付 崗, 黃思良, 史國(guó)英, 胡春錦,孫步峰, 陳志玲, 項(xiàng)扶香

(1.廣西大學(xué)農(nóng)學(xué)院,南寧 530005; 2.廣西農(nóng)業(yè)科學(xué)院植物保護(hù)研究所,南寧 530007;3.南陽(yáng)師范學(xué)院生命科學(xué)與技術(shù)學(xué)院,南陽(yáng) 473061; 4.西鄉(xiāng)塘區(qū)科學(xué)技術(shù)局,南寧 530012;5.長(zhǎng)江大學(xué)農(nóng)學(xué)院,荊州 434025)

香蕉葉斑病是香蕉生長(zhǎng)期發(fā)生最為普遍、具有毀滅性的病害之一。該病主要引起蕉葉干枯,減少葉片的光合作用面積,導(dǎo)致植株早衰,影響果實(shí)發(fā)育。世界上每年因香蕉葉斑病導(dǎo)致的香蕉減產(chǎn)超過(guò)38%,防治該病投入的成本占到生產(chǎn)成本的27%[1-2]。香蕉葉斑病是一種多病原多循環(huán)病害,目前已知引起葉斑病的病原至少有20余種[2-5]。對(duì)該病的防治目前報(bào)道的措施主要集中在化學(xué)防治方面,隨著病原菌的毒性變異和抗藥性增強(qiáng),農(nóng)藥的施用劑量也相應(yīng)提高,不僅增加了生產(chǎn)成本,造成嚴(yán)重的環(huán)境污染,同時(shí)也縮短了農(nóng)藥品種的淘汰時(shí)限[6-8]。

本試驗(yàn)通過(guò)對(duì)防治香蕉葉斑病的生物農(nóng)藥和化學(xué)農(nóng)藥的單劑和復(fù)配藥劑的室內(nèi)篩選和田間防效測(cè)定,以期找出防治該病的高效低毒農(nóng)藥品種,為生產(chǎn)上提供更多可以選擇使用的藥劑,延緩單劑化學(xué)農(nóng)藥的使用壽命。

1 材料與方法

1.1 材料

室內(nèi)藥劑篩選試驗(yàn)以香蕉葉斑病主要病原香蕉褐緣灰斑病菌(Cercospora musae Zimm.)為供試菌。供試病原菌分離自廣西南寧市田間感病香蕉。

供試藥劑有生物農(nóng)藥和化學(xué)農(nóng)藥兩大類(lèi)。生物農(nóng)藥:1%多抗霉素水劑(北京綠色農(nóng)華植保科技有限公司),1%武夷菌素水劑(中美和資濰坊萬(wàn)勝生物農(nóng)藥有限公司),2%寧南霉素水劑(四川金珠生態(tài)農(nóng)業(yè)科技有限公司),4%枯草芽胞桿菌水劑(陜西綠盾生態(tài)農(nóng)業(yè)科技有限公司),1%中生菌素水劑(西安西諾農(nóng)化公司),2%春雷霉素水劑(日本北興化學(xué)工業(yè)株式會(huì)社),90%新植霉素可溶性粉劑(青島華爾農(nóng)業(yè)科技有限公司),90%青霉素可溶性粉劑(青島華爾農(nóng)業(yè)科技有限公司),20%井岡霉素可溶性粉劑(浙江錢(qián)江生物化學(xué)股份有限公司)?；瘜W(xué)農(nóng)藥:50%多菌靈可濕性粉劑(上海升聯(lián)化工有限公司),75%百菌清可濕性粉劑(四川省廣漢市利邦生化廠),80%代森錳鋅可濕性粉劑(南通德斯宜農(nóng)化工有限公司),70%甲基硫菌靈可濕性粉劑(日本曹達(dá)株式會(huì)社),15%三唑酮可濕性粉劑(四川迪美特生物科技有限公司),12.5%烯唑醇可濕性粉劑(鹽城市龍躍農(nóng)藥有限公司),50%福美雙可濕性粉劑(河北贊峰生物工程有限公司),25.5%異菌脲可濕性粉劑(拜耳作物科學(xué)有限公司),12.5%戊唑醇可濕性粉劑(石家莊市三農(nóng)化工有限公司),5%己唑醇懸浮劑(陜西上格之路生物科學(xué)有限公司),40%氟硅唑乳油(江蘇建農(nóng)農(nóng)藥化工公司),1.5%噻霉酮水劑(陜西西大華特科技實(shí)業(yè)有限公司),20%五氯硝基苯可濕性粉劑(運(yùn)城綠康實(shí)業(yè)有限公司),50%敵磺鈉可溶性粉劑(上海金橋化工有限責(zé)任公司),50%噻菌靈懸浮劑(瑞士先正達(dá)作物保護(hù)有限公司),12.5%腈菌唑乳油(沈陽(yáng)化工研究院試驗(yàn)場(chǎng)),45%咪鮮胺水乳劑(拜耳作物科學(xué)有限公司)。

1.2 方法

1.2.1 生物農(nóng)藥單劑的抑菌力測(cè)定

將供試農(nóng)藥加入到融化的定量PDA培養(yǎng)基中,制成具有相應(yīng)有效濃度的含藥平板(藥劑濃度取生產(chǎn)廠家推薦使用濃度的中間值)。取直徑6 mm的病原菌菌碟接種在平板中央。以病原菌接種在不加農(nóng)藥的PDA平板上為對(duì)照,各處理均置28℃恒溫培養(yǎng)。每處理3次重復(fù)。待對(duì)照菌落長(zhǎng)滿培養(yǎng)皿時(shí),測(cè)算抑菌率。抑菌率=[(對(duì)照菌落擴(kuò)展半徑-處理菌落擴(kuò)展半徑)/對(duì)照菌落擴(kuò)展半徑]×100%。

1.2.2 藥劑組合的聯(lián)合作用測(cè)試

采用濾紙條交叉法測(cè)試不同藥劑組合的聯(lián)合作用[9]。將病原菌孢子懸浮液加入到融化的PDA培養(yǎng)基中,制成每mL約含1×103個(gè)孢子的含菌平板。供試藥劑用無(wú)菌水配制成相應(yīng)濃度的溶液(藥劑濃度取生產(chǎn)廠家推薦使用濃度的中間值)。滅菌的濾紙條(8 mm×70 mm)放入藥液中浸泡30 s。取浸有不同藥液的兩張濾紙條,垂直交叉放入含菌平板,每處理3次重復(fù)。28℃培養(yǎng)3 d后,記錄結(jié)果。以含藥濾紙條形成的抑菌帶形狀判斷不同藥劑組合的聯(lián)合作用性質(zhì)。

1.2.3 具有相加作用化學(xué)藥劑組合的抑菌效果測(cè)定

為了找到抑菌力最強(qiáng)的藥劑組合,對(duì)具有相加作用的化學(xué)藥劑,進(jìn)行定量測(cè)定。測(cè)試采用濾紙條交叉法(同1.2.2),藥劑濃度取生產(chǎn)廠家推薦使用濃度中間值的0.1倍。各處理在28℃培養(yǎng)3 d后,測(cè)量抑菌帶寬度,每處理3次重復(fù)。抑菌帶寬度為培養(yǎng)皿內(nèi)兩張濾紙條的交叉點(diǎn)至外圍菌落生長(zhǎng)弧形的拐點(diǎn)之間的距離。

1.2.4 復(fù)配藥劑對(duì)香蕉葉斑病的田間防治試驗(yàn)

分別于2007年6月16日和2008年6月18日在廣西南寧市金陵鎮(zhèn)開(kāi)始進(jìn)行田間試驗(yàn)。試驗(yàn)地為紅壤土,肥力中等,排灌條件便利,管理規(guī)范。香蕉植株高約1 m,長(zhǎng)勢(shì)均勻一致。試驗(yàn)采取葉面噴霧法施藥,共設(shè)4個(gè)藥劑組合處理:A為腈菌唑+咪鮮胺,B為咪鮮胺+氟硅唑,C為戊唑醇+腈菌唑,D為中生菌素+枯草芽胞桿菌。各藥劑使用的有效終濃度分別為:12.5%腈菌唑乳油125.0 mg/kg;45%咪鮮胺水乳劑333.3 mg/kg;40%氟硅唑乳油44.4 mg/kg;戊唑醇69.4 mg/kg;1%中生菌素水劑1 110 mg/kg;4%枯草芽胞桿菌水劑,910 mg/kg。對(duì)照區(qū)噴清水,每處理4次重復(fù)。每5株香蕉為一個(gè)試驗(yàn)小區(qū),田間小區(qū)隨機(jī)分布。每14 d施藥1次,共施3次。每次施藥前和第3次施藥后10 d對(duì)由C.musae等各種病原菌引起的香蕉葉斑病進(jìn)行發(fā)病情況調(diào)查。病情以病斑總面積占整個(gè)葉片面積的百分比分級(jí)。0級(jí):無(wú)病;1級(jí):5%以下;3級(jí):5%～15%;5級(jí):16%～25%;7級(jí):26%～50%;9級(jí):50%以上。病情指數(shù)=[∑(各級(jí)病葉數(shù)×相對(duì)級(jí)數(shù)值)/(調(diào)查總?cè)~數(shù)×9)]×100。防治效果=[1-(初次調(diào)查對(duì)照區(qū)病指×本次調(diào)查處理區(qū)病指)/(初次調(diào)查處理區(qū)病指×本次調(diào)查對(duì)照區(qū)病指)]×100%。

2 結(jié)果與分析

2.1 生物農(nóng)藥單劑的抑菌效果

以香蕉褐緣灰斑病菌為指示菌進(jìn)行的抑菌率測(cè)定結(jié)果表明,在具生產(chǎn)實(shí)用意義的供試藥劑濃度下,9種生物農(nóng)藥對(duì)病原菌的抑菌效果存在顯著差異。抑菌力最強(qiáng)的3種生物農(nóng)藥為4%枯草芽胞桿菌水劑、1%中生菌素水劑、2%春雷霉素水劑,抑菌率分別達(dá)到72.8%、70.5%和67.1%。90%新植霉素可溶性粉劑的抑菌率最低,僅為3.3%(表1)。

表1 9種生物農(nóng)藥對(duì)香蕉褐緣灰斑病菌的抑菌效果1)

2.2 藥劑組合的聯(lián)合作用

如表2所示:在具生產(chǎn)實(shí)用意義的供試藥劑濃度下,9種生物農(nóng)藥兩兩組合混配后,共有14種農(nóng)藥組合表現(xiàn)出獨(dú)立作用,僅有4%枯草芽胞桿菌水劑和1%中生菌素水劑的農(nóng)藥組合表現(xiàn)出相加作用,其余組合未表現(xiàn)抑菌作用。

表2 9種生物農(nóng)藥組合的聯(lián)合作用1)

對(duì)17種化學(xué)農(nóng)藥兩兩相配形成的136種藥劑組合的抑菌作用測(cè)試結(jié)果表明,38種藥劑組合表現(xiàn)為相加作用,2種藥劑組合(50%福美雙可濕性粉劑+12.5%烯唑醇可濕性粉劑,50%福美雙可濕性粉劑+25.5%異菌脲可濕性粉劑)表現(xiàn)拮抗作用,4種藥劑組合未表現(xiàn)抑菌作用,其余組合均表現(xiàn)為獨(dú)立作用(表3)。

2.3 具相加作用的化學(xué)藥劑組合的抑菌效果

為了進(jìn)一步篩選防治香蕉葉斑病的高效藥劑組合,對(duì)具有相加作用的38種化學(xué)藥劑組合的抑菌效果進(jìn)行了定量測(cè)定,結(jié)果見(jiàn)表4。不同藥劑組合對(duì)香蕉褐緣灰斑病菌的抑菌效果存在顯著差異,抑菌能力最強(qiáng)的3種化學(xué)藥劑組合為腈菌唑+咪鮮胺、氟硅唑+咪鮮胺和戊唑醇+腈菌唑,抑菌帶寬度分別為 30.5、28.3、28.1 mm 。

2.4 復(fù)配藥劑對(duì)香蕉葉斑病的田間防治效果

2年的田間防治試驗(yàn)結(jié)果表明,隨施藥次數(shù)的增加各復(fù)配藥劑對(duì)香蕉葉斑病的防治效果均呈增長(zhǎng)趨勢(shì)。3種復(fù)配化學(xué)藥劑施用3次后,2年的防治效果均達(dá)70%以上,顯著高于復(fù)配生物藥劑(中生菌素+枯草芽胞桿菌,2007年43.9%、2008年48.3%)。復(fù)配化學(xué)藥劑在2007年和2008年試驗(yàn)中對(duì)香蕉葉斑病的最終防效分別為:腈菌唑+咪鮮胺 75.2%、75.7%;咪鮮胺+氟硅唑74.6%、72.8%;戊唑醇+腈菌唑71.6%、73.4%。3種復(fù)配化學(xué)藥劑之間對(duì)香蕉葉斑病的防效無(wú)顯著差異。

表3 17種化學(xué)農(nóng)藥組合的聯(lián)合作用1)

表4 化學(xué)藥劑組合對(duì)香蕉褐緣灰斑病菌的抑菌效果1)

表5 復(fù)配藥劑對(duì)香蕉葉斑病的田間防治效果1)

3 結(jié)論與討論

通過(guò)對(duì)防治香蕉葉斑病的藥劑室內(nèi)篩選和田間試驗(yàn),結(jié)果表明:在具生產(chǎn)實(shí)用意義的供試濃度下,9種生物農(nóng)藥單劑中,4%枯草芽胞桿菌水劑和1%中生菌素水劑對(duì)香蕉褐緣灰斑病菌的室內(nèi)抑菌率最強(qiáng),分別為 72.8%、70.5%;同時(shí),這 2種生物農(nóng)藥在抑菌效果的聯(lián)合作用測(cè)試中表現(xiàn)相加作用,其余供試的生物農(nóng)藥組合均未表現(xiàn)相加作用。在17種化學(xué)農(nóng)藥兩兩相配形成的136種藥劑組合中,有38種藥劑組合表現(xiàn)為相加作用。進(jìn)一步對(duì)具有相加作用的化學(xué)藥劑組合抑菌效果的定量測(cè)定結(jié)果表明,抑菌能力最強(qiáng)的3種化學(xué)藥劑組合為腈菌唑+咪鮮胺、氟硅唑+咪鮮胺和戊唑醇+腈菌唑,抑菌帶寬度分別為30.5、28.3 mm和28.1 mm。這3種復(fù)配化學(xué)藥劑在田間施用3次后對(duì)香蕉葉斑病的防治效果在2年試驗(yàn)中均達(dá)70%以上,值得在生產(chǎn)中推廣使用。

試驗(yàn)中發(fā)現(xiàn),現(xiàn)有的能用來(lái)防治香蕉葉斑病的生物農(nóng)藥種類(lèi)較少,防治效果偏低。篩選到的1種生物農(nóng)藥組合(1%中生菌素水劑+4%枯草芽胞桿菌水劑)對(duì)香蕉葉斑病的防效2年均低于50%,直接應(yīng)用于生產(chǎn),尚存在困難。今后應(yīng)加大香蕉葉斑病生物防治技術(shù)的研究力度,不斷開(kāi)發(fā)新的生物農(nóng)藥,為香蕉產(chǎn)品的無(wú)害化生產(chǎn)提供更多可以選擇的安全高效生物農(nóng)藥品種。

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