有限公司);SCCS [上海理工大學醫(yī)療器械與食品學院藥物制劑(設備與工藝)研究所自制,規(guī)格:每包含頭孢克洛250 mg,鹽酸溴己新8.77 mg]。

2 方法和結果

2.1 含量測定及有關物質檢查 (1)頭孢克洛色譜條件 Welchrom-C18色譜柱(150 mm×4.6 mm, 5μm);流動相:含0.005 mol/L四丁基氫氧化銨溶液[磷酸調節(jié)p H值(3.2±0.1)]-甲醇(68∶32);流速1.2 m l/min;檢測波長249 nm;進樣量20μl。理論塔板數(shù)按頭孢克洛峰計應≥3 000,頭孢克洛峰與相鄰雜質峰的分離度＞1.5。該色譜條件下,各輔料對頭孢克洛檢測無干擾,峰形良好,保留時間約3.0 min。頭孢克洛濃度在215.6～593.7μg/m l范圍內與峰面積線性關系良好,日間和日內RSD值均＜0.5%,相對回收率為98.3%～101.5%。(2)鹽酸溴己新色譜條件 Welchrom-C18色譜柱(150 mm×4.6 mm,5μm);流動相:含0.01 mol/L三乙胺甲醇溶液-甲醇-水(1.5∶95∶5);流速1.2 m l/min;檢測波長249 nm;進樣量20μl。理論塔板數(shù)按鹽酸溴己新峰計應≥1 500,鹽酸溴己新峰與相鄰雜質峰的分離度＞1.5。該色譜條件下,各輔料對鹽酸溴己新檢測無干擾,峰形良好,保留時間約6.5 min。鹽酸溴己新濃度在7.24～21.67μg/m l范圍內與峰面積線性關系良好,日間和日內RSD值均＜0.4%,相對回收率為97.7%～101.6%。

SCCS中鹽酸溴己新的含量均勻度測定方法按鹽酸溴己新的含量測定方法測定,計算 A+1.8 S (《中華人民共和國藥典》2010年版中規(guī)定的含量均勻度計算公式,其中A表示藥物標示量與均值之差的絕對值;S表示標準差),即得。

取SCCS細粉適量(約相當于含頭孢克洛100 mg),置于100 m l量瓶中,加頭孢克洛色譜條件項下流動相適量,強力振搖2 min,超聲5 min,放冷,再用該流動相稀釋至刻度,搖勻,濾過,取續(xù)濾液得到供試品溶液。精密量取1 m l,置50 m l量瓶中,加該流動相稀釋至刻度,搖勻,得到對照溶液;準確量取上述溶液各20μl,按頭孢克洛色譜條件進樣測定,記錄色譜圖至主成分峰保留時間的2.5倍;供試品溶液的色譜圖中如出現(xiàn)雜質峰(扣除系統(tǒng)溶劑峰、輔料峰),量取各雜質峰峰面積之和,將之與對照品溶液峰面積比較,得到頭孢克洛有關物質含量[3]。另取 SCCS細粉適量(約相當于含鹽酸溴己新3.5 mg),置于100 m l量瓶中,加鹽酸溴己新色譜條件項下流動相適量,其他操作同上,得到鹽酸溴己新有關物質含量。

2.2 溶出度測定[5]

2.2.1 頭孢克洛溶出度測定 取SCCS樣品6份,按《中華人民共和國藥典》2010年版附錄ⅩC第一法檢測其溶出度,800 m l水為介質,75 r/min轉速。30 min后,取溶液10 m l,0.45μm微孔濾膜濾過,準確量取上述溶液20μl,按頭孢克洛色譜條件進樣測定,記錄色譜圖。另取頭孢克洛對照品31.3 mg,置100 m l量瓶中,加水溶解并定容,制成含藥物313μg/m l溶液,同法測定。按外標法以峰面積計算,即得每包中頭孢克洛的溶出量。

2.2.2 鹽酸溴己新溶出度測定 取SCCS樣品6份,500 m l水為介質,余同2.2.1項相關操作,按鹽酸溴己新色譜條件進樣測定,記錄色譜圖。另取鹽酸溴己新對照品17.5 mg,置100 m l量瓶中,加甲醇10 m l溶解并用水定容至刻度。移取1 m l于10 m l量瓶中,用水定容至刻度,得到含藥物17.5μg/m l的溶液,同法測定。按外標法以峰面積計算,即得每包中鹽酸溴己新的溶出量。

2.3 休止角測定 底盤為直徑5.5 cm的培養(yǎng)皿,將兩只玻璃漏斗上下交錯重疊,固定在鐵架臺上,下漏斗出口與底盤距離為3.0～5.0 cm。取顆粒約45 g,從上部漏斗慢慢加入,使顆粒經過兩只漏斗的緩沖逐漸堆積在底盤上,形成錐體,直至得到最高的錐體為止。測定錐體的高(H),按下式計算休止角: α=arctg(H/R)。其中,α為休止角,R為底盤半徑。

2.4 沉降體積比 取供試品約7 g置具塞量筒中,加水10 m l,密塞,用力振搖1 min,觀察分散情況,同時記下混懸劑開始高度 H0。靜置3 h,記下混懸劑最終高度 H,計算沉降體積比=H/H0。

2.5 口感考察 用含量均勻度實驗后剩下的樣品考察其口感。

2.6 SCCS影響因素考察及處方篩選

2.6.1 頭孢克洛、鹽酸溴己新與輔料間的影響因素實驗 取頭孢克洛、鹽酸溴己新原藥,分別與羧甲基纖維素鈉、羧甲基淀粉鈉、蔗糖、甜菊素、枸櫞酸、微粉硅膠、硬脂酸鎂等輔料兩兩混勻后,粉末直接壓制成片狀物,將片狀物分別放置在40℃隔水式恒溫培養(yǎng)箱、低溫光照儀和內置有飽和氯化鈉溶液的干燥器內進行高溫(40℃)、強光照射(光照強度為4 500 lx)和高濕[25℃,濕度(75±5)%)]等影響因素實驗,于0、5、10 d取樣,按有關物質檢查方法,主成分自身對照法考察其有關物質變化,結果見表1。另取頭孢克洛、鹽酸溴己新原藥,分別以藥用乙醇作為濕潤劑制軟材,過20目篩制粒,制得的顆粒在60℃干燥,比較處理前后藥物有關物質變化。結果制粒前、后頭孢克洛有關物質含量分別為0.68%和1.43%,鹽酸溴己新分別為0.57%和2.41%。可見頭孢克洛、鹽酸溴己新經過濕法制粒后有關物質變化明顯,提示藥物對濕熱等條件敏感。藥物與各輔料混勻后,粉末直接壓片,影響因素考察結果顯示,藥物與羧甲基淀粉鈉經影響因素考察后有關物質上升較明顯,因此在處方篩選中不使用羧甲基淀粉鈉。另外,羧甲基纖維素鈉、蔗糖、枸櫞酸在高濕條件下,有關物質也有較大變化,提示干混懸劑應密封、干燥保存。

2.6.2 單因素篩選SCCS的處方 將頭孢克洛原藥、鹽酸溴己新原藥和輔料分別過100目篩后,按表2處方混合均勻,其中鹽酸溴己新原藥與其他原輔料以等量遞加的方式混合均勻。GL-5型干法制粒機制粒(壓輪壓力80 kN,壓縮空氣0.5 M Pa,流量1 L/m in),顆粒經20目篩網整粒,即得,制備環(huán)境相對濕度控制在50%以下?？疾旄魈幏剿妙w粒的外觀、口感、顆粒休止角、沉降體積比和溶出度,結果見表3。處方1～3顆?？诟猩杂锌辔?且處方1沉降體積比稍低,處方3加水分散性稍差;處方6顆粒口感酸味稍大,處方4和5口感較好,并且顆粒休止角、加水分散性、沉降體積比、藥物溶出度等指標均較好。將處方4和5所得樣品進行影響因素考察,結果見表4。影響因素考察結果顯示,處方4和處方5制得樣品在相對濕度較高情況下(75%)有關物質上升較明顯,提示干混懸劑應在密封、干燥的條件下保存。兩者影響因素考察結果(藥物溶出、有關物質等)相近,經過綜合考慮,處方4更好一些。

2.7 SCCS試制及影響因素和加速考察結果 按處方4和2.6.2項下顆粒制備方法制備SCCS 3批,樣品用雙鋁復合袋包裝后,進行加速實驗考察[(30±2)℃,相對濕度75%]。結果顯示,試制3批SCCS經加速6個月考察后,其性狀、藥物含量、藥物降解有關物質等質量指標未見顯著變化。

表1 頭孢克洛、鹽酸溴己新原藥與各輔料影響因素實驗中有關物質的變化Table 1 The changes of related substances in influence factor tests between cefaclor/bromhexine hydrochloride and excipients (%)

表2 復方頭孢克洛干混懸劑處方篩選Table 2 Screen ing formulae of siccative compound cefaclor suspension (m/g)

3 討 論

干混懸劑的開發(fā)應特別關注口感及藥物降解有關物質的變化。在矯味劑的選擇中,合適的甜度對口感影響較大,除了有適量的甜味劑外,填充輔料也多選用口感好的蔗糖、甘露醇等,另外在處方中有一定量的酸味劑存在,特別有助于調節(jié)口感。

在干混懸劑的處方中,除了填充劑外,另有較多量的矯味劑(包括酸性矯味劑)、助懸劑、色素等,這對藥物在制劑制備過程及以后的儲存過程中的穩(wěn)定性帶來挑戰(zhàn)。特別是頭孢克洛和鹽酸溴己新對光、熱等外界條件較敏感,易產生降解產物。作者在處方篩選前考察原料藥與輔料在濕、熱、光等影響因素條件下的穩(wěn)定性,從中選擇合適的輔料,采用干法制粒技術,并嚴格控制存儲條件,制得口感良好、質量穩(wěn)定的SCCS,值得進一步開發(fā)。

表3 復方頭孢克洛干混懸劑處方考察Table 3 Formulae exam ination of siccative compound cefaclor suspension

表4 處方4和處方5的影響因素考察結果Table 4 Results of influence factor tests of formulae 4 and 5

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