張冬 李永格 孟運蓮

動脈粥樣硬化(atheroscleros AS)是多因素參與，以內(nèi)皮損傷或功能障礙、單核細胞與內(nèi)皮黏附并侵入內(nèi)膜轉(zhuǎn)化為巨噬細胞，中膜SMC遷移至內(nèi)膜并大量增殖，脂質(zhì)沉積，泡沫細胞形成，細胞外基質(zhì)聚集為主要特征的病變。發(fā)病病因很多，近年來大量研究表明，HHcy是造成AS的獨立的危險因素，在心、腦血管疾病及外周血管硬化等疾病發(fā)病機制中起重要作用［1，2］。目前，對 AS的防治，雖然有許多方法，但多數(shù)還不夠理想。采用牛磺酸治療AS已取得了肯定的臨床療效，但作用機制不清。本研究采用Hhcy致AS模型家兔，觀察?；撬釋ζ溲?，血清TXB2、NO的影響，探討其可能的作用機制。

1 材料與方法

1.1 藥品與試劑 L-蛋氨酸購自張家港市華昌藥業(yè)有限公司，?；撬豳徸陨虾２畩W生物科技公司。Hcy試劑盒由北京九強生物技術(shù)有限公司提供，TC、TG試劑盒購自南京建成公司，NO、TXB2購自上海天呈科技有限公司。

1.2 主要儀器 TOSHIBA生產(chǎn)TBA-120FR生化分析儀，Bio-rad680酶標儀。

1.3 動物模型的建立與分組 篩選健康雄性家兔30只(由南陽醫(yī)學高等專科學校動物中心提供)，月齡3～5個月，體重在1.5～2.0 kg，以標準飼料適應(yīng)性喂養(yǎng)一周后，隨機分為3組，每組10只。對照組(NC，喂標準飼料)、蛋氨酸組(Met，喂蛋氨酸飼料:即標飼+2%蛋氨酸制成)、?；撬峤M(Tau，蛋氨酸飼料+?；撬?.3 g/(kg·d)灌服)，對照組和蛋氨酸組給予等量生理鹽水灌胃。各組動物飼料按100 g/d·只計算，分籠飼養(yǎng)，自由飲水，隔周稱重，調(diào)整給藥量，連續(xù)喂飼8周。

1.4 生化指標檢測 自兔耳緣靜脈采血2 ml，離心10 min，用循環(huán)酶法檢測血漿Hcy含量，比色法測定TG、TC含量，NO硝酸還原酶法測定，TXB2酶免法測定。

2 結(jié)果

2.1 各組家兔Hcy的含量 8周后測定各組血清Hcy含量，超過20umol/l［3］確定為Hhcy。具體結(jié)果為空白組(19.09±1.20)umol/L，模型組為(65.23 ±1.12)umol/L，牛磺酸治療組為(58.27±2.25)umol/L，模型制作成功。模型組與?；撬嶂委熃M配對比較P＞0.05，沒有明顯差異，表明?；撬釋ρ錒cy沒有明顯影響。

2.2 各組家兔血脂、NO的含量變化 見表1。

2.3 各組家兔TXB2含量 正常組TXB2含量為(134.50±29.17)ng/L，模型組為(345.33±35.27)ng/L，牛磺酸組為(162.37±32.90)ng/L。模型組與正常組比較，P＜0.01有明顯差異，說明模型組TXB2含量明顯升高;?；撬嶂委熃M與模型組比較，P＜0.01也有明顯差異，說明牛磺酸有明顯降低TXB2的作用。

表1 各組家兔血脂、NO的含量變化(±s)

表1 各組家兔血脂、NO的含量變化(±s)

與正常組比較*P＜0.05，＊＊P＜0.01;與模型組比較△P＜0.05，△△P＜0.01

組別 例數(shù) TG(mmol/L) TC(mmol/L) NO(μmol/L)10 1.06±0.09 1.57±0.12 99.33±19.41模型組 10 1.41±0.09* 1.93±0.14* 57.96±13.80*?；撬峤M 10 1.12±0.11△ 1.71±0.15△ 150.29±20.26正常組△

3 討論

?；撬崾?Taurine，a-氯基乙磺酸))是細胞內(nèi)含量最豐富的自由氯基酸，不參與蛋白質(zhì)的合成，長期被看作是含硫氨基酸代謝的無功能產(chǎn)物。近年研究發(fā)現(xiàn)［4］，牛磺酸具有維持滲透壓、穩(wěn)定細胞膜、調(diào)節(jié)細胞鈣穩(wěn)定、清除自由基、抑制脂質(zhì)過氧化等生物學效應(yīng)。HHcy還可導致大鼠血管內(nèi)皮細胞結(jié)構(gòu)受損，彈力纖維層排列紊亂、血漿ET含量增加，外源性增補?；撬嵬耆种屏薍cy誘導的上述血管病變［5］。

本研究Tau組家兔血清TXB2含量顯著低于Met組，NO含量明顯升高，而Hcy含量顯著高于NC組但與Met組比較無顯著差異。結(jié)果顯示，?；撬岵粌H抑制Hcy誘導的呼吸鏈電子漏出及氧自由基生成［6］和脂質(zhì)過氧化，拮抗Hcy引起的氧化應(yīng)激損傷;還可上調(diào)NO含量，降低TXB2水平，從而起到舒張血管，保護內(nèi)皮細胞［7］。?；撬嶙鳛镠cy的生物拮抗劑，可不通過降低血漿Hcy水平而直接拮抗Hcy引起的血管病變和氧化應(yīng)激損傷，從而發(fā)揮抗AS形成的作用。

綜上所述，高蛋氨酸飲食可誘發(fā)家兔Hhcy，Hcy升高可通過損傷血管內(nèi)皮、促進血管平滑肌增殖等機制，導致AS的發(fā)生。牛磺酸通過抑制Hcy誘導的氧化應(yīng)激和細胞增值，發(fā)揮抗AS形成的作用。更重要的是?；撬嵊傻鞍彼岽x產(chǎn)生，是Hcy的生物拮抗劑，利用這一內(nèi)源性拮抗Hcy血管損傷保護劑，可能是防治Hhcy所致心、腦血管疾病的新策略。

［1］Anderson JL，Muhlestein JB，Home BD，et al.Plasma homocysteine predicts mortality independently of traditional risk factors and C-reactive protein in patients with angio-graphically defined coronary artery disease.Circulation，2000，102:1227-1232.

［2］Gareia-Pinilla JM，Espinosa-Caliani S，Jim6nez-Navarro M ，et al.Influence of 677 C-T polymorphism of methylenetetrahydrofolate reductase on medium-term prognosis after acute coronary syndromes.Tex Heart Inst J，2007，34(2):142-147.

［3］Malinow MR，Bostom AG，Krauss RM.Homocyst(e)ine Diet and cardiova-sculardiseases.A statement for health care profession from the Nutrition Committee，American Heart Association.Circution，1999，99:178-182.

［4］石彥榮，唐朝樞.?；撬岬目缒ぜ毎D(zhuǎn)運.國外醫(yī)學﹒生理.病理科學與臨床分冊，2001，61:453-456.

［5］Chang L，Xu J，Yu F，et al Tauring protected myocardial m itiochondria in jury induced by hyperhom ocysteinem ia in rats.Amino A cids，2004，27:37-48.

［6］常林，趙晶，徐建興，等.?；撬峥雇桶腚装彼嵴T導的線粒體呼吸鏈自由基生成和同型半胱氨酸抑制線粒體?；撬徂D(zhuǎn)運體.中國病理生理雜志，2004，20:1126-1133.

［7］杜景民，卞金陵.?；撬釋用}硬化大鼠NO，AngⅡ含量和ACE活性的影響.中國老年學雜志，2006，26(2):235-237.