羅元平 張維萍 王玉梅

在病理制片過程中,外檢凝血塊、尸檢中的血栓及血腫標本不少見。尤其肺動脈栓塞標本,取材時血栓與動脈易分離破碎。這類組織切片有難度,因組織脆、硬、切片易碎、容易脫片、染色不佳。將血栓類組織切片進行探討,方法如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 本組收集 2000年 1月至 2009年 9月,外院送檢醫(yī)療糾紛尸檢 96例,其中血栓栓塞、外傷出血、血腫形成死亡病例 33例。尸檢標本均用10%福爾馬林液固定,1周后取材,脫水、切片至染色。

1.2 試劑 乙醇、無水乙醇加丙酮的混合液[1]。

1.3 方法 取保留血栓、血腫類標本 66塊分兩組實驗。a.用乙醇、丙酮等量混合后脫水;b.純丙酮液脫水;時間:12、24 h分別進行,按常規(guī)透明、浸蠟、包埋、切片,厚度 4～5μm,HE染色,中性樹膠封固。

2 結(jié)果

回顧性觀察血栓、血腫、凝血塊組織病理切片、染色的現(xiàn)狀。切片不全、刀痕、皺褶、染色掉片,常反復取材、染色差等因素。針對切片、染色差因素,經(jīng)分析認為脫水劑、脫水方法是主要因素造成切片差主要因素。回顧與實驗結(jié)果,見表 1。

表 1 血栓血腫標本切片回顧與實驗觀察對比%

3 討論

送檢醫(yī)療糾紛尸檢 96例中,非手術(shù)死亡為 63例,占65.6%。因手術(shù)、意外傷等導致動脈血栓栓塞、失血、凝血、形成血腫等 33例,占尸檢病例的 34.4%。在外檢中血塊及凝血組織也不見,如輸卵管妊娠破裂病例?；顧z切片對凝血組織沒有特別研究,因尸檢組織標本量較大,切片脆、硬、易碎,容易脫片多,因而進行研究探討。從表 1中看出 33例均為出血、血腫、血栓栓塞標本,視病變浸及范圍決定取材,肺動脈血栓最大直徑 2.8 cm、長 6～8 cm;大血腫體積 30 cm×25 cm×6 cm,將臟器包裹。此類標本取材后與其他臟器一起脫水、透明、切片和染色,結(jié)果血栓類切片不理想,反復切片染色。

在病理標本制作技術(shù)書中闡述:丙酮脫水力強,能使組織明顯收縮,不單獨使用,可與酒精混合使用。并提示:如單獨使用丙酮脫水,不可超過 1 h[1]。可直接用丙酮脫水,因丙酮比乙醇浸透組織速度快,組織不易變硬,脫水時間不宜過長,視組織塊大小約 1～2 h[2]。本組將 2 cm×1.5 cm×0.3 cm大的血栓凝血組織塊放到丙酮液里 24 h脫水觀察,將另份血塊組織放到酒精丙酮混合液中 12h脫水觀察。兩組切片、染色觀察沒有異常改變。切片無皺褶、染色不掉片,成功率為93.9%,只有兩張切片邊緣有點脫落稍差,占 6.1%,由此證明:酒精與丙酮混合后效果比予想的要好。

傳統(tǒng)方法低濃度到高濃度一直延用。沒有去探討、實驗研究,沒有最佳的方法。教材及文獻中提到丙酮脫水時間限于 1～2 h。因此,在日常工作中一般不會去改變。本組取血栓標本實驗兩液按等量配備,加在前兩缸低濃度酒精里。按常脫水時間進行,自然將混合液由低濃度帶到高濃度,脫水劑起到互補的作用。經(jīng)過切片染色證明:能連續(xù)切片、切片不破碎、厚薄適宜、染色不掉片、組織結(jié)構(gòu)清晰、層次分明,解決了多年來大血栓、血腫切片掉片的困擾。

[1]李敏,秦軍,孫麗娟,等.血塊組織制片方法的改進.診斷病理學雜志,2001,8:53.

[2]于洪藻,李成庫.病理標本制作技術(shù).白求恩醫(yī)科大學基礎(chǔ)醫(yī)學部,1980,7:58.