齊忠志 付勤

扶正益津湯對放療所致免疫功能抑制小鼠細胞毒功能的影響

齊忠志 付勤

目的觀察扶正益津湯對放療所致免疫功能抑制小鼠細胞毒功能的影響。方法以小鼠腹腔巨噬細胞介導的腫瘤細胞溶解作用(MTC)和抗體依賴細胞介導的細胞毒作用(ADCC)為指標，觀察中藥扶正益津湯對小鼠巨噬細胞細胞毒活性的影響。結(jié)果扶正益津湯對受X射線照射所致免疫功能抑制小鼠細胞毒活性有顯著增強作用。結(jié)論扶正益津湯可用于放療輔助用藥。

細胞毒活性;免疫調(diào)節(jié);巨噬細胞

本文將以小鼠腹腔巨噬細胞介導的腫瘤細胞溶解作用(MTC)和抗體依賴細胞介導的細胞毒作用(ADCC)為指標，觀察中藥扶正益津湯對放療所致免疫功能抑制小鼠細胞毒活性的影響，探討其免疫調(diào)節(jié)機制和防治腫瘤作用的機理?，F(xiàn)將結(jié)果報告如下。

1 材料與方法

1.1 YAC-1細胞株由吉林大學基礎醫(yī)學院衛(wèi)生部免疫學重點實驗室惠贈;RPMI 1640培養(yǎng)基(日本)含10%滅活FCS、HEPES 2 mmol/L、L-glutamin 2 mmol/L、penicillin 100u/ml、streptomycin 100 μg/ml;125I-UdR、Na51Cr04均購自北京原子能研究所，放射性濃度分別為272～336 μCi/ml和11.2～14.7 μCi/ml;兔抗雞紅細胞血清為吉林省腫瘤防治研究所自制，凝集效價為1∶1120;ADCC效價為1∶2400。

1.2 實驗動物健康昆明系小鼠，6～12周齡，雌雄兼用。由吉林大學實驗動物部提供。

1.3 受試藥扶正益津湯主要由黃芪、女真子等組成，按吉林省腫瘤防治研究所常規(guī)方法煎制，水浴濃縮，每100 ml含生藥量24 g，置4℃冰箱備用。

1.4 實驗分組將動物按體重隨機分為正常對照組(NS)，放射治療組(Rd)，受試藥物組(FY)，放射治療加受試藥物組(Rd+FY)。NS組每天每只小鼠給生理鹽水0.4 ml，連續(xù)灌胃7 d;Rd組于實驗開始當日給予X射線全身照射，采用SiemeneX射線治療機，將小鼠放入30 cm×30 cm×20 cm紙盒內(nèi)，小鼠在盒內(nèi)呈分散狀態(tài)，源距小鼠100 cm，射野為30 cm ×30 cm，劑量率為2 gy/min，總劑量率為6 gy，一次性全身照射;FY組每天每只小鼠灌胃給藥扶正益津湯0.4 ml(0.2 ml/ 10 g體重)，連續(xù)給藥7 d;Rd+FY組，扶正益津湯給藥及照射方法同上。

1.5 腹腔巨噬細胞制備見文獻［1］。

1.6 YAC-1細胞標記見文獻［2］。

1.7 雞紅細胞(CRBC)標記取自來亨雞翅靜脈血，生理鹽水洗2次，PBS懸浮，按文獻［3］即刻標記。效靶比值為20∶1。

1.8 小鼠腹腔巨噬細胞介導的腫瘤細胞溶解作用(MTC活性)測定和抗體依賴細胞介導的細胞毒作用(ADCC活性)測定:測定方法見文獻［1］并稍加改進。把標記的51Cr·CRBC，與抗血清在室溫下共育30 min，加至貼有巨噬細胞的孔中。自然釋放組和最大釋放組直接加51Cr·CRBC，不加抗血清和巨噬細胞。效靶比為1∶1。數(shù)據(jù)處理采用DAS軟件進行組間比較。

2 結(jié)果

2.1 扶正益津湯對小鼠腹腔巨噬細胞介導的MTC活性的影響見表1。

表1 扶正益津湯對小鼠腹腔巨噬細胞介導的MTC活性的影響

由表1可見，F(xiàn)Y組MTC活性略高于正常對照組，組間差異無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)。而Rd組MTC活性明顯低于正常對照組;當服用扶正益津湯后，MTC活性明顯增高，與Rd組比較差異有統(tǒng)計學意義P＜0.05。結(jié)果表明，扶正益津湯能拮抗放射治療引起小鼠腹腔巨噬細胞介導MTC活性的抑制作用，但對免疫功能正常小鼠MTC活性作用較小。

2.2 扶正益津湯對小鼠腹腔巨噬細胞介導的ADCC活性影響見表2。

由表2可見，扶正益津湯給藥組ADCC活性最高，但與正常對照組比較，無顯著差異;放射治療組ADCC活性最低，與正常對照組比較有顯著性差異;加服扶正益津湯后，與放射治療組比較，ADCC活性升高顯著，差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。

3 討論

多數(shù)腫瘤患者在接受化療、放療過程中，往往會出現(xiàn)WBC數(shù)降低，免疫功能下降，惡心、嘔吐等副反應，嚴重者可影響放化療的進行，給臨床治療工作帶來困難。因此，開展扶正中藥的實驗研究，重視中醫(yī)中藥在腫瘤防治中的作用，對提高腫瘤臨床治療具有十分重要的意義。

扶正益津湯對小鼠腹腔巨噬細胞介導的ADCC和MTC細胞毒活性有提高作用，可使因放射治療作用引起免疫功能抑制小鼠細胞毒活性顯著增強。由此提示我們，扶正補益中藥增強免疫能力作用的機理可能來自于其調(diào)整腫瘤患者的免疫機能以達到抗癌之目的。

扶正益津湯對正常小鼠腹腔巨噬細胞細胞毒功能的影響不甚明顯，雖有增強趨勢，但無統(tǒng)計學意義。其機理可能與扶正中藥“虛則補之，損則益之”作用有關。上述結(jié)果說明，扶正益津湯具有免疫調(diào)節(jié)作用，即對放療引起的免疫功能抑制小鼠細胞毒活性有增強作用。提示，扶正中藥可能是通過增強機體免疫功能來達到抗癌祛邪作用的。

［1］龔守良.實驗基礎醫(yī)學實驗技術.長春:吉林科學技術出版社，1991:196-199．

［2］于永利.人參花總皂甙在體外對小鼠NK細胞活性的影響.中國免疫學雜志，1985，1(2):28．

［3］翁惠如.K細胞的檢測.臨床免疫學檢驗(上冊)．上海:上?？茖W技術出版社，1983，107．

130012吉林省長春腫瘤醫(yī)院放療科(齊忠志);吉林省長春腫瘤防治研究所(付勤)