趙艷玲, 山麗梅, 王伽伯, 周 旭, 肖小河

(解放軍 302醫(yī)院中藥研究所,北京 100039)

慢性腹瀉是一種臨床常見病和多發(fā)病,多表現(xiàn)為起病緩慢,病程較長,便質(zhì)稀溏或軟爛,或完谷不化,有的可挾有黏液,主要包括現(xiàn)代醫(yī)學(xué)中的慢性腸炎、慢性結(jié)腸炎、腸功能紊亂、結(jié)腸過敏等由消化器官發(fā)生功能或器質(zhì)性病變導(dǎo)致的腹瀉。中醫(yī)病證以腹瀉、體質(zhì)下降、畏寒、倦怠等為主要表現(xiàn)[1]。經(jīng)過系統(tǒng)臨床觀察,桃花止瀉顆粒具有溫中散寒、緩急止痛、澀腸止瀉等作用,臨床緩解治愈率達(dá) 90%以上[2]。采用超微粉碎工藝后,桃花止瀉顆?？诟懈?顆粒細(xì)化,增加了胃腸道的覆蓋率。因此本實(shí)驗(yàn)分別以小鼠、大鼠為實(shí)驗(yàn)對象,觀察桃花止瀉顆粒對慢性腹瀉的治療作用,為其臨床應(yīng)用提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

1 材料和方法

材料：番瀉葉、大黃均購自北京同仁堂藥店。番瀉葉制成 20%煎劑(200g/L)。大黃制成 1000g/L煎劑。思密達(dá)散劑,博福 —益普生(天津)制藥有限公司生產(chǎn),批號(hào)：S 0567。健康清潔級昆明(K M)小鼠 50只,♀♂各半,體重(20±2)g,由軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供(合格證號(hào)SCXK-(軍)2007-004)。健康清潔級SD大鼠 70只,♀♂各半,體重(220±20)g,由北京維通利華實(shí)驗(yàn)動(dòng)物技術(shù)有限公司提供(合格證號(hào)SCXK(京)2007-0001)。

方法：番瀉葉引起大鼠慢性腹瀉試驗(yàn)[3]健康SD大鼠60只,隨機(jī)分成 6組,即對照組,模型組,思密達(dá)組,桃花止瀉顆粒高、中、低劑量(4,2,1 g/k g)劑量組,每組 10只,♀♂各半。按 20mL/k g灌服200g/L番瀉葉浸劑,1次/d,連續(xù) 7 d。在灌服 3d后,禁食不禁水 32 h,由肛門(深入 8c m)注入 80g/L的乙酸 0.5mL,捏緊大鼠肛門,倒提 20s。造模同時(shí)每天在給200g/L番瀉葉浸劑4h后給予相應(yīng)藥物治療7 d,第 8天檢測大鼠稀便率、血清 D-木糖含量、淀粉酶活性、琥珀酸脫氫酶比活性等相關(guān)指標(biāo)。

大黃引起小鼠慢性腹瀉試驗(yàn)[4]健康 K M小鼠 60只,隨機(jī)分成 6組,即對照組,模型組,思密達(dá)組,桃花止瀉顆粒高、中、低劑量(5.85、2.93、1.46 g/k g)劑量組, 每組 10只,♀♂各半。除正常對照組外,其余各組小鼠均每天灌胃 1 g/mL大黃煎劑 0.5mL/20 g。7 d后然后灌胃給藥,連續(xù) 5 d,模型對照組給予等量生理鹽水。末次給藥前 12 h禁食第 5天每只小鼠灌胃 1 g/mL大黃 0.5mL,1 h后給藥。每只小鼠置入墊有潔凈濾紙的鼠籠內(nèi),1 h更換墊紙 1次,觀察記錄6 h內(nèi)濾紙上的稀便點(diǎn)數(shù)及動(dòng)物排便情況。

2 結(jié) 果

2.1 桃花止瀉顆粒對番瀉葉引起大鼠慢性腹瀉及消化吸收功能的影響

正常組大鼠活潑喜動(dòng),皮毛光亮,無異常。各組大鼠一般癥狀變化造模大鼠第 2天出現(xiàn)腹瀉、稀便,個(gè)別可見血便,伴見精神委靡,豎毛,拱背,食欲差,蜷臥少動(dòng)。給予藥物治療后,稀便明顯減少,精神好轉(zhuǎn),食欲增強(qiáng)。以各組大鼠稀便率分別記錄造模 7 d后給予藥物治療后不同時(shí)間各組的大鼠干、濕糞便粒數(shù),計(jì)算稀便率。造模模型組出現(xiàn)嚴(yán)重稀便,桃花止瀉顆粒 4,2,1 g/k g劑量組均較模型組明顯改善,并呈一定的劑量依賴性。其中桃花止瀉顆粒高劑量組 4 g/k g組與思密達(dá)組 4g/k g劑量組效果最顯著。結(jié)果見表 1。造模后,模型組 D-木糖含量、淀粉酶活性和琥珀酸脫氫酶比活性明顯下降(P＜0.01)。給予藥物治療后,各組大鼠血清D-木糖含量、淀粉酶活性和琥珀酸脫氫酶比活性明顯升高。結(jié)果見表 2。

2.2 桃花止瀉顆粒對大黃引起小鼠慢性腹瀉影響

小鼠均每天灌胃 1 g/mL大黃煎劑 0.5mL/20 g,7 d后動(dòng)物出現(xiàn)食欲減退、活動(dòng)減少、泄瀉、豎毛拱背、毛色失澤等癥狀。給予藥物治療后,小鼠稀便點(diǎn)數(shù)減少。桃花止瀉顆粒治療組小鼠稀便點(diǎn)數(shù)隨著治療劑量的升高呈減少趨勢。在治療后 2、3、4 h時(shí)間段,模型組小鼠稀便點(diǎn)數(shù)分別為6.58±1.22、7.34±0.41、3.26±0.96。與模型組相比,桃花止瀉顆粒高、中、低劑量組有顯著性差異(P＜0.01,P＜0.05)。見圖 1。桃花止瀉顆粒高劑量治療組小鼠稀便點(diǎn)數(shù)分別為 2.92±0.99、3.01±0.67、1.98±1.34,陽性藥思密達(dá)治療組小鼠稀便點(diǎn)數(shù)為分別 2.98±1.21、3.19±1.01、1.93±0.92。經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析,桃花止瀉顆粒高劑量治療組與陽性藥思密達(dá)治療組沒有差別(P＞0.05)。說明桃花止瀉顆粒具有良好的腹瀉抑制作用。見圖 1。

表1 桃花止瀉顆粒對番瀉葉引起大鼠腹瀉治療后稀便率比較(±s)

表1 桃花止瀉顆粒對番瀉葉引起大鼠腹瀉治療后稀便率比較(±s)

與對照組比較,##P＜0.01；與模型組比較,**P＜0.01；*P＜0.05。

組別 劑量/(g/k g)動(dòng)物數(shù)/只時(shí)間1～24 h 24～48 h 48～72 h 72～96 h 96～120 h 120～144 h 144～168 h對照組 — 10 0 0 0 0 0 0 0模型組 — 10 0.68±0.03##0.74±0.05##0.78±0.04##0.81±0.06##0.88±0.08##0.89±0.02## 0.93±0.05##思密達(dá)組 4 10 0.34±0.06**0.25±0.07**0.23±0.06**0.21±0.04**0.18±0.02**0.15±0.03**0.09±0.07**桃花止瀉顆粒 4 10 0.31±0.08**0.26±0.06**0.22±0.05**0.19±0.05**0.17±0.04**0.12±0.07**0.10±0.05**桃花止瀉顆粒 2 10 0.38±0.06**0.35±0.07**0.31±0.09**0.27±0.05**0.25±0.07**0.19±0.04**0.18±0.06**桃花止瀉顆粒 1 10 0.55±0.03 0.48±0.06* 0.48±0.04*0.43±0.05**0.38±0.07**0.36±0.05**0.33±0.04**

表2 各組大鼠血清 D-木糖含量、淀粉酶活性和琥珀酸脫氫酶比活性的表達(dá)(±s,n=10)

表2 各組大鼠血清 D-木糖含量、淀粉酶活性和琥珀酸脫氫酶比活性的表達(dá)(±s,n=10)

與對照組比較,##P＜0.01；與模型組比較,**P＜0.01；*P＜0.05。

組別 劑量/(g/k g)動(dòng)物數(shù)/只D-木糖含量/(m m o l/L)淀粉酶活性/(μ k a t/L)琥珀酸脫氫酶比活性/(μ k a t/L)對照組 — 10 0.8 342±0.2 351 122.57±2.56 492.3±116.5模型組 — 10 0.4 126±0.1 433## 110.87±2.11# 164.9±101.2##思密達(dá)組 4 10 0.7 883±0.1 932** 121.25±2.35* 459.6±99.8**桃花止瀉顆粒 4 10 0.7 869±0.1 846** 122.03±2.19** 468.2±123.9**桃花止瀉顆粒 2 10 0.7 128±0.2 209** 120.65±1.92* 411.6±144.9**桃花止瀉顆粒 1 10 0.6 539±0.1 923* 119.32±2.38* 401.2±112.8**

圖1 桃花止瀉顆粒對慢性腹瀉小鼠排便情況的影響

3 討 論

桃花止瀉顆粒是以東漢著名醫(yī)學(xué)家張仲景治療腹瀉名方"桃花湯"為基礎(chǔ),通過處方優(yōu)化、工藝篩選和劑型改革,結(jié)合現(xiàn)代超微粉碎技術(shù)而研制出的口服抗腹瀉藥物。該制劑主要由赤石脂、干姜、粳米等藥味組成,具有益氣健脾、澀腸止瀉之功效。臨床主要用于治療細(xì)菌、病毒引起的急慢性腹瀉及脾虛型遷延性腹瀉。

本實(shí)驗(yàn)在大鼠慢性腹瀉模型基礎(chǔ)上,通過觀察桃花止瀉顆粒對慢性腹瀉大鼠稀便率和消化吸收功能及對小鼠稀便點(diǎn)數(shù)的影響,探討其對慢性腹瀉的治療作用。D-木糖是一種戊糖,口服后經(jīng)小腸吸收,在體內(nèi)不被肝臟代謝,經(jīng)腎臟排出,故血清D-木糖含量是與小腸吸收功能成正相關(guān)的較為敏感和特異的檢測指標(biāo)[5,6]。淀粉酶活性是反映消化酶分泌情況較為敏感和特異的檢測指標(biāo)[7,8]。琥珀酸脫氫酶是細(xì)胞線粒體內(nèi)膜氧化磷酸化的標(biāo)志酶之一,其比活性可以反映細(xì)胞氧化磷酸化供能情況[9,10]。從表 1、表 2我們可看到上述指標(biāo)的變化情況,造模成功。未經(jīng)治療的模型組病變最重,桃花止瀉顆粒 4,2,1 g/k g劑量組均有不同程度的改善,其中桃花止瀉顆粒 4 g/k g劑量組作用最為明顯。實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn),大黃水煎液可誘導(dǎo)小鼠慢性腹瀉。分別給予高、中、低劑量桃花止瀉顆粒可明顯降低由于灌服大黃引起的稀便點(diǎn)數(shù)。與模型組對照,有顯著性差異。證明桃花止瀉顆粒具有良好的腹瀉抑制作用。

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