趙金輝,王曉巖

(1.首都醫(yī)科大學附屬北京婦產(chǎn)醫(yī)院,北京 100006;2.北京市延慶縣中心血站,北京 102100)

605份血液培養(yǎng)的細菌分布情況及耐藥結(jié)果分析

趙金輝1*,王曉巖2

(1.首都醫(yī)科大學附屬北京婦產(chǎn)醫(yī)院,北京 100006;2.北京市延慶縣中心血站,北京 102100)

*通訊作者

菌血癥、敗血癥目前仍是臨床感染性疾病加重乃至死亡的主要原因,血培養(yǎng)陽性是其確診的重要依據(jù),其陽性率的高低及藥敏試驗的準確性對臨床治療有很大影響,本文通過分析我院2006-2008年血培養(yǎng)致病菌的種類及藥物敏感率,以了解血培養(yǎng)致病菌的分布及藥敏情況,為感染性疾病的診治提供依據(jù)。

1 資料與方法

1.1 標本來源 2006年1月-2008年12月我院臨床各科室懷疑菌(敗)血癥患者的血標本605份,共培養(yǎng)出病原菌52份,占總標本數(shù)的8.6%,其中革蘭陽性菌20株,革蘭陰性菌32株。

1.2 儀器與材料 儀器為美國BACTEC9050全自動血培養(yǎng)儀,材料為含樹脂需養(yǎng)瓶和含溶血素厭氧培養(yǎng)瓶(可檢測血液中的厭氧微生物及真菌等),用美國DADE BEHRING MicroScan Walk Away40SI全自動細菌鑒定儀對陽性血培養(yǎng)標本進行菌種鑒定和藥物敏感試驗。

1.3 方法 用美國BD公司的BACTEC 9050血培養(yǎng)儀采用連續(xù)熒光法快速檢測血液及體液中細菌。采集成人肘靜脈血液10-20 ml,無菌操作分別注入含樹脂需氧瓶和含溶血素厭氧瓶,新生兒血采集5-10 ml,分別注入兒童瓶和含溶血素厭氧瓶,把標本放入儀器內(nèi),儀器每10分鐘自動檢測一次,放置5天后。如無菌生長,儀器自動報結(jié)果:陰性。如果有標本報陽性結(jié)果,立即取出陽性瓶,涂片,進行革蘭氏染色,和分離培養(yǎng)。并告知臨床主管大夫涂片結(jié)果。把菌株接種于美國 DADEMicroScanW-alyAway40SI儀器配套的復(fù)合板,進行細菌鑒定和藥敏的檢測。用標準菌株金黃色葡萄球菌ATCC25923,大腸埃希菌ATCC25922,銅綠假單胞菌ATCC27853,做質(zhì)控。對產(chǎn)超廣譜β-內(nèi)酰胺酶(ESBLs+)的菌株,確證實驗參照美國臨床實驗室標準委員會(NCCLS)2005年版藥敏實驗操作,用標準菌株大腸埃希菌ATCC35218做質(zhì)控。耐甲氧西林凝固酶陰性葡萄球菌(MRCNS)的確證實驗參照NCCLS2005年版藥敏實驗操作,用敏感菌株ATCC29213用耐藥菌株ATCC433300做質(zhì)控菌株。

2 結(jié)果

2.1 血培養(yǎng)陽性率及其細菌構(gòu)成 605份血培養(yǎng)標本中培養(yǎng)出52株病原菌,陽性率為8.6%。其中,革蘭陽性球菌20株占總數(shù)的38.5%,其中耐甲氧西林凝固酶陰性葡萄球菌(MRCNS)占很高比例。革蘭陰性桿菌32株占總數(shù)的61.5%,最常見的菌是大腸埃希菌和產(chǎn)超廣譜β-內(nèi)酰胺酶的大腸埃希菌(ESBLs+)。分布見表1。

表1 52株病原菌的分布

2.2 藥敏結(jié)果分析 陰性病原菌的比例占病原菌總數(shù)的61.5%,其中大腸埃希菌19例,對所有抗生素的耐藥性很低,特別是對亞胺培南的敏感率是100%,產(chǎn)超廣譜β-內(nèi)酰胺酶(ESBLs+)的大腸埃希菌7株,產(chǎn)超廣譜β-內(nèi)酰胺酶(ESBLs+)的肺炎克雷伯氏菌2株,占有很高比例,于國內(nèi)外文獻報道一致,是菌血癥和敗血癥感染中的主要病源菌。此菌對派拉西林/他唑巴坦、氨芐青霉素/舒巴坦、環(huán)丙沙星的耐藥率已經(jīng)超過50%,對亞胺培南的耐藥率是11.1%,耐藥性低。陽性菌所占病原菌總數(shù)的38.5%,低于其它文獻報道。其中耐甲氧西林凝固酶陰性葡萄球菌(MRCNS)在陽性菌中占很高比例,此菌對青霉素類、碳青霉烯類、頭孢菌素類、氨基糖苷類、大環(huán)內(nèi)酯類、四環(huán)素,多種抗生素多重耐藥。利福平、復(fù)方新諾明和環(huán)丙沙星耐藥率都低于30%,至今沒發(fā)現(xiàn)對萬古霉素耐藥的菌株。見表2。

表2 病原菌的耐藥率(%)

3 討論

從605份標本中共檢出52份陽性標本,其中新生兒科28例,產(chǎn)科20例,其它科 4例,由于大腸埃希菌是陰道和腸道的定植菌,也是產(chǎn)婦在生產(chǎn)過程中感染的常見菌,在生產(chǎn)的過程中更易造成新生兒的感染。所以在病源菌中占有很高的比例。陰性桿菌對各種抗生素的耐藥情況不高,最高的是三代頭孢(13%),對亞胺培南的耐藥率是0%。產(chǎn)超廣譜β-內(nèi)酰胺酶(ESBLs+)的大腸埃希菌也占有很高的比例,所以氨芐青霉素、三代頭孢、氨曲南即使體外藥敏敏感,對臨床也要報耐藥[1]。對氨芐青霉素/舒巴坦(55.5%),派拉西林/他唑巴坦(55.5%),環(huán)丙沙星(66.6%),都已經(jīng)超過 50%,亞胺培南(11.1%)。在70年代末和80年代初,頭孢三代和單環(huán)菌素等新一代抗生素在臨床大量應(yīng)用,初期對革蘭氏陰性桿菌很有效,但在1982年在英國利物浦一家醫(yī)院的新生兒病房發(fā)生了由質(zhì)粒介導(dǎo)的對頭孢他啶耐藥的產(chǎn)酸克雷伯菌株的爆發(fā)流行,從此,產(chǎn)超廣譜β-內(nèi)酰胺酶的研究受到關(guān)注。大量文獻報道我國是以CTX-M型流行為主,這可能與我國大量生產(chǎn)和使用頭孢噻肟類抗生素有關(guān)[1]。我院用三代頭孢作為常規(guī)用藥,也是造成產(chǎn)酶菌株升高的原因,它是由質(zhì)粒介導(dǎo)的能水解第三代頭孢菌素和氨曲南,其耐藥基因可通過結(jié)合轉(zhuǎn)化和轉(zhuǎn)導(dǎo)等形式在細菌間擴散易造成醫(yī)院感染的暴發(fā)流行。凝固酶陰性葡萄球菌的檢出率高于金黃色葡萄球菌與國內(nèi)報道一致[2],凝固酶陰性葡萄球菌作為條件致病菌以前認為是共棲于皮膚黏膜的非致病菌,但近年來報道由凝固酶陰性葡萄球菌引起的感染逐年增多,特別是靜脈導(dǎo)管等醫(yī)用植入裝置的使用,使此菌成為具有重要意義的醫(yī)院感染菌[3]。革蘭陽性球菌(不包括MRCNS)的耐藥率:青霉素(66.6%)、氨芐青霉素(66.6%)、苯唑西林(33.3%)、紅霉素(40%)、克林霉素(33.3%)、頭孢唑啉(66.6%)、耐藥率超過50%,萬古霉素(0%)。耐甲氧西林凝固酶陰性葡萄球菌(MRCNS)的耐藥率:此菌對青霉素類、碳青霉烯類、頭孢菌素類、氨基糖苷類、大環(huán)內(nèi)酯類、四環(huán)素,多種抗生素多重耐藥。復(fù)方新諾明(25%)、環(huán)丙沙星(25%)、氯霉素(25%)、萬古霉素(0%)、利福平(25%)。分析我院兩年的血培養(yǎng)陽性菌的藥敏情況凝固酶陰性葡萄球菌對多種抗生素耐藥性高,特別是青霉素類的和頭孢菌素類的。陰性桿菌(不包括產(chǎn)超廣譜β-內(nèi)酰胺酶的陰性桿菌)對抗生素耐藥性低。主要應(yīng)該減少產(chǎn)超廣譜β-內(nèi)酰胺酶(ESBLs+)和耐甲氧西林凝固酶陰性葡萄球菌(MRCNS)的產(chǎn)生。我院現(xiàn)在存在抗生素使用不規(guī)范,劑量大等問題,也是耐藥菌株升高的主要原因。建議醫(yī)院建立細菌流行病學和藥敏資料的跟蹤機制,根據(jù)我院婦產(chǎn)專科的特點,建立本院的抗感染藥物應(yīng)用指南,在致病菌尚未明確或病情危重時根據(jù)上述資料進行經(jīng)驗性的治療,待病原菌明確后在依藥敏結(jié)果合理選用感染藥物[4]。所以快速、準確的血培養(yǎng)結(jié)果對臨床大夫正確選用合理的抗生素起到非常重要的作用,可以減少耐藥菌株的產(chǎn)生,使病人得到快速、合理治療,減少病人痛苦,降低病人費用。

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