王兆伏,宋鳳瑞,劉志強,劉淑瑩

(1.中國科學院長春應用化學研究所質(zhì)譜中心,吉林長春 130022; 2.中國科學院研究生院,北京 100039)

質(zhì)譜技術(shù)在中藥小分子與生物大分子相互作用研究中的應用

王兆伏1,2,宋鳳瑞1,劉志強1,劉淑瑩1

(1.中國科學院長春應用化學研究所質(zhì)譜中心,吉林長春 130022; 2.中國科學院研究生院,北京 100039)

中藥發(fā)揮藥理作用具有多組分,多靶點的重要特點。研究中藥化學成分與生物大分子之間的相互作用不僅能夠為闡明中藥發(fā)揮藥理作用的機理和物質(zhì)基礎(chǔ)提供科學依據(jù),而且能夠為新藥設計提供理論指導。軟電離質(zhì)譜技術(shù),尤其是電噴霧質(zhì)譜(ESI-MS)和基質(zhì)輔助激光解吸電離質(zhì)譜(MALDI-MS)在一定條件下能夠使藥物與生物大分子形成的復合物完整地轉(zhuǎn)移到氣相中并被檢測到,在中藥小分子與生物大分子相互作用的研究中具有很大的優(yōu)勢。同時,色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)在中藥復雜體系與生物大分子相互作用的研究中也顯示出很大的應用潛力。本文介紹了質(zhì)譜技術(shù)在藥物與生物大分子相互作用研究中的應用原理,并總結(jié)了近年來軟電離質(zhì)譜技術(shù)在中藥小分子與生物大分子相互作用研究中的應用。

中藥小分子;生物大分子;軟電離質(zhì)譜;相互作用

中醫(yī)藥是我國幾千年來實證經(jīng)驗的積累,是我國勞動人民防治疾病的重要手段。然而,作為經(jīng)驗醫(yī)學,中藥具有與生俱來的不足,許多中藥發(fā)揮藥理作用的機理和物質(zhì)基礎(chǔ)尚不清楚。因此,闡明中藥發(fā)揮藥效作用的機理和物質(zhì)基礎(chǔ)是揭示中藥的科學內(nèi)涵,推動中藥現(xiàn)代化和創(chuàng)新藥物研究的必經(jīng)途徑[1]。

大量研究表明,中草藥與西藥發(fā)揮藥理作用在本質(zhì)上是一致的,主要途徑都是某種(或某些)藥物分子在體內(nèi)與疾病相關(guān)的生物大分子相互作用,影響和改變后者的生物學功能,進而產(chǎn)生相應的藥理效應,達到防治疾病的目的。然而,中藥成分具有多樣性和復雜性等特點,其發(fā)揮藥效往往是多個活性成分作用于不同的生物靶分子的共同結(jié)果[1-2]。因此,以生物活性為導向,研究中藥化學成分與生物大分子之間的相互作用對于闡明中藥發(fā)揮藥效作用的機理和物質(zhì)基礎(chǔ)具有重要的理論意義。同時,將與疾病相關(guān)的生物大分子作為藥物靶標,可以極大地加快新藥的開發(fā)速度,為研制中藥新藥提供一條簡捷而有效的途徑。

質(zhì)譜技術(shù)具有快速、靈敏、準確、專一等特點,已逐漸成為中藥現(xiàn)代化進程中的重要分析工具,在中藥化學成分分析、中藥質(zhì)量控制、中藥代謝產(chǎn)物鑒定和中藥藥物動力學研究等多個方面發(fā)揮著重要作用[3]。同時,軟電離質(zhì)譜由于其離子化條件溫和,在中藥小分子與生物大分子相互作用的研究中也具有很大的應用潛力。利用軟電離質(zhì)譜技術(shù)可以直接得到藥物與生物大分子相互作用的化學計量比,計算二者之間的結(jié)合強度、確定藥物的結(jié)合位點、以及獲得反應動力學等多方面的信息[4-10]。此外,質(zhì)譜還能方便地與多種色譜技術(shù)聯(lián)用,非常適用于研究復雜體系中各種化學成分與生物大分子之間的相互作用[11]。

利用質(zhì)譜技術(shù)研究藥物與生物大分子的相互作用主要有兩種策略[4]:一種是直接檢測復合物的存在,并通過復合物的相對豐度比較藥物與生物大分子的相對作用強度;另一種則是通過考察藥物濃度(或物質(zhì)的量)在加入生物大分子前后的變化來推斷藥物與生物大分子的相對作用強度。本工作總結(jié)了國內(nèi)外近年來的研究結(jié)果,綜述了軟電離質(zhì)譜技術(shù),尤其是電噴霧質(zhì)譜(ESI-MS)和基質(zhì)輔助激光解吸電離質(zhì)譜(MALDI-MS)在中藥小分子與生物大分子相互作用研究中的應用。

1 電噴霧質(zhì)譜在中藥小分子與生物大分子相互作用研究中的應用

ESI-MS電離過程非常溫和,能夠在接近天然溶液的狀態(tài)下將藥物與生物大分子形成的復合物從液相轉(zhuǎn)變?yōu)闅庀喽M行測定,非常真實地反映樣品分子在溶液中的聚集狀態(tài),是研究中藥小分子與生物大分子相互作用的理想分析工具。

1.1 中藥小分子與核酸的相互作用

核酸是許多抗病毒,抗菌,抗腫瘤藥物在體內(nèi)作用的靶點。藥物能夠通過與核酸結(jié)合改變其結(jié)構(gòu),進而干擾疾病相關(guān)基因的復制與轉(zhuǎn)錄,阻礙蛋白質(zhì)的合成,達到抗病毒、抗菌及抗腫瘤的作用。因此,研究中藥小分子與核酸之間的相互作用不僅有助于從分子水平上理解藥物的作用機制,而且可以為抗病藥物的設計提供理論指導。

Chen等[12-13]利用 ESI-MS研究了原小檗堿類生物堿與雙鏈DNA之間的相互作用,并基于小檗堿的結(jié)構(gòu)合成了一系列衍生物,其中的一些衍生物與DNA具有較強的結(jié)合力,并在體外實驗中被證實具有很強的抗腫瘤活性[14]。Dong等[15-16]研究了 5種雙β-咔啉類生物堿與雙鏈DNA之間的相互作用,結(jié)果表明藥物結(jié)構(gòu)中連接臂的長度可以影響其與DNA作用的強度,連接臂過短或過長都會削弱生物堿與DNA分子的結(jié)合能力。Bai等[17]利用 ESI-MS研究了白屈菜紅堿以及血根堿與一系列發(fā)夾結(jié)構(gòu)DNA之間的相互作用,結(jié)果表明這兩種生物堿與含有一個嘧啶突起結(jié)構(gòu)的發(fā)夾DNA分子具有較強的結(jié)合能力,且血根堿與DNA的作用力要強于白屈菜紅堿,而后者的序列選擇性則要高于前者。Guittat等[18]研究了白葉藤堿和新白葉藤堿與不同序列以及結(jié)構(gòu)的DNA之間的相互作用,結(jié)果發(fā)現(xiàn)這兩種生物堿與三鏈DNA分子的結(jié)合能力最強。Li等[19]利用 ESI-MS研究了大豆素與雙鏈DNA和四鏈DNA的作用,結(jié)果表明大豆素對四鏈DNA具有較強的結(jié)合力,實驗結(jié)果也通過光譜學方法得到了證實。近年來,本小組選取了具有抗病毒、抗腫瘤療效的中藥化學成分(包括生物堿、黃酮以及皂苷等),利用ESIMS系統(tǒng)地研究了這些中藥小分子與單鏈[20-24]、雙鏈[25-26]以及三鏈[27]DNA分子之間的相互作用,比較了不同中藥化學成分與DNA靶分子之間的相對結(jié)合強度,闡明了這些中藥成分的構(gòu)效關(guān)系。通過考察復合物的碎裂規(guī)律以及對比正、負離子電噴霧質(zhì)譜圖,推斷出小檗堿、藥根堿、巴馬汀與DNA靶分子的作用方式為嵌入結(jié)合[25]。進一步的研究表明,原小檗堿類生物堿與核酸分子中的鳥苷具有較強的結(jié)合力[21]。

此外,冷噴霧電離(coldspray ionization, CSI)作為在ESI離子源的基礎(chǔ)上改進開發(fā)出的新型軟電離技術(shù)[28],在研究藥物與生物大分子相互作用方面也具有良好的應用前景。Kuzuhara等[29]利用CSI-MS研究了綠茶提取物中的沒食子酰表沒食子兒茶素(EGCG)與單鏈DNA,單鏈RNA以及雙鏈DNA之間的相互作用,結(jié)果表明 EGCG結(jié)構(gòu)中的沒食子酰基和兒茶酚基對EGCG與核酸分子的結(jié)合都有貢獻。

1.2 中藥小分子與蛋白質(zhì)的相互作用

蛋白質(zhì)也是藥物在體內(nèi)發(fā)揮藥理作用的主要靶點。藥物可以通過與離子通道、酶等受體蛋白相結(jié)合,改變受體蛋白的空間構(gòu)象或與受體蛋白的天然配體競爭結(jié)合,調(diào)節(jié)和改變受體蛋白的生物學功能,進而發(fā)揮其藥效作用。此外,血漿蛋白(如血清白蛋白和α1-酸性糖蛋白)還是藥物在體內(nèi)的主要載體。藥物可以通過與血漿蛋白結(jié)合,被運送到其發(fā)揮藥效作用的組織和器官,同時藥物與血漿蛋白的結(jié)合也可以有效地控制藥物的釋放、避免藥物迅速代謝。因此,研究中藥小分子與蛋白質(zhì)的相互作用不僅有助于從分子水平上理解藥物發(fā)揮藥理作用的機制,還能對藥物在體內(nèi)的吸收、分布、代謝、排泄進行充分的評價。

張華蓉等[30-31]利用 ESI-MS研究了人參皂苷Rb1、Rb2、Rd和Re與細胞色素c之間的相互作用,并計算得到了復合物的結(jié)合常數(shù)。Qu等[32]的研究表明,人參皂苷Rg1與溶菌酶的結(jié)合力要強于人參皂苷Re。陳曉嵐等[33-37]對中藥黃酮成分楊梅素、大豆素以及7-羥基黃酮進行了磷?；揎?并利用ESI-MS比較了黃酮成分及其磷?；苌锱c蛋白質(zhì)之間的相互作用,結(jié)果表明磷酰化黃酮與蛋白質(zhì)的結(jié)合要強于黃酮,體外實驗也證明前者對腫瘤細胞的抑制活性要強于后者[38]。陳勇教授課題組成員[39-44]通過ESI-MS研究了5種中藥小分子(包括小檗堿、莨菪烷類生物堿、射干苷、葛根素、七葉皂苷鈉)與人血清白蛋白(HSA)以及α1-酸性糖蛋白(AGG)之間的相互作用,并通過滴定法得到了藥物與蛋白質(zhì)的化學計量比、結(jié)合常數(shù)、以及作用力的類型。最近,Liu等[45]利用ESI-MS研究了丹參酮IIA對抗凝藥物華法林與 HSA作用的影響,研究表明,丹參酮IIA能夠與華法林競爭性地結(jié)合HSA,其結(jié)果可以導致血液中游離的華法林藥物濃度升高,進而加速華法林的代謝,這一研究成果有助于從分子水平闡明丹參酮IIA在體內(nèi)加強華法林藥理作用的原因。

此外,電噴霧傅里葉離子回旋共振質(zhì)譜(ESI-FT-ICR MS)技術(shù)還能夠用于研究復雜體系與蛋白質(zhì)的相互作用[46]。Vu等[47]利用 ESIFT-ICR MS分別研究了85種植物甲醇提取物與碳酸酐酶的相互作用,從中篩選出一種與碳酸酐酶特異性結(jié)合的抑制劑 6-(1S-hydroxy-3-methylbutyl)-7-methoxy-2H-chromen-2-one(香豆素的水解產(chǎn)物)。

需要指出的是,由于某些蛋白質(zhì)的相對分子質(zhì)量很大,常常選擇蛋白質(zhì)的某些功能結(jié)構(gòu)域作為靶分子,研究藥物小分子與蛋白質(zhì)的相互作用。Benkestock等[48]選取 HSA的第II結(jié)構(gòu)域作為藥物受體,通過競爭反應得出了未知藥物與HSA的結(jié)合位點。此外,由于許多含有Src同源結(jié)構(gòu)域(Src homology domain)的蛋白質(zhì)在細胞內(nèi)信號傳導過程中起到了重要作用,Src同源結(jié)構(gòu)域也常被選為藥物受體以及體外藥物篩選的模型[49]。

1.3 中藥小分子與多肽的相互作用

某些多肽也是藥物在體內(nèi)結(jié)合的靶點。例如,淀粉樣Aβ肽聚集產(chǎn)生的有毒斑塊是引發(fā)阿爾茨海默病的原因之一。藥物可以通過與Aβ肽結(jié)合,阻止其聚集而達到治療效果[50]。Bazoti等[51-52]利用 ESI-MS研究了Aβ多肽與橄欖苦苷(Oleuroprin)之間的作用,并利用酶解的方法確定了橄欖苦苷的結(jié)合位點。細菌細胞壁肽聚糖的多肽側(cè)鏈是某些抗菌藥物的結(jié)合位點,藥物可以通過結(jié)合在肽鏈末端而阻礙細菌細胞壁的合成,進而達到抑制細菌生長的藥理作用[53]。Lim等[53]利用離子噴霧質(zhì)譜比較了萬古霉素(vancomycin)以及利托菌素(ristocetin)與側(cè)鏈多肽的相對作用力,結(jié)果表明前者的結(jié)合強度要高于后者。此外,某些多肽也可以作為蛋白質(zhì)的模型用以研究藥物與蛋白質(zhì)之間的相互作用。Sarni-Manchado等[54]利用 ESI-MS研究了兒茶素及其沒食子?；苌锱c富含脯氨酸的多肽的結(jié)合,借此考察了這些成分與明膠蛋白之間的相互作用。

2 基質(zhì)輔助激光解吸電離質(zhì)譜在中藥小分子與生物大分子相互作用研究中的應用

與ESI相比,MALDI-MS在藥物與生物大分子相互作用研究中的應用要少的多[9]。這主要是由于MALDI-MS分析的樣品制備過程中常常使用強的酸性基質(zhì)或有機共溶劑,容易造成非共價復合物的解離,同時,離子化過程容易產(chǎn)生激光誘導的聚合物以及基質(zhì)加合物,常常干擾復合物的檢測。因此,利用MALDI-MS直接檢測藥物與生物大分子的復合物并非易事。然而, MALDI-MS分析對鹽溶液和緩沖液具有一定的耐受能力,在某種意義上可以更好地模擬生理環(huán)境。此外,MALDI-MS快速、靈敏,譜圖簡單且易于自動化,這些優(yōu)勢也促使科研人員致力于利用MALDI-MS研究藥物與生物大分子之間的相互作用[9]。

Chen等[55]利用MALDI-MS直接檢測了牛血清白蛋白(BSA)與鞣質(zhì)β-1,2,3,4,6-五-O-沒食子?；?D-葡萄糖(PGG)形成的復合物,發(fā)現(xiàn)一個BSA分子上能夠結(jié)合4個 PGG分子。Aviles課題組的研究人員[56-60]則利用強度衰減MALDI質(zhì)譜法(Intensity-fading MALDI-MS)研究了配體分子與生物大分子之間的相互作用,其基本原理是通過比較樣品中各種配體成分(含陰性對照)在生物靶分子加入前后離子強度的變化,推斷配體與生物靶分子相互作用;與陰性對照相比,配體分子在生物靶分子加入之后會選擇性地降低。該課題組的研究人員利用強度衰減MALDI-MS研究了3種蛋白酶(包括胰蛋白酶、木瓜蛋白酶以及牛羧肽酶)與其抑制劑之間的相互作用[56],并從水生動物海葵和水蛭(二者均屬于動物類中藥)的提取物中篩選出了蛋白酶的抑制劑[56,58-60]。最近,本小組將強度衰減MALDIMS引入了中藥小分子與蛋白質(zhì)相互作用的研究,利用該方法研究了蜂毒肽[61]以及生物堿類成分與鈣調(diào)蛋白之間的相互作用,并通過滴定法和競爭實驗比較了不同藥物與靶蛋白的相對結(jié)合強度。

Hannewald等[62]利用超濾技術(shù)先將藥物-微管蛋白復合物與游離的藥物進行分離,然后通過MALDI-MS檢測復合物變性或酶解后釋放的藥物分子(如秋水仙堿、長春花堿以及長春新堿),并利用此方法從長春花提取物中篩選出與微管蛋白結(jié)合的化學成分。

3 色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)在分析中藥復雜體系與生物大分子相互作用研究中的應用

與中藥單體成分相比,中藥提取物(或復方)中的化學成分非常復雜,僅利用質(zhì)譜技術(shù)難以直接研究其中的化學成分與生物大分子之間的相互作用。色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)即能夠充分發(fā)揮色譜高分離的能力,又可以展現(xiàn)質(zhì)譜高靈敏度和高準確度的檢測優(yōu)勢,是分析中藥復雜體系中不同化學成分與生物大分子之間相互作用的有力工具。

Su等[63]提出了中藥生物指紋圖譜分析方法,通過比較中藥提取物與生物大分子反應前后其中各種化學組分濃度的變化,推斷其與生物大分子的相對結(jié)合強度。利用這種分析方法,Su等[64]研究了中藥黃連和大黃提取物中的各種成分與小牛胸腺DNA(ctDNA)之間的相互作用,并比較了不同中藥成分與DNA分子的相對結(jié)合強度。Guo等[65]考察了中藥川芎中主要成分與人血清白蛋白(HSA)之間的相互作用,發(fā)現(xiàn)p H值的變化能夠影響某些中藥成分與HSA的結(jié)合程度。Li等[66-67]分別研究了忍冬提取物中主要成分與ctDNA和牛血清白蛋白之間的相互作用。Lei等[68]利用該方法從紫杉提取物中篩選出5種與微管蛋白相結(jié)合的小分子藥物,其中紫杉醇與微管蛋白的作用力最強。

此外,還可以將生物大分子固定在色譜柱的填料上,利用親和色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)研究中藥提取物中各組分與生物大分子的相互作用,通過考察各組分的洗脫時間來比較其與生物大分子的結(jié)合強度。Su等[69]利用親和色譜分別從黃連和大黃提取物中篩選出7種和14種與ctDNA結(jié)合的成分。Wang等[70]將 HSA固定在色譜柱的填料上,通過二維色譜從龍膽泄肝湯中分離了100余種與 HSA相結(jié)合的成分,并通過保留時間、紫外吸收光譜以及質(zhì)譜數(shù)據(jù)鑒定了其中的19種化合物。Luo等[71]利用前沿免疫親和色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)從中藥葉下珠提取物中篩選并鑒定了HCV NS3蛋白酶的5種多酚類抑制劑。Zhu等[72]則利用該技術(shù)從中藥鬼箭錦雞兒提取物中篩選并鑒定了抗表皮生長因子受體的抑制劑。

Van Breemen等[73]提出了脈沖超濾質(zhì)譜(PUF-MS)分析方法,利用超濾技術(shù)先將藥物配體與蛋白質(zhì)的復合物和藥物小分子分離,并洗脫掉未結(jié)合的藥物分子,然后改變洗脫條件,將結(jié)合的藥物配體從復合物中釋放出來,通過比較釋放藥物配體的濃度來判斷其與蛋白質(zhì)的作用強度。目前,PUF-MS已應用于從化合物庫或中藥提取物中篩選與靶蛋白質(zhì)相結(jié)合的藥物分子[74]。Liu等[75]分別研究了常用于治療女性更年期綜合癥的8種植物提取物對雌激素受體α和β的抑制活性,發(fā)現(xiàn)紅車軸草、牡荊子以及啤酒花的甲醇提取物具有很強的生物活性,通過PUF-MS研究發(fā)現(xiàn)染料木黃酮是紅車軸草中活性最強的成分。Zhang等[76]利用PUF-MS研究了喜樹提取物中化學成分與拓撲異構(gòu)酶之間的相互作用,發(fā)現(xiàn)有3種成分能夠與拓撲異構(gòu)酶結(jié)合,其中喜樹堿的結(jié)合力最強。本小組分別考察了具有抗II型糖尿病活性的4種中藥提取物以及1味中藥復方對α-葡萄糖苷酶的抑制活性,并通過PUF-MS技術(shù)從這些提取物(或復方)中篩選并鑒定了與α-葡萄糖苷酶相結(jié)合的中藥成分[77]。以山楂葉總黃酮提取物為例[78],通過酶學檢驗方法發(fā)現(xiàn)其對α-葡萄糖苷酶具有很強的抑制活性,進一步的篩選發(fā)現(xiàn)其中4種黃酮成分能夠與α-葡萄糖苷酶相結(jié)合,通過串聯(lián)質(zhì)譜對這4種成分進行了結(jié)構(gòu)確證,最終確定了山楂葉總黃酮提取物中的α-葡萄糖苷酶的抑制劑分別為槲皮素-3-O-鼠李糖-(1-4)-葡萄糖-鼠李糖苷、牡荊素-2″-O-葡萄糖苷、牡荊素-2″-O-鼠李糖苷和牡荊素。

4 結(jié)束語

綜上所述,軟電離質(zhì)譜技術(shù)已逐漸成為研究中藥小分子與生物大分子相互作用的有力工具。利用軟電離質(zhì)譜技術(shù)不僅能夠定性地研究中藥化學成分與生物大分子之間的相互作用,同時還能夠獲得二者的結(jié)合比例、結(jié)合強度以及結(jié)合位點等方面的信息,為從分子水平上闡明中藥單體以及中藥復方發(fā)揮藥效的機理和物質(zhì)基礎(chǔ)提供了科學依據(jù)。然而,應該清楚地認識到,目前的研究還僅僅局現(xiàn)于某些中藥化學成分以及部分生物靶分子。而中藥成分種類繁多,同時,生物體內(nèi)與疾病相關(guān)的生物靶分子也數(shù)量眾多,要全面了解中藥在體內(nèi)發(fā)揮藥理作用的過程和基礎(chǔ)仍需要開展更多的實驗,是一個長期的、系統(tǒng)的、逐步積累的工程。此外,在藥物與生物大分子的復合物由溶液進入氣相的過程中,相互作用的形式和能量可能會發(fā)生改變,如靜電作用和氫鍵作用會被加強,而其他非共價作用(尤其是疏水作用)將會變?nèi)?這為真實地表征溶液中藥物與生物大分子的相互作用帶來一定的困難。但是,隨著相關(guān)技術(shù)的不斷完善和發(fā)展,質(zhì)譜技術(shù)必將在中藥小分子與生物大分子相互作用的研究中發(fā)揮更大作用,為推進中藥現(xiàn)代化的進程做出更大的貢獻。

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Application of Mass Spectrometry in the Study of Binding Interactions between Small Molecules in Chinese Medicinal Herbs and Biomacromolecules

WANG Zhao-fu1,2,SONG Feng-rui1,LIU Zhi-qiang1,LIU Shu-ying1
(1.Changchun Center of Mass S pectrometry,Changchun Institute of A pplied Chemistry, Chinese Academy of Sciences,Changchun130022,China; 2.Graduate School of the Chinese Academy of Sciences,Beijing100039,China)

The Chinese medicinal herbs exert their pharmacological effects through a multicomponent and multi-target way.Studies on the binding interactions between the chemical components in the herbal medicine and biomacromolecules can not only provide the scientific basis to clarify the mechanism and foundation underlies the pharmacological effects of the herbal medicines but also provide theoretical guidelines for the design of new drugs.Soft ionization mass spectrometric techniques,especially electrospray ionization mass spectrometry(ESI-MS)and matrix-assisted laser desorption/ionization mass spectrometry(MALDIMS)can transfer the intact complexes formed between drugs and biomacromolecules into the gas phase and detect the existence of the complexes,which have shown promising appli-cation to the study of binding interactions between small molecules in Chinese medicinal herbs and biomacromolecules.The combination of mass spectrometry with chromatographic techniques has also shown great advantages to explore the interactions of the chemical components in complex herb systems towards the biomacromolecules.The paper introduced the application mechanism of mass spectrometry for the analysis of drug-biomacromolecules interactions and summarized the application of soft ionization mass spectrometry in the study of binding interactions between the small molecules in Chinese medicinal herbs and biomacromolecules in recent years.

small molecules in Chinese medicinal herbs;biomacromolecules;soft ionization mass spectrometry;binding interactions

O 657.63

A

1004-2997(2010)03-0129-09

2010-01-10;

2010-04-07

國家自然科學基金(30672600,20873137,20905067,20953001)、國家科技部創(chuàng)新方法工作專項項目(2009IM030400)、吉林省科技發(fā)展計劃項目(20080736)和長春市科技計劃項目(2007GH27)資助

王兆伏(1982～),男(漢族),博士研究生,藥物與生物質(zhì)譜學專業(yè)。E-mail:wangzhaofu@sohu.com

劉志強(1962～),男(漢族),研究員,博士生導師,從事天然藥物化學與有機質(zhì)譜學研究。E-mail:liuzq@ciac.jl.cn