陳海燕,毛云飛

(揚州工業(yè)職業(yè)技術(shù)學(xué)院,江蘇揚州225002)

催化動力學(xué)光度法測定蘆丁

陳海燕,毛云飛

(揚州工業(yè)職業(yè)技術(shù)學(xué)院,江蘇揚州225002)

在氫氧化鈉介質(zhì)中,蘆丁對高碘酸鉀氧化偶氮胂Ⅲ褪色反應(yīng)有明顯的催化作用,據(jù)此建立了測定蘆丁含量的催化動力學(xué)光度法.最大吸收波長為590 nm,該方法的線性范圍為0.03～1.0 mg/L.對實驗數(shù)據(jù)進行回歸處理的線性方程為Δ Α=0.448 5c(蘆丁)+0.001 1,相關(guān)系數(shù)為 r=0.998 5,檢出限為0.016 7 mg/L.該方法簡便,快速,靈敏度高,用于實際樣品的測定,結(jié)果令人滿意.

催化動力學(xué)光度法;高碘酸鉀;偶氮胂Ⅲ;蘆丁

蘆丁(rutin)又名維生素 P、蕓香甙,廣泛存在于槐米、葫蘆茶,毛冬青,連翹,蕎麥、橙皮、番茄等物質(zhì)中,具有抗炎、抗病毒和清除自由基的作用,可用于糖尿病、高血壓、腦溢血的輔助治療.最新報道,蘆丁具有較強的抗癌活性,是很有潛力的抗癌化合物.目前測定蘆丁的方法越來越多,有分光光度法[1]、色譜法[2]、電化學(xué)法[3]、熒光分析法[4]、極譜法[5]等.

由于動力學(xué)光度分析法具有靈敏度高,儀器試劑易得及操作簡便快速等優(yōu)點,近年來在蘆丁檢測中已有應(yīng)用[6-7],但以高碘酸鉀氧化偶氮胂Ⅲ作為指示反應(yīng)的方法未見報道.作者在實驗中觀察到,蘆丁在NaOH介質(zhì)中能催化高碘酸鉀氧化偶氮胂Ⅲ褪色的反應(yīng),據(jù)此建立了催化動力學(xué)光度法測定蘆丁的新方法,并用于蘆丁片中蘆丁含量的測定,結(jié)果滿意.

1 實驗部分

1.1 儀器和試劑

V-1100可見分光光度計(上海美普達儀器有限公司);HH-S恒溫水浴鍋(浙江省余姚市檢測儀表廠);FC204型電子分析天平(上海精密儀器有限公司天平廠).

蘆丁標準溶液10.0 mg/L:用蒸餾水配制1.0 g/L的儲備液(配制時加幾滴0.05 mol/L氫氧化鈉溶液使其完全溶解),4℃以下冰箱內(nèi)保存.用時用25 mL移液管取1.0 g/L的蘆丁到2 500 mL容量瓶中,定容、搖勻.0.05 mol/L氫氧化鈉溶液;0.2 g/L偶氮胂Ⅲ溶液;0.01 mol/L高碘酸鉀溶液;所用試劑均為分析純,水為二次蒸餾水.

1.2 實驗方法

取10 mL的具玻璃塞比色管2支,其中一支加入0.5 mL蘆丁標準溶液;另一支不加催化劑蘆丁.然后分別依次加入0.05 mol/L的NaOH溶液1.1 mL,0.2 g/L的偶氮胂Ⅲ溶液2.0 mL,0.01 mol/L的高碘酸鉀溶液0.6 mL,加水至刻度,混勻.70℃水浴加熱反應(yīng)10 min后,迅速打開管塞用流水冷卻3 min,以蒸餾水為參比,用1 cm比色皿于590 nm波長處測量非催化體系的吸光度A0和催化體系的吸光度A,計算ΔA=A0-A值.

2 結(jié)果與討論

2.1 吸收曲線

按實驗方法配制一系列不同組分的溶液,在530～650 nm的波長范圍內(nèi)分別測定吸光度.并繪制吸收曲線見圖1.

結(jié)果表明,反應(yīng)前后,偶氮胂Ⅲ的吸光性質(zhì)不變,最大吸收波長為590 nm.故選用590 nm為測定波長.在氫氧化鈉介質(zhì)中,高碘酸鉀可氧化偶氮胂Ⅲ使之褪色,蘆丁對此褪色反應(yīng)有顯著的催化作用.

2.2 適宜介質(zhì)

由于蘆丁難溶于水,易溶于NaOH溶液,故本體系選用堿性介質(zhì).試驗表明,NaOH濃度對反應(yīng)的影響較大,0.05 mol/L NaOH溶液用量在0.3～1.0 mL范圍內(nèi),ΔΑ隨NaOH用量的增大而增大;1.0～1.2 mL范圍內(nèi),ΔΑ達到最大且比較穩(wěn)定;在1.2～1.5 mL范圍內(nèi),ΔΑ隨NaOH用量的增大而減小.故實驗確定NaOH溶液的用量為1.1 mL.

2.3 高碘酸鉀和偶氮胂Ⅲ用量的選擇

按實驗方法,其他條件不變,改變高碘酸鉀和偶氮胂Ⅲ的用量.實驗表明,0.01 mol/L高碘酸鉀用量在0.5～0.6 mL之間,ΔΑ達到最大且相對穩(wěn)定,所以選擇加入高碘酸鉀用量為0.6 mL.0.2 g/L偶氮胂Ⅲ的用量在0.5～2.0 mL之間,ΔΑ隨其用量的增大而增大;偶氮胂Ⅲ的用量大于2.0mL,ΔΑ的值趨于恒定.所以選用偶氮胂Ⅲ的用量為2.0 mL.

2.4 反應(yīng)溫度和加熱時間

圖1 吸光度曲線Fig.1 Absorption curves

按實驗方法,其他條件不變,改變加熱的溫度,可以測得溫度與ΔΑ的關(guān)系.實驗表明在65℃之前,ΔΑ隨溫度的上升而增大;在75℃之后,ΔΑ隨溫度的上升而減小.而在65 ℃～75 ℃之間,ΔΑ較大且比較穩(wěn)定,故本實驗選擇在70℃下進行.

按實驗方法,其他條件不變,改變加熱時間,可以測得加熱時間與ΔΑ的關(guān)系.實驗表明加熱時間在10～15 min 之間 ,ΔΑ較大且比較穩(wěn)定 ;加熱時間過長 ,ΔΑ值隨加熱時間的增加而減小.故本實驗選擇的加熱時間為10 min.

2.5 工作曲線、線性范圍和檢出限

按實驗方法,其他條件不變,改變蘆丁標準溶液的用量,可以測得其用量與ΔΑ的關(guān)系,如圖2所示.線性方程為ΔΑ=0.448 5c(蘆丁)+0.001 1,相關(guān)系數(shù)r=0.998 5,11次空白試驗求得標準偏差為0.25%,進而求得檢出限為0.016 7 mg/L,線性范圍為0.03～1.0 mg/L.

圖2 校準曲線Fig.2 Calibration Curve

3 樣品分析

取10片蘆丁片,研細混勻.準確稱取0.100 0 g于小燒杯中,溶解后定容于250 mL容量瓶中.測定時稀釋10倍,取適量按實驗方法進行測定,同時做標準加入回收實驗,結(jié)果如表1所示.6次測定的相對標準偏差為2.2%,回收率在97.9%～100.7%之間.

表1 樣品分析結(jié)果及回收率(n=6)Table 1 The analytical results of sample and recovery(n=6)

[1]練萍,李蕾,賴聞玲,等.雙水相體系萃取分離-紫外分光光度法測定桑葉中蘆丁[J].理化檢驗-化學(xué)分冊,2006,16(42):821-823.

[2]符繼紅,張麗靜.高效液相色譜法測定新疆玫瑰花中蘆丁的含量[J].分析儀器,2008(1):44-46.

[3]孔令蜜,李夢瑤,彭斌,等.納米復(fù)合物修飾電極的電化學(xué)傳感器檢測蘆丁[J].分析實驗室,2009,28(2):8-11.

[4]紹承斌,吳四維,田龍,等.極譜催化波法測定中草藥中的蘆丁[J].分析實驗室,2006,25(11):103-105.

[5]張敏,曹庸,唐純翼,等.Al3+-蘆丁二元絡(luò)合物熒光光度法測定銀杏葉中總黃酮的含量[J].分析科學(xué)學(xué)報,2005,21(2):188-190.

[6]劉道杰,張愛梅,田林芹.高碘酸鉀氧化丁基羅丹明B催化動力學(xué)光度法測定微量蘆丁[J].分析化學(xué),2003,31(10):1224-1227.

[7]崔慧,陶緒泉,張愛梅,等.催化動力學(xué)光度法測定微量蘆丁[J].光譜實驗室,2003,20(5):706-709.

Determination of Rutin by Catalytic Kinetic Spectrophotometry

CHEN Hai-yan,MAO Yun-fei
(Yangzhou Vocational Institute of Industrial Technology,Yangzhou225002,Jiangsu,China)

A catalytic kinetic spectrophotometric method was established to determine trace rutin based on the catalysis of rutin to the discoloring reaction of arsenazoⅢoxidized by potassium periodate solution;and it was adopted to detect rutin of practical specimens.Results indicate that the maximum absorption is at 590 nm,and the linear range for measurement is 0.03～1.0 mg/L.Besides,linear formula for regression processing of experimental data can be expressed asΔ Α =0.448 5c+0.001 1,with correlating coefficient and detection limit being 0.998 5 and 0.016 7 mg/L,respectively.The method is easy to operate,expeditious,and sensitive,and can be well practically used for determination of rutin.

catalytic kinetic spectrophotometry;potassium periodate;arsenazoⅢ;rutin

O 657.32

A

1008-1011(2010)05-0085-03

2010-06-13.

陳海燕(1976-),女,講師,碩士.從事分析化學(xué)的研究.E-mail:chenhaiyan@ypi.edu.cn.