石楓,苗磊

(菏澤醫(yī)學(xué)?？茖W(xué)校,山東 菏澤 274030)

AE1/AE3在乳腺癌患者腋窩淋巴結(jié)微轉(zhuǎn)移檢測(cè)中的意義

石楓,苗磊

(菏澤醫(yī)學(xué)?？茖W(xué)校,山東 菏澤 274030)

目的探討廣譜細(xì)胞角蛋白免疫組織化學(xué)染色法檢測(cè)乳腺癌患者腋窩淋巴結(jié)微轉(zhuǎn)移的可行性以及乳腺癌患者腋窩淋巴結(jié)微轉(zhuǎn)移與臨床病理因素的關(guān)系及其意義。方法利用AE1/AE3免疫組織化學(xué)染色法對(duì)常規(guī)病理檢查腋窩淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移陰性的50例乳腺癌患者的617枚腋窩淋巴結(jié)進(jìn)行微轉(zhuǎn)移檢測(cè)并進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。結(jié)果50例患者中有11例有微轉(zhuǎn)移,微轉(zhuǎn)移與腫瘤大小、CerbB-2表達(dá)水平、病理分期正相關(guān)(P＜0.05)。結(jié)論應(yīng)用AE1/AE3免疫組織化學(xué)法檢測(cè)腋窩淋巴結(jié)微轉(zhuǎn)移是可行的,對(duì)指導(dǎo)治療、判斷預(yù)后具有積極的臨床意義。

乳腺癌/診斷;腋窩淋巴結(jié)/病因?qū)W;微轉(zhuǎn)移

微轉(zhuǎn)移(micrometastases)是指直徑＜2.0mm的腫瘤轉(zhuǎn)移病灶[1],包括單個(gè)腫瘤細(xì)胞或成簇腫瘤細(xì)胞等[2]。區(qū)域淋巴結(jié)的微轉(zhuǎn)移是影響乳腺癌患者預(yù)后的重要指標(biāo),腋窩陰性患者的淋巴結(jié)微轉(zhuǎn)移的檢測(cè)能使腋窩淋巴結(jié)陰性乳腺癌變?yōu)橐父C淋巴結(jié)微轉(zhuǎn)移乳腺癌,其預(yù)后與腋窩淋巴結(jié)陰性乳腺癌是有差異的[3]。AE1/AE3主要表達(dá)于上皮細(xì)胞,具有高度的細(xì)胞特異性和組織特異性,常作為診斷上皮性腫瘤轉(zhuǎn)移的分子標(biāo)記物。本研究采用HE染色、細(xì)胞角蛋白(AE1/AE3)免疫組化聯(lián)合檢測(cè)了50例腋窩淋巴結(jié)常規(guī)病理檢查陰性患者的617枚腋窩淋巴結(jié)的微轉(zhuǎn)移狀態(tài),分析其與患者臨床病理參數(shù)的關(guān)系,以探討AE1/AE3在乳腺癌患者腋窩淋巴結(jié)微轉(zhuǎn)移檢測(cè)的臨床意義。

1 材料與方法

1.1 研究對(duì)象 選取2007～2009年間行乳癌改良根治術(shù)的常規(guī)病理檢查淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移陰性的50例乳癌患者,全部為女性,年齡35～75歲,收集病例的臨床病理學(xué)資料,包括年齡、絕經(jīng)狀態(tài)、腫瘤部位、腫瘤大小、分期、腫瘤 ER、PR、cerbB-2狀態(tài),建立臨床資料數(shù)據(jù)庫(kù)。其中年齡小于50歲22例,大于等于50歲28例;月經(jīng)狀態(tài):絕經(jīng)前20例,絕經(jīng)后30例;腫瘤部位:內(nèi)側(cè)區(qū)11例,中央?yún)^(qū)14例,外側(cè)區(qū)25例;腫瘤大小:腫瘤直徑小于等于2cm 6例,大于2cm而且小于等于 5cm 26例,大于5cm 18例;病理分期:0、Ⅰ和Ⅱ期36例,Ⅲ期以上14例;雌激素受體(ER)表達(dá)狀態(tài):ER陰性24例,陽(yáng)性26例;孕激素受體(PR)表達(dá)狀態(tài):PR陰性17例,陽(yáng)性33例;CerbB-2表達(dá)水平:CerbB-2低表達(dá)39例,CerbB-2高表達(dá)11例;共收集50例乳癌患者的617枚腋窩淋巴結(jié),標(biāo)本均經(jīng)福爾馬林固定,石蠟包埋,每個(gè)蠟塊間隔4μ m 厚度連續(xù)切2次,共2張切片,分別做常規(guī)HE染色,AE1/AE3免疫組織化學(xué)染色。

1.2 試劑與方法 AE1/AE3鼠抗人單克隆抗體和檢測(cè)試劑盒均購(gòu)自福州邁新生物技術(shù)開(kāi)發(fā)有限公司。染色步驟按照試劑盒說(shuō)明書進(jìn)行。DAB顯色,每批染色用乳腺癌組織切片作為陽(yáng)性對(duì)照,以PBS代替第一抗體作為陰性對(duì)照。采用雙盲法閱片,參照陰性和陽(yáng)性對(duì)照,AE1/AE3染色以細(xì)胞質(zhì)出現(xiàn)黃色顆粒判定為陽(yáng)性。

1.3 微轉(zhuǎn)移陽(yáng)性的判斷標(biāo)準(zhǔn) 癌巢≤2mm,并且AE1/AE3免疫組織化學(xué)染色陽(yáng)性,有惡性細(xì)胞表象并結(jié)合組織細(xì)胞的結(jié)構(gòu)和形態(tài)特點(diǎn),得到常規(guī)HE染色的證實(shí)者確診為“微轉(zhuǎn)移”[1,3]。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 應(yīng)用SPSS 13.0統(tǒng)計(jì)軟件包,采用χ2檢驗(yàn)來(lái)比較數(shù)據(jù)的陽(yáng)性率,條件不滿足者用精確概率法檢驗(yàn)。

2 結(jié)果

2.1 腋窩淋巴結(jié)微轉(zhuǎn)移檢測(cè)結(jié)果 617枚腋窩淋巴結(jié)中共發(fā)現(xiàn)11例28枚淋巴結(jié)發(fā)生微轉(zhuǎn)移,其中8例23枚淋巴結(jié)中的微轉(zhuǎn)移0.2mm＜φ＜2mm,3例5枚淋巴結(jié)發(fā)生多個(gè)癌細(xì)胞微轉(zhuǎn)移φ≤0.2mm,位置以邊緣竇為主。

2.2 腋窩淋巴結(jié)微轉(zhuǎn)移與乳腺癌患者臨床病理特征的關(guān)系檢測(cè)發(fā)現(xiàn)年齡小于50歲的患者中發(fā)生5例微轉(zhuǎn)移,大于等于50歲的患者中發(fā)生6例微轉(zhuǎn)移;絕經(jīng)前的患者中發(fā)生4例微轉(zhuǎn)移,絕經(jīng)后的患者中發(fā)生7例微轉(zhuǎn)移;腫瘤位于內(nèi)側(cè)區(qū)和位于中央?yún)^(qū)的患者中均發(fā)生2例微轉(zhuǎn)移,位于外側(cè)區(qū)的患者中發(fā)生7例微轉(zhuǎn)移;腫瘤大于2厘米而且小于等于5厘米的患者中發(fā)生3例微轉(zhuǎn)移,大于5厘米的患者中發(fā)生8例微轉(zhuǎn)移;0、Ⅰ和Ⅱ期的患者中發(fā)生4例微轉(zhuǎn)移,Ⅲ期以上的患者中發(fā)生7例微轉(zhuǎn)移;ER陰性的患者中發(fā)生4例微轉(zhuǎn)移,陽(yáng)性的患者中發(fā)生7例微轉(zhuǎn)移;PR陰性的患者中發(fā)生2例微轉(zhuǎn)移,陽(yáng)性的患者中發(fā)生9例微轉(zhuǎn)移;CerbB-2低表達(dá)的患者中發(fā)生6例微轉(zhuǎn)移,CerbB-2高表達(dá)的患者中發(fā)生5例微轉(zhuǎn)移;對(duì)50例腋窩淋巴結(jié)陰性患者的8個(gè)臨床病理因素進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析,腋窩淋巴結(jié)的微轉(zhuǎn)移與三個(gè)因素密切相關(guān):腫瘤大小(P＜0.05)、病理分期(P＜0.05以及CerbB-2表達(dá)水平(P＜0.05)。

3 討論

3.1 腋窩淋巴結(jié)微轉(zhuǎn)移的檢測(cè)方法和意義Noguehi等[4]對(duì)常規(guī)病理學(xué)檢查陰性的淋巴結(jié)進(jìn)行檢測(cè)后發(fā)現(xiàn)5%～10%的淋巴結(jié)發(fā)生微轉(zhuǎn)移,本研究利用AE1/AE3免疫組織化學(xué)染色檢測(cè)法發(fā)現(xiàn)22.00%(11/50)的患者發(fā)生腋窩淋巴結(jié)微轉(zhuǎn)移,617枚常規(guī)病理學(xué)檢查陰性的腋窩淋巴結(jié)中發(fā)現(xiàn)28枚發(fā)生微轉(zhuǎn)移,淋巴結(jié)微轉(zhuǎn)移率為4.54%。有作者發(fā)現(xiàn)免疫系統(tǒng)會(huì)將大部分循環(huán)系統(tǒng)中轉(zhuǎn)移的腫瘤細(xì)胞殺死,但還有一些可以逃過(guò)免疫系統(tǒng)的監(jiān)視而發(fā)生轉(zhuǎn)移[5],有些常規(guī)病檢陰性的患者出現(xiàn)復(fù)發(fā)、轉(zhuǎn)移,這可能是因?yàn)槌霈F(xiàn)了早期的微轉(zhuǎn)移引起的。Kuijt[6]通過(guò)對(duì)腋窩淋巴結(jié)發(fā)生轉(zhuǎn)移或微轉(zhuǎn)移的患者進(jìn)行25年隨訪后發(fā)現(xiàn):轉(zhuǎn)移灶＜2mm的患者的生存率較低。以上研究表明腋窩淋巴結(jié)發(fā)生微轉(zhuǎn)移對(duì)生存率是起著潛在影響的,主要原因是腋窩淋巴結(jié)中微轉(zhuǎn)移灶的存在。由于區(qū)域淋巴結(jié)的微轉(zhuǎn)移也是影響乳腺癌患者預(yù)后的重要指標(biāo),腋窩陰性患者的淋巴結(jié)微轉(zhuǎn)移的檢測(cè)能使腋窩淋巴結(jié)陰性乳腺癌變?yōu)橐父C淋巴結(jié)微轉(zhuǎn)移乳腺癌,其預(yù)后與腋窩淋巴結(jié)陰性乳腺癌是有差異的[7]。腋窩淋巴結(jié)微轉(zhuǎn)移的檢測(cè)可以使我們?nèi)嬲J(rèn)識(shí)腋窩淋巴結(jié)的轉(zhuǎn)移狀態(tài),早期準(zhǔn)確地診斷淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移對(duì)患者的治療及預(yù)后的評(píng)估具有重要的意義。

3.2 腋窩淋巴結(jié)的微轉(zhuǎn)移相關(guān)因素 有作者發(fā)現(xiàn)腋窩淋巴結(jié)的轉(zhuǎn)移情況與原發(fā)腫瘤的大小相關(guān)[9],隨著乳腺腫瘤的增大,淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的危險(xiǎn)性增加[8]。本研究發(fā)現(xiàn)腋窩淋巴結(jié)發(fā)生微轉(zhuǎn)移的陽(yáng)性率與原發(fā)腫瘤的大小有相關(guān)性,隨著乳腺腫瘤的增大,腋窩淋巴結(jié)發(fā)生微轉(zhuǎn)移的陽(yáng)性率增加。有作者報(bào)道:病理分期是影響乳腺癌患者腋窩淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移和轉(zhuǎn)移數(shù)量的重要因素[9],本研究也發(fā)現(xiàn)病理分期為Ⅲ期以上的組中的微轉(zhuǎn)移的陽(yáng)性率較高。CerbB-2又稱HER-2基因,為185kD的跨膜蛋白,具有酪氨酸酶活性,是表皮生長(zhǎng)因子受體(EGFR)家族成員之一。相關(guān)研究表明CerbB-2在乳腺癌的發(fā)生、發(fā)展中發(fā)揮作用,對(duì)判斷腫瘤的預(yù)后及指導(dǎo)內(nèi)分泌治療有重要的臨床意義[10]。本研究發(fā)現(xiàn)CerbB-2的表達(dá)水平越高腋窩淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的危險(xiǎn)越大,這與胡江輝等的報(bào)道[11]一致,這可能與CerbB-2基因能并促進(jìn)癌細(xì)胞擴(kuò)散、轉(zhuǎn)移,從而導(dǎo)致癌細(xì)胞浸潤(rùn)和轉(zhuǎn)移有關(guān)[12]。以上研究結(jié)果提示:腋窩淋巴結(jié)的微轉(zhuǎn)移與腫瘤的大小、CerbB-2表達(dá)水平、病理分期相關(guān)。因此,在臨床上若乳腺癌患者腫瘤較大、病理分期較晚,CerbB-2表達(dá)水平較高,即使常規(guī)病理檢查沒(méi)有發(fā)現(xiàn)腋窩淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移,也應(yīng)考慮有腋窩淋巴結(jié)的微轉(zhuǎn)移的可能,可以使用AE1/AE3免疫組織化學(xué)染色檢測(cè)法來(lái)檢測(cè)腋窩淋巴結(jié)微轉(zhuǎn)移的轉(zhuǎn)移狀態(tài)。

早期發(fā)現(xiàn)淋巴結(jié)微轉(zhuǎn)移可以為我們提供更加精確的病理分期信息,這對(duì)制定合理的個(gè)體化治療方案、降低復(fù)發(fā)及轉(zhuǎn)移、提高患者的生存率是很有幫助的。

[1]Leong AS.The prognostic dilemma of nodal micrometastases in breast carcinoma[J].Gan To Kagaku Ryoho,2000,27(Suppl2):315-320.

[2]den Bakker MA,van Weeszenberg A,de Kanter AY.Non-sentinel lymph node involvement in patients with breast cancer and sentinel node micrometastasis;too early to abandon axillary clearance[J].J.Clin,Pathol.2002,55(12):932-935.

[3]中國(guó)抗癌協(xié)會(huì)乳腺癌專業(yè)委員會(huì).中國(guó)抗癌協(xié)會(huì)乳腺癌診治指南與規(guī)范(2007版)[J].中國(guó)癌癥雜志,2007,17(5):410-428.

[4]Noguchi M.Avoidance of axillary lymph node dissection in selected patients with node-positive breast cancer[J].Eur J Surg Oncol,2008,34(2):129-134.

[5]Vessella RL,Pantel K,Mohla S.Tumor cell dormancy:an NCI workshop report[J].Cancer Biol Ther,2007,6(9):1496-1504.

[6]Kuijt GP,Voogd AC,van de Poll-Franse LV,et al.The prognostic significance of axillary lymph-node micrometastases in breast cancer patients[J].Eur J Surg Oncol,2005,31(5):500-505.

[7]王曉亮,毛瓊兒,蔣友華.122例N0N1浸潤(rùn)性非特殊型乳腺癌的Ⅲ級(jí)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移預(yù)測(cè)分析[J].外科理論與實(shí)踐,2004,9(2):110-112.

[8]申鄭堂,羅沙陽(yáng),王守滿,等.乳腺癌哨兵淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移與腫瘤大小和癌基因及激素受體表達(dá)關(guān)系的臨床觀察[J].中國(guó)普通外科雜志,2006,15(10):728-731.

[9]李占文,李振平,胡云鏘,等.176例Ⅱ、Ⅲ期乳腺癌腋淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移臨床病理相關(guān)因素分析[J].臨床外科雜志,2005,13(5):282-284.

[10]Demonty G,Bernard-Marty C,Puglisi F,et al.Progress and new standards of care in the management of HER-2positive breast cancer[J].Eur J Cancer,2007,43(3):497-509.

[11]胡江輝,趙文健,謝開(kāi)紅,等.乳腺癌激素受體、Cerb-B、P53、nm23基因的表達(dá)及與臨床病理特征的關(guān)系[J].實(shí)用醫(yī)技雜志,2007,14(19):2531-2533.

[12]Sharifah NA,Lee BR,Clarence-Ko CH,et al.CerbB-2onco-protein expression in breast cancer:relationship to tumourcharacteristics and short-term survival in Universiti Kebansaan Malaysia Medical Centre[J].Asian Pac J Cancer Prev,2008,9(4):663-670.

R737.9;322.2+9

A

1008-4118(2010)02-0024-03

10.3969/j.issn.1008-4118.2010.02.11

2010-04-17