黃雪群， 李小梅， 李續(xù)娥

(1.華南師范大學(xué)廣東省植物發(fā)育生物工程重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，廣東廣州 510631；2.清遠(yuǎn)職業(yè)技術(shù)學(xué)院，廣東清遠(yuǎn)511510； 3.廣州大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院，廣東廣州 510511)

歸胃經(jīng)寒性中藥對(duì)胃熱癥大鼠體征的影響

黃雪群1,2， 李小梅1,3， 李續(xù)娥1*

(1.華南師范大學(xué)廣東省植物發(fā)育生物工程重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，廣東廣州 510631；2.清遠(yuǎn)職業(yè)技術(shù)學(xué)院，廣東清遠(yuǎn)511510； 3.廣州大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院，廣東廣州 510511)

用干姜水煎劑連續(xù)給大鼠灌胃15 d，復(fù)制胃熱癥大鼠模型，再分別以黃連、蒲公英、枳實(shí)水煎劑灌胃治療10d.比較大鼠的飲食量、大小便、舌色舌苔變化，用放射免疫分析法測(cè)定大鼠血清中白細(xì)胞介素-4(IL-4)、白細(xì)胞介素-8(IL-8)的濃度變化.結(jié)果顯示，造模后大鼠呈現(xiàn)舌紅苔黃(Plt;0.05)、飲食量增加(10%以上)、大小便量減少(10%以上)、且大便多數(shù)干結(jié)、小便顏色加深(Plt;0 .01)、IL-8顯著升高(Plt;0.01).黃連、蒲公英、枳實(shí)可改善上述胃熱癥的指標(biāo)，且寒性程度愈高、治療效果愈好.經(jīng)分析得知，黃連、蒲公英、枳實(shí)通過降低胃熱癥大鼠血清中的IL-8，改善胃熱癥大鼠的體征.

黃連； 蒲公英； 枳實(shí)； 胃熱癥； 體征

中醫(yī)胃熱癥是指火熱熾盛、雍滯于胃所致的癥候，證見胃脘灼熱或灼痛、口渴喜冷飲、牙齦腫痛、便結(jié)尿黃、舌紅苔黃等癥[1].按照中藥藥性的寒熱與治則關(guān)系“寒者熱之，熱者寒之”，本試驗(yàn)擬研究歸胃經(jīng)寒性中藥黃連、蒲公英、枳實(shí)對(duì)胃熱證大鼠體征的影響，并通過檢測(cè)大鼠血清中IL-4、IL-8的變化來探討3味中藥影響胃熱癥大鼠體征的機(jī)理.

1 材料與方法

1.1動(dòng)物及分組

SD大鼠120只，SPF級(jí)，雄性，體質(zhì)量220～280 g，2～3月齡，由廣州中醫(yī)藥大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供(合格證號(hào)：粵監(jiān)證字2005A031號(hào))，隨機(jī)分成8組(每組15只)：空白對(duì)照組，模型對(duì)照組，黃連大、小劑量組，蒲公英大、小劑量組，枳實(shí)大、小劑量組.

1.2中藥制劑及劑量

干姜(ZingiberofficinaleRosc.)、黃連(CoptischinensisFranch.)、蒲公英(TaraxacummongolicumHand. Mazz.)、枳實(shí)(CitrusaurantiumL.)均購(gòu)自廣州壽生堂大藥房，由廣東藥學(xué)院藥用植物教研室鑒定.按傳統(tǒng)中藥水煎法分別將各味藥用蒸餾水浸泡煮沸后，改文火繼續(xù)煮30 min成煎劑.取煎劑上清液經(jīng)過濾除菌后分別濃縮成含干姜、黃連、蒲公英、枳實(shí)1.0、0.1、0.5、0.5 kg/L的質(zhì)量濃度，置于4 ℃冰箱保存?zhèn)溆?黃連、蒲公英、枳實(shí)大劑量和小劑量分別按人用劑量[2]的10倍和5倍計(jì)，則有：黃連(0.6、0.3 g/kg)、蒲公英(2.0、1.0 g/kg)、枳實(shí)(1.0、0.5 g/kg).

1.3胃熱證模型的建立及治療

將大鼠置于溫度為18～27 ℃，濕度為45%～75%，氣流10～25 cm/s，噪音低于50 dB(A)的安靜環(huán)境中.除空白對(duì)照組，其余各組按5 g/kg 的劑量灌胃1.0 kg/L的干姜水煎劑(空白對(duì)照組則灌胃等量生理鹽水)連續(xù)15 d造模[3].大鼠造模后,黃連、蒲公英、枳實(shí)的大劑量和小劑量組以設(shè)定的劑量連續(xù)灌胃治療10 d(空白對(duì)照組和模型對(duì)照組灌胃等量生理鹽水).

1.4體征的測(cè)定

食量、飲水量及大小便均以24 h為時(shí)間單位，分別于造模前、造模后、治療后連續(xù)觀測(cè)3 d，然后分別取其平均值為各指標(biāo)測(cè)定值.進(jìn)行舌象觀測(cè)時(shí)，用灌胃針的針管拉開大鼠上下門齒，使其自然舒展地將舌伸出口外，充分暴露，在自然光下肉眼直視舌象，舌色分為淡白舌、淡紅舌、紅舌、紅絳舌、青紫舌，分別記為0、1、2、3、4級(jí)；舌苔特征分為薄白苔、白膩苔、薄黃苔、黃膩苔，分別記為1、2、3、4級(jí)[4].

1.5IL-4、IL-8的測(cè)定

治療結(jié)束后自大鼠腹主靜脈取血樣，分離出血清，用放射免疫分析法測(cè)定大鼠血清中的IL-4、IL-8的變化.所用儀器為上海原子核研究所日環(huán)儀器一廠SN-695B型放免γ測(cè)量?jī)x，IL-4、IL-8試劑盒(批號(hào)050826)由解放軍總醫(yī)院放免所提供.測(cè)定過程在廣州中醫(yī)藥大學(xué)核醫(yī)學(xué)教研室進(jìn)行.

1.6數(shù)據(jù)分析的方法

采用t檢驗(yàn)分析飲食量、大小便、IL-4、IL-8等指標(biāo)數(shù)據(jù)；采用卡方(2)檢驗(yàn)分析舌色舌苔數(shù)據(jù).

2 結(jié)果

表1為歸胃經(jīng)寒性中藥對(duì)胃熱癥大鼠飲食量、大小便的影響，表2為歸胃經(jīng)寒性中藥對(duì)胃熱癥大鼠舌色、舌苔及IL-4、IL-8的影響.可見造模后，大鼠食量及飲水量均增加10%以上，而大小便量則減少10%以上，且大便多呈干結(jié)狀、小便顏色加深(Plt;0.01)，呈現(xiàn)舌紅苔黃(Plt;0.05)，IL-4降低不明顯、IL-8顯著升高(Plt;0.01)、IL-4/IL-8顯著降低(Plt;0.01).使用黃連、蒲公英、枳實(shí)治療后，胃熱癥大鼠的舌色、舌苔得到明顯改善(Plt;0.05)，日飲水量顯著降低(Plt;0.05 或Plt;0.01)，尿液顏色明顯變淡(Plt;0.01)，大便粒數(shù)顯著增加(Plt;0.05 或Plt;0.01)，大便干結(jié)得到改善，日尿量及日食量有些改善但不明顯.黃連和蒲公英能使胃熱證大鼠血清中IL-8明顯降低(Plt;0.01)、IL-4/IL-8顯著升高(Plt;0.01)，黃連尚能使胃熱癥大鼠血清中IL-4明顯增加(Plt;0.05 或Plt;0.01).

表1 歸胃經(jīng)寒性中藥對(duì)胃熱癥大鼠飲食量、大小便的影響

注：與空白對(duì)照組比較，1)Plt;0.05、2)Plt;0.01；與模型對(duì)照組比較，3)Plt;0.05、4)Plt;0.01(表2同).

表2 歸胃經(jīng)寒性中藥對(duì)胃熱癥大鼠舌色、舌苔及IL-4、IL-8的影響

比較表1、表2中黃連、蒲公英、枳實(shí)對(duì)胃熱癥大鼠的治療效果，可以看到：除日尿量及尿液吸收值外，其它指標(biāo)的治療效果從大至小依次為黃連、蒲公英、枳實(shí).

3 討論

3.1胃熱證大鼠模型的建立

從本研究所復(fù)制的胃熱癥大鼠體征看，其達(dá)到了文獻(xiàn)[3]中胃熱癥體征的評(píng)定指標(biāo)：日飲水的體積分?jǐn)?shù)增加10%以上，舌紅；食量的質(zhì)量分?jǐn)?shù)增加10%以上；糞便的質(zhì)量分?jǐn)?shù)減少10%以上，有干結(jié)出現(xiàn)；小便的體積分?jǐn)?shù)減少10%以上，小便較造模前變黃；符合《中藥新藥臨床研究指導(dǎo)原則》中胃熱癥診斷的體征評(píng)定指標(biāo):主癥為口渴喜飲、舌紅，次癥為消谷善饑、大便秘結(jié)、小便短黃.本試驗(yàn)胃熱癥大鼠的血清IL-8顯著增高亦與文獻(xiàn)[5]結(jié)果一致.表明本試驗(yàn)造模成功.

3.2黃連、蒲公英、枳實(shí)對(duì)胃熱證的治療作用

黃連清熱燥濕，因其長(zhǎng)于苦降而能瀉火下氣，可使胃熱胃火速清而胃氣能降；蒲公英為中醫(yī)傳統(tǒng)清熱解毒藥物，在清解臟腑熱毒病癥方面有顯著療效，用于胃病熱象者時(shí)可清瀉胃火；枳實(shí)理氣消滯，在治療胃腸動(dòng)力障礙性疾病中療效顯著，為消積導(dǎo)滯之要藥.它們的功效有所區(qū)別，但均歸胃經(jīng)，三者的寒性程度以黃連為大寒、蒲公英為中寒、枳實(shí)為微寒.本研究以它們的水煎劑治療胃熱癥大鼠后，其體征得到明顯改善，且改善程度以黃連最強(qiáng)、蒲公英次之、枳實(shí)再次.說明三者均可有效治療胃熱癥，且治療效果與它們的寒性程度相對(duì)應(yīng).

3.3IL-4、IL-8指標(biāo)對(duì)胃熱癥大鼠的影響

IL-8是一種強(qiáng)大的中性粒細(xì)胞趨化和激活肽,主要由單核-巨噬細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞、細(xì)菌成分或產(chǎn)物刺激過的上皮細(xì)胞等產(chǎn)生.它能激活中性粒細(xì)胞脫顆粒引起呼吸爆發(fā),被認(rèn)為是中性粒細(xì)胞在損傷組織中浸潤(rùn)的主要介導(dǎo)者,已被證實(shí)與許多炎癥性疾病有關(guān)[6].IL-4是由Th2細(xì)胞產(chǎn)生的一種重要的抑炎性細(xì)胞因子，對(duì)機(jī)體的免疫功能和炎癥過程具有重要的調(diào)節(jié)作用[7].文獻(xiàn)[8]報(bào)道，黃連、蒲公英、枳實(shí)對(duì)胃熱癥大鼠的胃黏膜炎細(xì)胞浸潤(rùn)有治療作用，可有效促進(jìn)其受損胃黏膜的修復(fù)，且寒性程度愈強(qiáng)，效果愈好.本試驗(yàn)結(jié)果表明，造模后血清中IL-8顯著升高、IL-4降低不顯著、IL-4/IL-8顯著降低，是導(dǎo)致胃黏膜發(fā)生了以中性粒細(xì)胞為主的炎細(xì)胞浸潤(rùn)而呈現(xiàn)出炎性變化的重要原因；黃連、蒲公英、枳實(shí)按寒性程度大小依次使胃熱癥大鼠的IL-8、IL-4、IL-4/IL-8得到相應(yīng)程度的改善，從而改善了胃黏膜的炎性損害，使胃熱證大鼠的胃黏膜得到修復(fù)，并呈現(xiàn)出寒性程度愈強(qiáng)、效果愈好.

同時(shí)IL-8是消化性潰瘍寒熱辨證關(guān)系的重要指標(biāo)，消化性潰瘍熱癥組IL-8均值明顯高于寒證組[9].因此IL-8的明顯升高，是引起模型大鼠飲食、大小便、舌色、舌苔等體征的變化而呈現(xiàn)出胃熱癥的原因；黃連、蒲公英、枳實(shí)按寒性程度大小依次使胃熱癥大鼠的IL-8得到相應(yīng)程度的改善，從而有效治療了胃熱癥，且治療效果與它們的寒性程度相對(duì)應(yīng).

綜上所述，黃連、蒲公英、枳實(shí)通過影響胃熱癥大鼠血清中的IL-8、IL-4、IL-4/IL-8 ，改善胃熱癥大鼠的體征，發(fā)揮對(duì)大鼠胃黏膜炎細(xì)胞浸潤(rùn)的治療作用.本試驗(yàn)的研究結(jié)果將同歸胃經(jīng)寒性中藥黃連、蒲公英、枳實(shí)對(duì)胃熱癥大鼠胃部生理機(jī)能影響的數(shù)據(jù)[8,10-11]合并，為建立歸胃經(jīng)寒性中藥的寒涼程度與胃熱癥動(dòng)物體征及胃部生理機(jī)能之間的因子分析模型提供數(shù)據(jù).

[1] 鄭筱萸.中藥新藥臨床研究指導(dǎo)原則 (試行) [S]. 北京:中國(guó)醫(yī)藥科技出版社，2002:374.

[2] 中華人民共和國(guó)藥典(一部)[S].2005:75.

[3] 梁念海,宓穗卿,胡瑞德,等.胃熱癥動(dòng)物模型的建立[J].中藥新藥與臨床藥理，2004,15(2):83-86.

LIANG Nianhai, MI Suiqing, HU Ruide, et al. Establishment of animal model with stomach-heat syndrome [J]. Traditional Chinese Drug Research amp; Clinical Pharmacology, 2004,15(2):83-86.

[4] 朱文鋒.中醫(yī)診斷學(xué)[M].北京：中國(guó)中醫(yī)藥出版社,2002：68.

[5] 山麗梅,趙艷玲,孔維軍,等.大鼠胃熱癥動(dòng)物模型的建立[J]. 中國(guó)實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志, 2009,15(2):30-32.

SHAN Limei, ZHAO Yanling, KONG Weijun, et al. Establishment of the rat gastric hot model [J]. Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae, 2009, 15(2):30-32.

[6] 寧紅建,唐星火,唐國(guó)都,等.胃腸相關(guān)疾病中幽門螺桿菌感染與胃黏膜白細(xì)胞介素-8含量的關(guān)系[J].臨 床薈萃，2004，19(12)：675-678.

NING Hongjian, TANG Xinghuo, TANG Guodu, et al. Relationship between helicobacter pylori infection and interleukin-8 concentration in gastric mucosa with gastroenterologic diseases [J]. Clinical Focus, 2004, 19(12)：675-678.

[7] 郭彥清,姚樹昆,范海燕.清熱化濕方藥對(duì)以消化不良為主要表現(xiàn)的脾胃濕熱癥患者血清胃腸激素及細(xì)胞因子的影響[J].中國(guó)中醫(yī)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)雜志,2004,10(1):63-65.

GUO Yanqing, YAO Shukun, FAN Haiyan. Effect of QING RE HUA SHI decoction on serum gastrin, Motilin, TNF-α1 and IL-10 in the dyspepsia patients with spleen-stomach damp-heat syndrome [J]. Chinese Journal of Basic Medicine in Traditional Chinese Medicine, 2004, 10(1):63-65.

[8] 李小梅,孫桂波,李續(xù)娥,等.歸胃經(jīng)寒性中藥對(duì)胃熱癥大鼠胃粘膜組織學(xué)的影響[J].廣州中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào),2007,24(2):144-147.

LI Xiaomei, SUN Guibo, LI Xu’e, et al. Influences of cold Chinese herbal medicine with stomach-meridian tropism on histology of gastric mucosa in rats with stomach-heat syndrome[J].Journal of Guangzhou University of Traditional Chinese Medicine,2007,24(2):144-147.

[9] 梁念海,必穗卿,勞紹賢.中醫(yī)胃熱癥基礎(chǔ)研究進(jìn)展[J].中藥新藥與臨床藥理，2003,14(5):360-362.

NIANG Nianhai, MI Suiqing, LAO Shaoxian. Advances in studies on stomach-heat syndrome of Chinese traditional medicine [J]. Traditional Chinese Drug Research amp; Clinical Pharmacology, 2003,14(5):360-362.

[10] 李小梅,李續(xù)娥,孫桂波,等.歸胃經(jīng)寒性中藥對(duì)胃熱癥大鼠胃機(jī)能的影響[J].中國(guó)中藥雜志,2007,32(11):1064-1067.

LI Xiaomei, LI Xu’e, SUN Guibo, et al. Physiological effects of cold and cool Chinese herbal medicine of channel tropism of stomach on rats with stomach-heat syndrome [J]. China Journal of Chinese Materia Medica, 2007, 32(11):1064-1067.

[11] 李小梅,黃雪群,李續(xù)娥,等.采用紅外熱掃描成像系統(tǒng)研究歸胃經(jīng)寒性中藥對(duì)胃熱癥大鼠的熱效應(yīng)[J].激光生物學(xué)報(bào),2007,16(2):179-185.

LI Xiaomei, HUANG Xuequn, LI Xu’e, et al. Thermal effects of cold amp; cool traditional medicine of channel tropism of stomach on stomach-heat syndrome rats using thermal texture maps system[J].Acta Laser Biology Sinica, 2007,16(2):179-185.

Keywords： Rhizoma Coptidis; Herba Taraxaci; Fructus Aurantii Immaturus; stomach-heat syndrome; general symptom

【責(zé)任編輯 成 文】

INFLUENCESOFCOLDCHINESEHERBALMEDICINEWITHSTOMACH-MERIDIANTROPISMONGENERALSYMPTOMOFRATSWITHSTOMACH-HEATSYNDROME

HUANG Xuequn1,2, LI Xiaomei1,3, LI Xu’e1*

(1. Guangdong Key Lab of Biotechnology for Plant Development, South China Normal University, Guangzhou 510631, China; 2. Qingyuan Polytechnic College, Qingyuan, Guangdong 511510, China; 3. School of Life Science, Guangzhou University, Guangzhou 510511, China)

Rats were fed with decoction of Rhizoma zingiberis for 15 days to induce the model of stomach-heat syndrome. After modeling, the decoctions of Rhizoma Coptidis (RC), Herba Taraxaci (HT) and Fructus Aurantii Immaturus (FAI) were given respectively to corresponding groups for 10 days. After the treatment, the amount of the daily diet, volume and absorbance of urine, pellet number and moistness of excrement, color and coating degree of tongue were recorded, the contents of interleukin-4 (IL-4) and interleukin-8 (IL-8) in serum were measured by radioimmunoassay. The results showed: the model rats had yellow coating and red tongues (Plt;0.05), amount of daily diet were increased (over 10%), urine volume and excrement pellet number were decreased (over 10%), the urine color became yellow (Plt;0.01), the excrement became dry, and the content of IL-8 increased noticeably (Plt;0.01). RC, HT and FAI could improve the indexes observed above, and the colder the nature, the better the effects. It can be concluded that the reason why RC, HT and FAI relieve the general symptom of rats with stomach-heat syndrome is that they can decrease the content of IL-8 in serum.

2009-09-07

廣東省自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(7005844)

黃雪群(1977—)，女，廣東連州人，華南師范大學(xué)2004級(jí)在職碩士研究生，清遠(yuǎn)職業(yè)技術(shù)學(xué)院講師，Email:huangxuequn@163.com；李續(xù)娥(1964—)，女，陜西興平人，博士，華南師范大學(xué)教授，主要研究方向：中藥藥性理論，Email:lixuescnu@sohu.com.

*通訊作者

1000-5463(2010)01-0088-04

R285.5

A