蘇州大學(xué) 尹曉靜 葉元土* 蔡春芳 代小芳 邱 燕 張 俊

碳水化合物是水產(chǎn)飼料三大能源中最廉價(jià)的飼料能源，適當(dāng)提高飼料中碳水化合物水平可以提高蛋白質(zhì)的利用率，節(jié)約飼料蛋白質(zhì)和脂肪（李愛杰，1996）。但魚類對(duì)飼料碳水化合物的利用能力有限，長(zhǎng)期攝入高碳水化合物飼料會(huì)導(dǎo)致魚體血糖過高、肝糖原累積、免疫力變化、生長(zhǎng)停滯等癥狀（Kumar等，2005；Deng 等，2001；Nordrum 等，2000；Page 等，1999；Hutchins等，1998）。目前關(guān)于用試驗(yàn)飼料（含玉米、小麥或木薯）長(zhǎng)期馴養(yǎng)后的草魚餐后血糖、血脂的變化研究鮮見報(bào)道。本試驗(yàn)采用富含玉米、小麥、木薯的試驗(yàn)飼料馴養(yǎng)試驗(yàn)草魚76 d后，將試驗(yàn)魚饑餓24 h，投喂各試驗(yàn)組飼料，分別檢測(cè)攝食后不同時(shí)間點(diǎn)各試驗(yàn)組草魚血糖及血脂濃度，旨在探討玉米、小麥、木薯不同添加水平及無油水平下草魚血糖、血脂變化的不同趨勢(shì)，以研究草魚對(duì)玉米、小麥、木薯的利用情況的差異。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)魚 試驗(yàn)草魚初重（4.62±0.35）g，為江蘇宜興養(yǎng)殖場(chǎng)當(dāng)年池塘繁育魚種。草魚運(yùn)來后用3%的食鹽水浸泡消毒，經(jīng)2周暫養(yǎng)后挑選體格健壯、規(guī)格整齊的魚種隨機(jī)分養(yǎng)于24個(gè)養(yǎng)殖桶中，每桶放養(yǎng)25尾。用試驗(yàn)飼料馴養(yǎng)試驗(yàn)魚76 d后，試驗(yàn)魚平均體重達(dá)到23.72 g。

1.2 試驗(yàn)飼料 選用魚粉、豆粕、菜籽粕、棉籽粕、米糠粕等常用飼料原料，以玉米（粗蛋白質(zhì)9.91%，粗脂肪 4.19%）、小麥 （粗蛋白質(zhì)12.49%，粗脂肪 2.09%）、木薯（粗蛋白質(zhì)2.04%，粗脂肪1.02%）為主要飼料原料，設(shè)計(jì)15%玉米，30%玉米，30%玉米無油（不加豆油），15%小麥，30%小麥，30%小麥無油（不加豆油），15%木薯和20%木薯等共8種試驗(yàn)飼料。養(yǎng)殖試驗(yàn)草魚共設(shè)8個(gè)組，每組3個(gè)平行，8種飼料分別投喂8組試驗(yàn)魚。試驗(yàn)飼料組成及和常規(guī)營(yíng)養(yǎng)成分分析見表1。

飼料原料由無錫華諾威提供。所有飼料原料經(jīng)粉碎過40目篩，混合均勻，用小型顆粒飼料機(jī)加工成直徑1.5 mm的顆粒飼料，飼料置于-20℃冰箱儲(chǔ)存?zhèn)溆?。飼料制粒溫度?5～70℃，持續(xù)時(shí)間約1 min。

1.3 測(cè)定指標(biāo) 養(yǎng)殖試驗(yàn)結(jié)束時(shí)，每組選取1桶試驗(yàn)魚，共8桶，進(jìn)行試驗(yàn)。將選出的8桶試驗(yàn)魚禁食24 h，然后投喂各試驗(yàn)組飼料，在投喂前（0 h）及投喂后 1、2、3、4、8 h 和 12 h，每桶分別取3尾試驗(yàn)魚尾靜脈取血，自然凝固后，3000 r/min冷凍離心15 min，取上清液即為血清。采用CHEMIX-800全自動(dòng)生化分析儀測(cè)定血清中血糖、血脂四項(xiàng)（甘油三酯、膽固醇、高密度脂蛋白和低密度脂蛋白）含量。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同日糧對(duì)草魚幼魚血糖的影響 見表2。由表2可以得出，各試驗(yàn)組草魚血糖含量變化趨勢(shì)基本相似，均是在攝食后1 h就開始攀升，升高至最高點(diǎn)時(shí)開始下降，只是升高和下降的速度和幅度不同而已。

2.1.1 玉米、小麥和木薯組草魚血糖含量變化的比較結(jié)果 相同添加水平下的玉米、小麥、木薯組草魚血糖都是在攝食后1 h開始升高，除15%小麥、30%小麥無油組兩組在3 h達(dá)到最高水平外，其余各組均在4 h達(dá)到最高水平。相同添加水平下玉米組、木薯組血糖峰值高于小麥組。

2.1.2 不同添加水平下草魚血糖含量變化的比較結(jié)果 30%玉米組和15%玉米組血糖含量均在攝食后1 h開始攀升，4 h達(dá)到峰值，其中30%玉米組血糖峰值為18.55 mmol/L，高于15%玉米組血糖峰值（14.82 mmol/L）；30%小麥組與15%小麥組血糖含量也是在攝食后1 h開始攀升，但達(dá)到峰值的時(shí)間不同，30%小麥組4 h達(dá)到峰值，15%小麥組3 h達(dá)到峰值，且30%小麥組的峰值高于15%小麥組；木薯組的血糖變化規(guī)律與玉米組相似。玉米、小麥、木薯高水平組血糖含量達(dá)峰值后下降速度較低水平組緩慢。

2.1.3 玉米和小麥在30%無油和正常30%水平下血糖含量變化的比較結(jié)果 30%無油和正常30%水平下血糖含量變化趨勢(shì)相同，均在1 h開始升高，4 h達(dá)到峰值，然后開始下降。30%無油水平的峰值較正常30%水平稍低。

2.2 不同日糧對(duì)草魚幼魚血脂的影響 結(jié)果見表3～表6。各組草魚血脂四項(xiàng)指標(biāo)（甘油三酯、膽固醇、高密度脂蛋白和低密度脂蛋白）含量變化趨勢(shì)基本一致，均在1 h內(nèi)迅速升高至峰值，在隨后的1～2 h內(nèi)迅速降低，在2～4 h內(nèi)有回升趨勢(shì)。

2.2.1 玉米、小麥和木薯組草魚血清甘油三酯、膽固醇、高密度脂蛋白和低密度脂蛋白含量變化的比較結(jié)果 相同添加水平下的玉米、小麥、木薯組草魚血清甘油三酯、膽固醇、高密度脂蛋白和低密度脂蛋白都是在攝食后1 h升高至峰值，然后開始下降。相同添加水平下木薯組血清甘油三酯、膽固醇、高密度脂蛋白和低密度脂蛋白峰值最高，小麥組其次，玉米組最低。

表1 試驗(yàn)日糧及營(yíng)養(yǎng)水平（干物質(zhì)基礎(chǔ)）

表2 8種飼料對(duì)草魚血糖含量的影響 mmol/L

2.2.2 不同添加水平下草魚血清甘油三酯、膽固醇、高密度脂蛋白和低密度脂蛋白含量變化的比較結(jié)果 隨著玉米、小麥、木薯添加水平的提高（15%～30%、15% ～20%），各時(shí)間點(diǎn)草魚血清甘油三酯、膽固醇、高密度脂蛋白和低密度脂蛋白含量均有升高趨勢(shì)，峰值升高。

表3 8種飼料對(duì)草魚血清甘油三酯含量的影響 mmol/L

2.2.3 玉米和小麥在30%無油和正常30%水平下草魚血清甘油三酯、膽固醇、高密度脂蛋白和低密度脂蛋白含量變化的比較結(jié)果 30%無油和正常30%水平下草魚血清甘油三酯、膽固醇、高密度脂蛋白和低密度脂蛋白含量變化趨勢(shì)相同，都是在攝食后1 h升高至峰值，然后開始下降，2 h后依然有下降趨勢(shì)。與30%正常水平相比，無油組草魚血清甘油三酯、膽固醇、高密度脂蛋白和低密度脂蛋白峰值含量降低。

表4 8種飼料對(duì)草魚血清膽固醇含量的影響 mmol/L

表5 8種飼料對(duì)草魚血高密度脂蛋白含量的影響 mmol/L

表6 8種飼料對(duì)草魚血低密度脂蛋白含量的影響 mmol/L

3 討論

大量的糖耐量試驗(yàn)結(jié)果表明，幾乎所有魚類葡萄糖負(fù)荷后血糖均迅速升高且出現(xiàn)持久的高血糖（Wilson，1994）。魚類在糖耐量試驗(yàn)中表現(xiàn)出來的持久的高血糖癥狀曾一度被認(rèn)為是內(nèi)生胰島素分泌不足（Wilson 等，1987；Furuichi等，1982），但隨著放射免疫技術(shù)的發(fā)展，發(fā)現(xiàn)魚類胰島素水平相似于甚至高于哺乳類（Plisetskaya，1990），從而否定了原來的推測(cè)。在本試驗(yàn)中，給8組試驗(yàn)草魚投喂含有玉米、小麥、木薯三種原料的試驗(yàn)飼料，各組魚也同樣表現(xiàn)出持續(xù)的高血糖癥狀，且在12 h內(nèi)的血糖含量都高出禁食水平。這說明草魚吸收至體內(nèi)的糖未能被及時(shí)利用，因此，魚類對(duì)葡萄糖利用的有限性可能不是胰島素分泌絕對(duì)量不足引起，而是胰島素分泌速度跟不上魚類對(duì)糖的吸收速度，使吸收的葡萄糖不能被很好地利用。

本試驗(yàn)各組草魚血糖含量均在3～4 h時(shí)達(dá)到峰值。林小植（2006）研究表明，南方鲇攝食富含玉米淀粉飼料后血糖峰值出現(xiàn)在攝食后12 h，蔡春芳和陳立僑（2002）在異育銀鯽口服葡萄糖后血糖、血脂和肝糖原的變化的研究中，發(fā)現(xiàn)口服劑量為167 mg/100 g體重的葡萄糖時(shí)，異育銀鯽血糖峰值出現(xiàn)在3 h。飼料碳水化合物構(gòu)型不同導(dǎo)致峰值出現(xiàn)的時(shí)間也不同，這是因?yàn)榈矸鄣却蠓肿犹妓衔镄枰M(jìn)行消化降解成葡萄糖后才能進(jìn)入循環(huán)系統(tǒng)，而葡萄糖是小分子糖，可以直接被吸收，所以血糖升高的速度要快一些。但本試驗(yàn)血糖峰值出現(xiàn)的時(shí)間較早，這可能是試驗(yàn)草魚馴養(yǎng)時(shí)間較長(zhǎng)（兩個(gè)月）的原因，林小植（2006）研究發(fā)現(xiàn)在一定的飼料糖水平下，馴養(yǎng)時(shí)間延長(zhǎng)，魚體血糖峰值出現(xiàn)的時(shí)間將會(huì)提前。

本試驗(yàn)中相同的添加水平下玉米組、木薯組血糖峰值高于小麥組。玉米含無氮浸出物高達(dá)72%，其中主要是容易消化的淀粉；木薯含無氮浸出物高達(dá)79%，但木薯的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值比玉米和小麥差，且含有部分有毒物質(zhì)和生長(zhǎng)抑制因子；小麥含有較多的、對(duì)陸生動(dòng)物消化不利的非淀粉多糖，因此，與小麥相比，玉米、木薯含有更多的可消化淀粉，這也導(dǎo)致其具有更高的血糖峰值。

本試驗(yàn)中，隨著玉米、小麥、木薯添加水平的提高（15% ～30%、15% ～20%），草魚血糖峰值也增高，且高水平組血糖含量達(dá)峰值后下降速度較低水平組緩慢。這與蔡春芳和劉影（2003）用葡萄糖灌喂異育銀鯽時(shí)所出現(xiàn)的反應(yīng)相一致。但與蔡春芳和劉影（2003）的研究結(jié)果比較，本研究中的血糖峰值較低，這可能是由于淀粉屬于高分子糖類，其吸收進(jìn)入循環(huán)系統(tǒng)之前的消化吸收過程較為緩慢而漫長(zhǎng)，從而可以避免大量的葡萄糖直接進(jìn)入循環(huán)系統(tǒng)引起血糖過高，造成代謝負(fù)擔(dān)。這與譚青松（2005）對(duì)異育銀鯽的研究結(jié)果一致。

胰島素可以促進(jìn)合成代謝，刺激氨基酸和葡萄糖的吸收，降低血漿脂肪酸，促進(jìn)糖原的合成（Plisetskaya 等，1984），而胰高血糖素作用與胰島素作用相反（Plisetskaya，1989），與生長(zhǎng)抑素協(xié)同。這三種激素相互協(xié)作以調(diào)節(jié)血糖、血脂水平，保證魚類正常生理活動(dòng)。眾多的研究結(jié)果表明，魚類在禁食后口服不同劑量的碳水化合物，其血清中甘油三酯含量在口服后的短時(shí)間內(nèi)上升，隨后顯著降低至灌注前水平（蔡春芳和劉影，2003；Deng等，2001）。本試驗(yàn)血糖在1 h迅速升高，3～4 h達(dá)到峰值，血脂四項(xiàng)指標(biāo)均在攝食后1 h內(nèi)迅速升高至峰值，在隨后的1～2 h內(nèi)迅速降低，在2～4 h內(nèi)有回升趨勢(shì)。這種異常反應(yīng)與斑點(diǎn)叉尾和虹鱒相似。Ronner和Scarpa（1984）報(bào)道，斑點(diǎn)叉尾胰島D細(xì)胞對(duì)葡萄糖濃度變化比B細(xì)胞敏感，葡萄糖濃度的升高首先刺激胰島D細(xì)胞分泌生長(zhǎng)抑素，生長(zhǎng)抑素的大量分泌抑制了胰島素的分泌。Harmon等（1991）直接測(cè)定了腹腔注射葡萄糖后24 h內(nèi)虹鱒血漿中各種胰島激素的變化規(guī)律，發(fā)現(xiàn)血糖在1 h內(nèi)顯著升高，而胰島素在1 h內(nèi)顯著降低，3 h才達(dá)最高水平，生長(zhǎng)抑素也是先升高，3 h后才開始降低。這些報(bào)道支持了本試驗(yàn)結(jié)果，草魚在攝食初因?qū)Ω咛菙z入的生理不適而發(fā)生了代謝通量轉(zhuǎn)移，血漿胰高血糖素和生長(zhǎng)抑素水平較高，胰島素的分泌受到了抑制，從而分解代謝被促進(jìn)，合成代謝受抑制，故血糖、血脂水平在1 h內(nèi)均升高。胰島素水平升高后，血脂水平才開始降低（1～2 h）。蔡春芳和劉影（2003）對(duì)異育銀鯽口服不同劑量葡萄糖后的代謝反應(yīng)研究中血脂水平下降至6 h后才開始回升，本試驗(yàn)血脂水平在3～4 h即開始回升，這可能是試驗(yàn)草魚馴養(yǎng)時(shí)間較長(zhǎng)（兩個(gè)月），魚體對(duì)飼料糖適應(yīng)的表現(xiàn)。

4 結(jié)論

本試驗(yàn)條件下，結(jié)果表明：（1）草魚幼魚對(duì)玉米、小麥、木薯的利用是有限的，更適于利用低水平的玉米、小麥、木薯組飼料。（2）飼料碳水化合物一定的條件下，馴養(yǎng)時(shí)間延長(zhǎng)，魚體血糖峰值出現(xiàn)的時(shí)間將會(huì)提前。（3）草魚攝食初由于對(duì)碳水化合物攝入的生理不適而發(fā)生了代謝通量轉(zhuǎn)移，分解代謝被促進(jìn)，合成代謝受抑制。（4）草魚對(duì)木薯的利用能力不如玉米、小麥。

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