劉惠玲， 馮玉靜， 陳定雙， 王定勇*

（1.廣東省中醫(yī)院藥學部，廣東廣州510120；2.廣東藥學院藥科學院，廣東廣州 510006）

南蛇藤根皮的化學成分研究

劉惠玲1， 馮玉靜2， 陳定雙1， 王定勇2*

（1.廣東省中醫(yī)院藥學部，廣東廣州510120；2.廣東藥學院藥科學院，廣東廣州 510006）

南蛇藤；化學成分；扁蒴藤素

目的：對衛(wèi)矛科南蛇藤屬植物南蛇藤的根皮進行化學成分研究。方法：用乙醇冷浸提取南蛇藤根，得到的萃取物減壓回收，得到的干浸膏分別用石油醚和乙酸乙酯萃取。兩萃取物再采用色譜法進行分離，波譜法鑒定結(jié)構(gòu)。結(jié)果：從該植物中共分離鑒定出7個化合物，從石油醚萃取物中得到5個化合物分別是12-羥基-8，11，13-松香烷三烯-7-酮（1）、扁蒴藤素（2）、β-谷甾醇（3）、雷公藤紅素（4）、大子五層龍酸（5）；從乙酸乙酯萃取物得到2個化合物，分別為苯甲酸（6）、胡蘿卜苷（7）。結(jié)論：化合物1、5均為首次從該植物中分離得到。

南蛇藤（Celastrus orbiculatus Thunb.），又名過山風、降龍草等，衛(wèi)矛科南蛇藤屬植物，為藤狀灌木。該植物生于山谷溪邊灌叢或林邊，在我國分布廣泛，除青海和新疆未見記載外，其他地區(qū)均有分布。全草均可入藥，有清熱、除濕、活血、消腫等功效，常用于治療風濕性關(guān)節(jié)炎、腰腿痛、筋骨痛、牙痛、閉經(jīng)、痢疾、跌打損傷、腸風痔漏、毒蛇咬傷、瘡瘍、癰癤等癥［1］。

自1949年首次從南蛇藤葉中提取分離到黃酮苷類化合物以來，又陸續(xù)從其種子、根皮、葉及地上部分分離到多種成分，主要有β-二氫沉香呋喃倍半萜多醇酯和生物堿，此外還有三萜類、黃酮類、有機酸類、多元醇類、甾體類及鞣質(zhì)［1］。為開發(fā)此種植物資源和比較不同產(chǎn)地南蛇藤化學成分的差異性，我們對采自廣東省陽春市的南蛇藤的化學成分進行初步研究，從該植物的乙醇提取物中分離鑒定出7種化合物，分別是12-羥基-8，11，13-松香烷三烯-7-酮（1）、扁蒴藤素（2）、β-谷甾醇（3）、雷公藤紅素（4）、大子五層龍酸（5）、苯甲酸（6）、胡蘿卜苷（7）。化學結(jié)構(gòu)式見圖1，化合物1、5為首次從該植物中分離得到。

1 植物來源及儀器

圖1 化合物1～7的結(jié)構(gòu)

南蛇藤根皮于2007年10月采自廣東陽春市，由廣東藥學院中藥學院李書淵教授鑒定為南蛇藤（Celastrus orbiculatus Thunb.）的根皮。

X-6顯微熔點測定儀（北京泰克儀器有限公司，溫度未校正；紅外光譜用Nicolet PROTéGé460光譜儀（美國尼高力公司產(chǎn)品）測定，KBr壓片；核磁共振用Bruker AM-500或400型核磁共振儀（瑞士布魯克公司產(chǎn)品）測定，TMS為內(nèi)標；ESIMS在 HP—1100 LC/MS（美國惠普公司產(chǎn)品）上測定。柱色譜用及薄層色譜用硅膠為青島海洋化工廠生產(chǎn)。予華SHZ-D（Ⅲ）循環(huán)水式真空泵（鞏義市英峪予華儀器廠）；DHW－420三用電熱恒溫水箱（北京國華醫(yī)療器械廠）；DHG－9145A型電熱恒溫鼓風干燥箱（上海一恒科技有限公司）；SB－5200超聲波清洗機（上海新芝生物技術(shù)研究所）；RE－52C旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器（鞏義市英峪予華儀器廠）；AY 220 SHIMADZU（島津托盤電子分析天平）。

2 提取與分離

取干燥的南蛇藤根皮268.5 g，分別用10、8倍量的70%乙醇冷浸提取兩次，每次8 d，合并濾液并減壓濃縮回收乙醇至無醇味，濃縮至約100 mL左右，加少量甲醇，依次用石油醚、乙酸乙酯萃取，分別得到石油醚（15 g）、乙酸乙酯（27 g）的萃取物，將各部位低溫減壓濃縮、回收溶劑至浸膏狀。

石油醚部位（15 g），經(jīng)硅膠柱層析（100～200目），用石油醚/乙酸乙酯梯度洗脫，同時配合重結(jié)晶和制備薄層層析技術(shù)，分別獲得化合物1～5。

乙酸乙酯部位（27 g）經(jīng)硅膠柱層析（100～200目），用石油醚/乙酸乙酯梯度洗脫，分別獲得化合物 6、7。

3 結(jié)構(gòu)鑒定

化合物1 白色針晶（石油醚-乙酸乙酯），mp 278～280 ℃，ESI-MS（+）m/z 323［M+Na］+，623 ［2M+Na］+，1H-NMR（400 MHz，CDCl3）：δ 7.91（1H，s，H-14），6.70（1H，s，H-11），5.62（1H，s，-OH），3.15（1H，m，H-15），2.55 ～2.72（2H，m，H-5，6a），2.20（1H，d，J=12.4 Hz，H-6b），1.47～1.87（6H，m，H-1，2，3），1.25（3H，d，J=7.6 Hz，H-16），1.27（3H，d，J=7.6 Hz，H-17），1.21（3H，s，H-20），0.92（3H，s，H-18），0.98（3H，s，H-19）?；衔?的氫譜數(shù)據(jù)與12-羥基-8，11，13-松香烷三烯-7-酮（sugiol）基本一致［2］。

化合物2 橙紅色針狀結(jié)晶（石油醚-乙酸乙酯），mp 219 ～ 220 ℃，IR νmaxKBr cm－1：3 350，2 940，1 725，1 650，1 590，1 520，1 435，1 375，1 300，1 245，1 220，1 205，1 185，1 155，1 145，1 095，1 085，990，870，860，850。ESI-MS（+）：487 ［M+Na］+，465［M+H］+。1H-NMR（500 MHz，CDCl3）：δ 7.02（1H，d，J=7.1 Hz，H-6），6.52（1H，s，H-1），6.34（1H，d，J=7.1 Hz，H-7），6.96（1H，brs，-OH），3.52（3H，s，H-31），2.23（3H，s，H-23），1.45（3H，s，H-25），1.25（3H，s，H-26），1.17（3H，s，H-30），1.08（3H，s，H-28），0.52（3H，s，H-27）。13C-NMR（125 MHz，CDCl3）：δ 119.5（C-1），178.2（C-2），146.0（C-3），117.2（C-4），127.4（C-5），134.2（C-6），118.1（C-7），170.3（C-8），43.0（C-9），164.8（C-10），33.5（C-11），29.6（C-12），39.4（C-13），45.0（C-14），28.6（C-15），36.4（C-16），30.5（C-17），44.3（C-18），30.9（C-19），40.4（C-20），29.9（C-21），34.8（C-22），10.2（C-23），38.2（C-25），21.6（C-26），18.3（C-27），31.6（C-28），178.7（C-29），32.7（C-30），51.5（C-31）?；衔?的波譜數(shù)據(jù)與扁蒴藤素（pristimerin）的波譜數(shù)據(jù)［1，3］基本一致。

化合物3 白色晶體，mp 137～138℃，在紫外燈下（254 nm）不顯色，硫酸顯色為紅色，多種溶劑系統(tǒng)TLC的Rf值與β-谷甾醇標準品一致，鑒定為β-谷甾醇。

化合物4 紅色晶體，mp 200～202℃，ESI-MS（+）m/z 473［M+Na］+，451［M+H］+，1H-NMR（500 MHz，CDCl3）：δ 7.06（1H，dd，J=7.0，1.0 Hz，H-6），6.49（1H，d，J=1.0 Hz，H-1），6.32（1H，d，J=7.0 Hz，H-7），2.20（3H，s，H-23），1.42（3H，s，H-25），1.27（3H，s，H-26），1.26（3H，s，H-30），1.08（3H，s，H-28），0.57（3H，s，H-27）。13C-NMR（125 MHz，CDCl3）δ：120.5（C-1），178.3（C-2），120.3（C-3），127.5（C-4），147.0（C-5），135.3（C-6），118.2（C-7），165.0（C-8），39.9（C-9），172.6（C-10），28.7（C-11），29.3（C-12），39.3（C-13），43.0（C-14），29.5（C-15），32.4（C-16），45.3（C-17），44.3（C-18），33.8（C-19），31.1（C-20），34.4（C-21），36.3（C-22），10.5（C-23），38.4（C-25），21.5（C-26），18.7（C-27），31.5（C-28），182.5（C-29），30.7（C-30）?；衔?的波譜數(shù)據(jù)與雷公藤紅素（celastrol）［1，4］的波譜數(shù)據(jù)基本一致。

化合物5 無色針晶（甲醇），mp 328～330℃，ESI-MS（+）m/z 495［M+Na］+，511［M+K］+，1H-NMR（400 MHz，CDCl3）：δ 1.10（3H，s）、1.04（3H，s）、0.90（3H，s）、0.89（3H，s）、0.82（3H，s），0.80（3H，d，J=4.8 Hz，H-23），12.06（1H，s，COOH）、5.61（1H，s，3-OH），3.93（1H，d，J=8.0 Hz，H-24a）、3.40（1H，d，J=8.0 Hz，H-24b）。13CNMR（100 MHz，CDCl3）：δ20.3（C-1），38.9（C-2），106.2（C-3），53.9（C-4），47.5（C-5），34.3（C-6），19.5（C-7），50.6（C-8），37.9（C-9），57.6（C-10），34.8（C-11），29.9（C-12），39.8（C-13），39.5（C-14），29.8（C-15），36.5（C-16），30.7（C-17），44.8（C-18），30.8（C-19），40.9（C-20），30.5（C-21），37.6（C-22），8.6（C-23），73.2（C-24），17.1（C-25），16.8（C-26），18.3（C-27），32.3（C-28），181.6（C-29），31.6（C-30）?；衔?的波譜數(shù)據(jù)與大子五層龍酸［5］基本一致。

化合物6 無色片狀結(jié)晶，mp 122～123℃。多種溶劑系統(tǒng)TLC的Rf值與標準品苯甲酸一致，混合熔點不下降，因此鑒定為苯甲酸。

化合物7 白色粉末，在紫外燈下（254 nm）不顯色，mp 273～275℃。多種溶劑系統(tǒng)TLC的Rf值與標準品胡蘿卜苷一致，混合熔點不下降，因此鑒定為胡蘿卜苷。

4 結(jié)果與討論

4.1 醌甲基三萜類化合物是一類具有特征的紅色或橙紅色結(jié)晶的化合物，主要存在于衛(wèi)矛科（Celastraceae）和希藤科（Hippocrateaceae）植物中，且具有廣泛的藥理活性，如抗腫瘤、抗微生物、抗氧化、細胞毒性和抗瘧疾活性等［6］。本論文中分離得到的扁蒴藤素和雷公藤紅素即是兩種醌甲基三萜類化合物，具有抗腫瘤、抗氧化、抗炎等多種活性，并且分別在2006年［7］和2008年［8］被證實可通過抑制蛋白酶體活性而發(fā)揮抗腫瘤作用，是新型的蛋白酶體抑制劑，成為目前抗腫瘤研究中的熱點之一。

4.2 現(xiàn)代藥理學實驗表明，南蛇藤具有抗腫瘤、抗炎、抗AIDS、抗生育、昆蟲拒食及毒殺等多種活性。本論文中分離得到的化合物也多具有多種藥理活性，兩個醌甲基三萜類化合物如4.2項下所討論，其他分離得到的化合物分別具有如下活性：化合物1具有抗炎活性［9］，化合物 5 具有抗 AIDS活性［10］。另外，南蛇藤素還被證實可抑制豚鼠體外精子的受精能力，發(fā)揮抗生育作用［11］。昆蟲拒食及毒殺活性主要由β-二氫沉香呋喃倍半萜類化合物體現(xiàn)出來，本論文中未分離得到該類化合物，可能與藥材產(chǎn)地不同有關(guān)系。

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Chemical constituents of the bark of Celastrus orbiculatus

LIU Hui-ling1， FENG Yu-jing2， CHEN Ding-shuang1， WANG Ding-yong2*

（1.Department of Pharmacy，Guangdong Provincial Hospital of TCM，Guangzhou 510120，Guangdong，China；2.College of Pharmacy，Guangdong Pharmaceutical University，Guangzhou 510006，Guangdong，China）

Celastrus orbiculatus Thunb.；chemical constituents；pristimerin

AIM：To study the chemical constitutes of Celastrus orbiculatus Thunb.METHODS：Root of celastmus orbiculatus was macerated with cool ethanol to obtain the extract under the vaccum drying processing，extract obtained was extracted respectively by petroleum ester and ethyl acetate.Final extracts were purified by Silicagel column and analyzed by UV，IR，Ms and NMR to identify the chemical structural formula.RESULTS：Seven compounds were isolated from Celastrus orbiculatus Thunb，from which five constituents came from petroleum ester extract，and identified as sugiol（1），pristimerin（2），β-sitosterol（3），celastrol（4），from which two constituents came from ethyl acetate extract，salapermic acid（5），benzoic acid（6）and daucosterol（7），respectively.CONCLUSION：Compounds 1，5 were obtained from the plant for the first time.

R284.1

A

1001-1528（2010）07-1169-04

2009-10-16

劉惠玲（1978－），女，中藥師，主要從事醫(yī)院藥學研究。Tel：13533398857 E-mail：hlingliu@163.com

*通訊作者：王定勇（1967－），男，博士，教授，主要從事天然藥物研究與新藥研發(fā)。Tel：13112243919 E-mail：wdingyong@163.com