雷 紅，蔡亮亮，操麗麗，姜紹通

菜籽油中芥酸含量對小鼠食用安全性的影響

雷 紅，蔡亮亮，操麗麗，姜紹通

(合肥工業(yè)大學(xué)生物與食品工程學(xué)院，安徽 合肥 230009)

采用氣相色譜法分析雙低冷榨菜籽油和普通菜籽油的芥酸含量；運(yùn)用摻食法喂飼小鼠含兩種菜籽油的飼料(含油量2%)，連續(xù)飼養(yǎng)5周，觀察小鼠、體質(zhì)量、攝食量、總膽固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白(HDL-C)、臟器(心、肝、脾、肺、雙腎、睪丸、卵巢)質(zhì)量的變化；研究菜籽油中芥酸含量對小鼠食用安全性的影響。結(jié)果表明，雙低冷榨菜籽油芥酸含量為4.744%，普通菜籽油芥酸含量為 32.595%，雙低冷榨菜籽油芥酸含量明顯低于普通菜籽油。喂飼雙低冷榨菜籽油飼料組小鼠血清TC、TG水平低于普通菜籽油飼料組；血清HDL-C水平略高于普通菜籽油飼料組；與普通菜籽油飼料組相比，喂飼雙低冷榨菜籽油飼料對小鼠血脂水平有良好影響。與正常對照組和雙低冷榨菜籽油組相比，普通菜籽油組小鼠心臟質(zhì)量和肝臟質(zhì)量明顯升高，可能與芥酸使脂肪沉積于心臟和肝臟有關(guān)。喂飼兩種菜籽油對小鼠體質(zhì)量、攝食、其他臟器質(zhì)量均無明顯影響。

菜籽油；芥酸含量；血脂；臟器質(zhì)量；食用安全性

芥酸又名順-13-二十二碳一烯酸，是一種長碳鏈不飽和脂肪酸，分子式為C22H42O，主要存在于十字花科和金蓮花科植物種子中[1]。菜籽油中富含芥酸，一般未處理過的菜籽油，芥酸含量可高達(dá)40%。如果長期食用富含芥酸的菜籽油，會因芥酸過多蓄積而易引起血管壁增厚和心肌脂肪沉積[2-3]。目前，聯(lián)合國糧食組織和世界衛(wèi)生組織已建議。食用菜籽油中的芥酸含量不得超過5%[4-5]。高芥酸食品對人體攝入的危害性已得到普遍的認(rèn)識，但未見食用安全性相關(guān)的動物實(shí)驗(yàn)研究的文獻(xiàn)報(bào)道。本研究分析兩種菜籽油(雙低冷榨菜籽油和普通菜籽毛油)的芥酸含量，并采用摻食法喂飼小鼠，研究菜籽油中芥酸含量小鼠一般狀況、血脂、部分臟器變化等食用安全性方面的影響；同時(shí)也為本實(shí)驗(yàn)室研制的雙低冷榨菜籽油食用安全性評價(jià)提供動物實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的參考。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

昆明種小鼠60只，雌雄各半，體質(zhì)量16～20g，由安徽醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動物中心提供，合格證號：皖醫(yī)實(shí)動準(zhǔn)第01號。

基礎(chǔ)飼料由安徽醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動物中心提供；兩種含菜籽油的動物飼料分別由基礎(chǔ)飼料中添加2%雙低冷榨菜籽油和普通菜籽油制成。

甘油三酯(TG)測定試劑盒、總膽固醇(TC)測定試劑盒、高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)試劑盒 長春匯力生物技術(shù)有限公司；苯、正己烷、甲醇、無水硫酸鈉等均為分析純；去離子水。

1.2 儀器與設(shè)備

YP202N電子天平、721 紫外分光光度計(jì) 上海精密科學(xué)儀器有限公司；電熱恒溫水浴鍋 上海躍進(jìn)醫(yī)療器械廠；GTL 16A型離心機(jī) 上海醫(yī)用分析儀器廠；HG101-1 型電熱鼓風(fēng)干燥箱 南京實(shí)驗(yàn)儀器廠；GC-2010型氣相色譜儀 日本島津公司。

1.3 方法

1.3.1 菜籽油中脂肪酸組成與含量分析(氣相色譜法)[6-7]

樣品甲酯化：精確稱取0.1g油樣，加入2mL正己烷溶解后加入0.5mol/L KOH-甲醇溶液1.0mL。在60℃水浴中振蕩30min，冷卻后加入2mL正己烷，用超純水定容到10mL后靜置、離心，取上清液，上樣前加入少量無水硫酸鈉以除去水。

氣相色譜條件：火焰離子檢測器(FID)溫度260℃，進(jìn)樣口溫度250℃，分流比為50:1；程序升溫過程：200℃(1min)；3℃/min升至230℃保留9min；載氣為氦氣。采用面積歸一化的方法確定脂肪酸的百分含量(以峰值面積的百分比表示)。

式中，c 是常數(shù)， 取 c＝6.0， 其子小波為 ψa，b （x）=以此作為為基本小波，具有波動性和衰減性。

1.3.2 小鼠一般狀況觀察、血脂和臟器質(zhì)量測定

昆明種小鼠60只，雌(♀)雄(♂ )各半，分3組，每組20只，分別喂以正常飼料、雙低冷榨菜籽油飼料、普通菜籽油飼料，連續(xù)喂養(yǎng)5周。實(shí)驗(yàn)開始后，各組小鼠分別進(jìn)食相應(yīng)飼料，分籠飼養(yǎng)，溫度為(22±2)℃，自然光照，自由進(jìn)食進(jìn)水。每日觀察小鼠的一般狀況和攝食量。每周稱體質(zhì)量一次。于實(shí)驗(yàn)結(jié)束取血，分離血清，測定血脂(血清總膽固醇、甘油三酯、高密度脂蛋白膽固醇)含量，按試劑盒說明書進(jìn)行操作。實(shí)驗(yàn)結(jié)束，解剖小鼠，取心、肝、脾、肺、雙腎、卵巢、睪丸，稱質(zhì)量，記錄臟器質(zhì)量。

1.3.3 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

所有數(shù)據(jù)均用均值±標(biāo)準(zhǔn)差(x±s)表示，兩組間差異顯著性比較采用t檢驗(yàn)。

2 結(jié)果與分析

2.1 菜籽油脂肪酸組成與含量

采用面積歸一化法計(jì)算兩種菜籽油中脂肪酸的百分含量，如圖1、2和表1所示。結(jié)果表明，雙低冷榨菜籽油芥酸含量為4.744%；普通菜籽油芥酸含量為32.595%；普通菜籽油芥酸含量明顯高于雙低冷榨菜籽油。

圖1 雙低冷榨菜籽油脂肪酸組成含量GC圖譜Fig.1 GC analysis of fatty acid composition of cold-pressing doublelow rapeseed oil

圖2 普通菜籽油脂肪酸組成含量GC圖譜Fig.2 GC analysis of fatty acid composition of common rapeseed oil

表1 兩種菜籽油脂肪酸組成含量結(jié)果統(tǒng)計(jì)表Table 1 Fatty acid composition of cold-pressing double-low rapeseed oil and common rapeseed oil

2.2 對小鼠體質(zhì)量的影響

實(shí)驗(yàn)期間，各組小鼠體質(zhì)量逐漸增加，與正常對照組相比，雙低冷榨菜籽油組與普通菜籽油組體質(zhì)量增長無顯著性差異。雙低冷榨菜籽油組與普通菜籽油組相比亦無顯著性差異。如表2所示，喂飼兩種菜籽油對小鼠體質(zhì)量均無明顯影響。

2.3 對小鼠攝食量的影響

實(shí)驗(yàn)期間，各組小鼠攝食量逐漸增加，與正常對照組相比，雙低冷榨菜籽油組與普通菜籽油組攝食量無顯著性差異。雙低冷榨菜籽油組與普通菜籽油組相比亦無顯著性差異。如表3所示，喂飼兩種菜籽油對動物攝食量均無明顯影響。

2.4 對小鼠血脂水平的影響

與正常對照組相比，雙低冷榨菜籽油組與普通菜籽油組小鼠血清TC、TG水平明顯升高；而且，雙低冷榨菜籽油組血清TC、TG水平明顯低于普通菜籽油組。與正常對照組相比，雙低冷榨菜籽油組和普通菜籽油組血清HDL-C水平無顯著性差異，但略有下降趨勢；與普通菜籽油組相比，雙低冷榨菜籽油組血清HDL-C水平亦無顯著性差異，但略有升高趨勢(表4)。以上結(jié)果表明，喂飼添加菜籽油的飼料可使小鼠血脂水平升高，喂飼低芥酸含量的雙低冷榨菜籽油小鼠血脂水平明顯低于喂飼高芥酸含量的普通菜籽油。

表4 喂飼兩種菜籽油對小鼠血脂水平的影響(n=20)Table 4 Effects of cold-pressing double-low rapeseed oil and common rapeseed oil on serum lipid paramters of mice (n=20)

2.5 對小鼠臟器質(zhì)量的影響

與正常對照組和雙低冷榨菜籽油組相比，普通菜籽油組雌性小鼠心臟質(zhì)量明顯升高；雄性小鼠心臟質(zhì)量亦有升高趨勢。與正常對照組和雙低冷榨菜籽油組相比，普通菜籽油組小鼠肝臟質(zhì)量亦明顯升高，無明顯性別差異(表5)。結(jié)合上述實(shí)驗(yàn)結(jié)果，喂飼高芥酸含量的普通菜籽油小鼠血脂水平明顯高于喂飼低芥酸含量的雙低冷榨菜籽油，因此，喂飼高芥酸含量的普通菜籽油可能使脂肪沉積于心臟、肝臟，導(dǎo)致心、肝質(zhì)量的增加。與正常對照組相比，雙低冷榨菜籽油組和普通菜籽油組小鼠的其他各臟器(脾、肺、腎、卵巢、睪丸)質(zhì)量均無明顯差異(表5)。

表2 喂飼兩種菜籽油對小鼠體質(zhì)量影響(n=10)Table 2 Effects of cold-pressing double-low rapeseed oil and common rapeseed oil on body weight of mice (n=10)g

表3 喂飼兩種菜籽油對小鼠攝食量的影響(n=10)Table 3 Effects of cold-pressing double-low rapeseed oil and common rapeseed oil on food intake safety in mice (n=10)

表5 喂飼兩種菜籽油對小鼠臟器質(zhì)量的影響(n=10) Table 5 Effects of cold-pressing double-low rapeseed oil and common rapeseed oil on the weights of visceral organs of mice (n=10)g

3 結(jié) 論

雙低冷榨菜籽油芥酸含量為4.744%，普通菜籽油芥酸含量為32.595%；普通菜籽油芥酸含量明顯高于雙低冷榨菜籽油。

喂飼雙低冷榨菜籽油飼料組小鼠血清TC、TG水平明顯低于普通菜籽油飼料組；血清HDL-C水平略高于普通菜籽油飼料組；與普通菜籽油飼料組相比，喂飼雙低冷榨菜籽油對小鼠血脂水平有良好影響，本實(shí)驗(yàn)中所用食用油量相當(dāng)于人的食用量是1g/(kg bw·d)。

喂飼兩種菜籽油對小鼠體質(zhì)量和攝食量均無明顯影響。與正常對照組和雙低冷榨菜籽油組相比，普通菜籽油組雌性小鼠心臟質(zhì)量明顯升高，雄性小鼠心臟質(zhì)量亦有升高趨勢；普通菜籽油組小鼠肝臟質(zhì)量明顯升高，無明顯性別差異；可能與喂飼高芥酸含量的菜籽油使脂肪沉積于心臟，肝臟，導(dǎo)致心、肝質(zhì)量的增加有關(guān)。

[1]吳關(guān)庭, 郎春秀, 陳錦清. 芥酸的生產(chǎn)及其衍生產(chǎn)品開發(fā)[J]. 中國油脂, 2007, 32(6): 27-31.

[2]焦紅兵. 心臟病人少食菜籽油[J]. 農(nóng)業(yè)科技與信息, 2006(4): 47-47.

[3]藝瀚. 老人不宜長期吃菜籽油[J]. 湖南農(nóng)業(yè), 2006(11): 28-28.

[4]王志勇, 王欽文. 新《菜籽油》國家標(biāo)準(zhǔn)的特點(diǎn)及質(zhì)量要求[J]. 糧油加工與食品機(jī)械, 2005(8): 21-24.

[5]薛雅琳. 新的《菜籽油》產(chǎn)品國家標(biāo)準(zhǔn)頒布實(shí)施[J]. 中國油脂, 2005, 30(1): 7-8.

[6]牟志春, 王惜琴, 張海波. 毛細(xì)管氣相色譜法測定進(jìn)口食用菜籽油中的芥酸含量[J]. 中國國境衛(wèi)生檢疫雜志, 2000, 23(2): 78-79.

[7]廖百森, 肖義夫, 趙艦, 等. 氣相色譜法快速測定菜籽油中芥酸[J].中國公共衛(wèi)生, 2003, 19(2): 214.

Effect of Erucic Acid Content in Rapeseed Oil on Food Intake Safety in Mice

LEI Hong，CAI Liang-liang，CAO Li-li，JIANG Shao-tong
(College of Biological and Food Engineering , Hefei University of Technology, Hefei 230009, China)

The erucic acid contents of cold-pressing double-low rapeseed oil and common rapeseed oil were analyzed by gas chromatography (GC). Sixty Kunming mice (half male and half female) were divided into 3 groups of 20 mice each (also half male and half female): control (fed normal diet), cold-pressing double-low rapeseed oil-treated (fed diet containing cold-pressing double-low rapeseed oil with 2% oil content) and common rapeseed oil-treated (fed common rapeseed oil with 2% oil content) groups. All these mice were fed for 5 consecutive weeks. The general status, body weight, food consumption, blood lipid indexes including total cholesterol (TC), triglyceride (TG) and high-density lipoprotein (HDL) and the weights of the visceral organs including heart, liver, spleen, lung and kidney of mice were measured once a week during the period of feeding. The results indicated that the erucic acid content of cold-pressing double-low rapeseed oil was 4.744%, and that of common rapeseed oil was 32.595%. Obviously, the former was much lower than the latter. The mice fed diet containing cold-pressing double-low rapeseed oil presented lower serum TC and TG levels but slightly higher HDL-C level than the mice fed diet containing common rapeseed oil. Therefore, cold-pressing double-low rapeseed oil is more suitable for animal feeding due to lower increments of the above serum lipid parameters when compared with common rapeseed oil. Compared with control and cold-pressing double-low rapeseed oil-treated mice, common rapeseed oil-treated mice showed an obvious increase in the weights of heart and liver, which might be related to fat deposition in heart and liver induced by the presence of erucic acid. No significant differences in body weight, food consumption and the weights of spleen, lung and kidney were observed among mice fed normal diet and diet containing cold-pressing double-low rapeseed oil or common rapeseed oil.

rapeseed oil；erucic acid content；serum lipid；organ weight；food intake safety

TS229

A

1002-6630(2010)19-0321-04

2010-02-02

“十一五”國家科技支撐計(jì)劃項(xiàng)目(2006BAD05A12)

雷紅(1973—)，女，副教授，博士，研究方向?yàn)樘烊划a(chǎn)物純化與活性及食品安全性評價(jià)。E-mail：leihong66@sohu.com