熊耀斌,傅 纓,資曉飛,傅杰青

(1 江西省醫(yī)學(xué)科學(xué)研究所,江西 南昌 330006;2 南昌大學(xué)第二附屬醫(yī)院 江西 南昌 330006;3 江西腫瘤醫(yī)院,江西 南昌 330029)

2008年度諾貝爾生理學(xué)或醫(yī)學(xué)獎(jiǎng)授予德國(guó)科學(xué)家哈拉爾德?楚爾?豪森 (Harald zur Hausen),以表彰其發(fā)現(xiàn)致宮頸癌的人類乳頭狀瘤病毒;該獎(jiǎng)的另一半授予法國(guó)科學(xué)家佛朗西絲?巴勒 -西諾西(Francisoise Barré-Sinossi)和路克?蒙塔尼(Luc Montagnier),表彰他們發(fā)現(xiàn)了人類免疫缺損病毒。

1 致宮頸癌的人類乳頭狀瘤病毒的發(fā)現(xiàn)

宮頸癌在婦女癌癥發(fā)生率中位居第二,也是位居首位的性傳播疾病。在豪森于 20世紀(jì) 70年代提出人類乳頭狀瘤病毒(HPV)是宮頸癌病因的時(shí)候,占主流的觀點(diǎn)認(rèn)為,單純皰疹病毒 -2(HSV-2)是宮頸癌的病因,根據(jù)的是血清流行病學(xué)的數(shù)據(jù),并且有核酸雜交和動(dòng)物宮頸癌誘導(dǎo)的支持。但是豪森始終未能在宮頸癌細(xì)胞里找到 HSV-2的 DNA。他認(rèn)為,人類腫瘤細(xì)胞,一旦為腫瘤病毒所轉(zhuǎn)化,就可能擁有整合于宿主基因組的病毒遺傳信息。他的這一“原因標(biāo)準(zhǔn)”為經(jīng)典的郭霍氏原則增加了一項(xiàng)標(biāo)準(zhǔn):病毒基因組應(yīng)當(dāng)持續(xù)不斷地存在于癌中,而且十分活躍。1974年豪森發(fā)表了第一篇報(bào)告,介紹他在宮頸癌和陰道疣活檢材料中發(fā)現(xiàn) HPV DNA,其方法是將腫瘤DNA與從提純的足底疣 HPV DNA獲得的 cRNA進(jìn)行雜交。從這樣一些足底疣和皮膚疣取來(lái)的活檢材料常?？梢猿晒Φ仉s交,但尖銳濕疣和宮頸癌的活檢材料卻總是陰性。因?yàn)闆](méi)有哪一型腫瘤呈陽(yáng)性,即使在尖銳濕疣病變中證實(shí)有典型 HPV顆粒存在。豪森就判斷,各型HPV之間存在著遺傳學(xué)的異質(zhì)性(1976)。豪森關(guān)于宮頸癌的病原是 HPV的理論得到了嗣后 Meisels和 Fortin的支持,他們的電子顯微鏡檢查確定了 HPV顆粒的存在(1981)。豪森的團(tuán)隊(duì)使用核酸雜交技術(shù)成功篩選了新型的 HPV,并且開發(fā)成功了一種克隆技術(shù),從而導(dǎo)致了第一個(gè)型的陰道 HPV,即 HPV6的鑒定(1981)。[1]來(lái)自該型病毒的 DNA從陰道疣和尖銳濕疣中被反復(fù)地分離(1982),現(xiàn)今該病毒已經(jīng)被公認(rèn)為尖銳濕疣的主因。但是這仍未能將 HPV和宮頸癌聯(lián)系起來(lái)。稍后,包括兩例廣泛性宮頸癌在內(nèi)的幾種惡性腫瘤都表現(xiàn)出與 HPV11之 DNA有較弱的、但經(jīng)常性的雜交連系(1982-1983)。1983年該種 DNA被克隆成功,并被定名為HPV16 DNA。嗣后,豪森證實(shí),50%以上的宮頸癌活檢材料對(duì) HPV16 DNA呈陽(yáng)性。他們于 1984年將 HPV18 DNA克隆成功,而作為對(duì)照的良性腫瘤、正常宮頸組織和陰道疣都呈陰性。豪森的研究團(tuán)隊(duì)現(xiàn)今把這兩型 HPV視作宮頸癌中最常見(jiàn)的兩型:HPV16和 18之DNA見(jiàn)之于 82%的廣泛性宮頸癌患者。[2]

關(guān)于疫苗預(yù)防方面,豪森的研究團(tuán)隊(duì)先后開發(fā)過(guò)兩種疫苗,它們分別是四價(jià)疫苗和二價(jià)疫苗。四價(jià)疫苗含有型 6,11,16,18 HPV的免疫原,而二價(jià)疫苗只含有型 16和 18的HPV病毒的 L1蛋白質(zhì)。這兩者都獲得過(guò)專利保護(hù),在 III期試驗(yàn)中均產(chǎn)生過(guò) ＞90%的保護(hù)力。這兩型 HPV病毒疫苗就其潛在能力而言,可以預(yù)防在世界流行的宮頸癌中占 70%的廣泛性宮頸癌。此外,預(yù)防效果時(shí)間持續(xù)多久,究竟它能產(chǎn)生終身免疫還是仍需加強(qiáng)注射等問(wèn)題都難以解答?？紤]到這兩型疫苗預(yù)防的是致70%宮頸癌的兩株病毒,是否要引進(jìn)致宮頸癌其他毒株的預(yù)防疫苗,也是一個(gè)問(wèn)題。在豪森看來(lái),疫苗接種的效果極為成功,所以疫苗是值得推廣的。但是現(xiàn)在的主要障礙在于疫苗太貴,特別是對(duì)于急需疫苗的非洲等發(fā)展中國(guó)家來(lái)說(shuō),那里接受疫苗注射的愿望十分強(qiáng)烈,而問(wèn)題在于如何使疫苗價(jià)格大幅度降下來(lái)。

2 人類艾滋病病毒的發(fā)現(xiàn)

1981年在美國(guó)加利福尼亞和紐約記載了一種新的綜合征。有關(guān)的報(bào)告稱,一群年青的健康男子得了一種過(guò)去該群體所不知曉的致命性疾病。美國(guó)疾病預(yù)防控制中心(CDC)組成了一個(gè)專門的考察隊(duì),將該病鑒定為“獲得性免疫缺損綜合征”(AIDS,又稱艾滋病),研究其病因的活動(dòng)就此發(fā)端。西諾西和蒙塔尼從早期艾滋病特有的腫大淋巴結(jié)中分離和培養(yǎng)了淋巴細(xì)胞。與此同時(shí),在艾滋病的早期患者腫大的淋巴結(jié)中和晚期患者的血液標(biāo)本中他們分離到了艾滋病病毒(HIV)。HIV能夠感染和殺死病人和健康供體的淋巴細(xì)胞,并能夠與受染患者的抗體發(fā)生反應(yīng)。他們還發(fā)現(xiàn)了 HIV的逆轉(zhuǎn)錄酶活性,這種特性正是逆轉(zhuǎn)錄病毒增殖的直接證據(jù);他們還發(fā)現(xiàn)了從受染細(xì)胞中長(zhǎng)出來(lái)的逆轉(zhuǎn)錄病毒顆粒。[4]HIV與以往描述的人類腫瘤逆轉(zhuǎn)錄病毒不同,它并不能誘導(dǎo)非控制性細(xì)胞生長(zhǎng)。相反,該病毒對(duì)增殖來(lái)說(shuō)需要細(xì)胞激活,并且介導(dǎo) T淋巴細(xì)胞的融合。這一點(diǎn)可以部分地解釋 HIV是如何破壞免疫系統(tǒng)的,因?yàn)?T細(xì)胞是免疫防御之基礎(chǔ)。

在發(fā)現(xiàn) HIV是艾滋病病因后不久,西諾西和蒙塔尼又促成了 HIV-1基因組的快速克隆,從而也促使增殖周期中重要細(xì)節(jié)的確定,并了解該病毒是如何與其宿主相互作用的,進(jìn)而促進(jìn)了對(duì)受染病人診斷方法和血液制品的開發(fā)成功,大大限制了該病的大流行。許多族類的新抗病毒藥的空前開發(fā)成功也是該病毒增殖周期諸細(xì)節(jié)知識(shí)積累的必然結(jié)果。預(yù)防和治療的結(jié)合大大降低了艾滋病的傳播,極大地提高了受染人群的預(yù)期壽命。HIV的克隆使得對(duì)該病毒的起源和進(jìn)化的了解成為可能:很可能于 20世紀(jì)初在西非該病毒從猿傳給了人。但迄今為止仍未弄明白,為什么 1970年以后該病猛烈地流行起來(lái)。[4]

在西諾西和蒙塔尼因發(fā)現(xiàn)艾滋病病毒而獲得諾貝爾獎(jiǎng)的同時(shí),諾貝爾委員會(huì)正蒙受著美國(guó)病毒學(xué)家羅勃特?蓋洛(RobertGallo)無(wú)聲的抗議。當(dāng)1983年西諾西和蒙塔尼將分離到的艾滋病病毒稱之為淋巴相關(guān)病毒(LAV)的時(shí)候,蓋洛在次年(1984年)從許多艾滋病和前艾滋病患者體內(nèi)分離到一種新病毒,該病毒與 LAV-1有很多的相似性。除了榮譽(yù)之外,數(shù)以百萬(wàn)計(jì)的美元為了血液檢測(cè)方面的專利而被人們投入博弈之中。2003年蓋洛與蒙塔尼于《新英格蘭醫(yī)學(xué)雜志》上共同發(fā)表文章彼此承認(rèn)對(duì)方的工作。

但是在2008年 10月,諾貝爾委員會(huì)宣布將該項(xiàng)年度醫(yī)學(xué)獎(jiǎng)授予西諾西和蒙塔尼時(shí),無(wú)疑在已經(jīng)歸于平靜的湖面投擲了一塊石子。許多人認(rèn)為,諾貝爾獎(jiǎng)不應(yīng)授予這有是非之爭(zhēng)的領(lǐng)域,盡管它有其明顯的重要性?，F(xiàn)今,諾貝爾委員會(huì)已經(jīng)出面澄清其立場(chǎng),認(rèn)為“西諾西和蒙塔尼的發(fā)現(xiàn)已為科學(xué)界所接受,而且已經(jīng)導(dǎo)致一系列科學(xué)發(fā)現(xiàn)的出現(xiàn)”。負(fù)責(zé)醫(yī)學(xué)諾貝爾獎(jiǎng)的瑞典卡羅琳斯卡醫(yī)學(xué)院學(xué)術(shù)秘書 Jans Jornvall澄清說(shuō),該學(xué)院的評(píng)獎(jiǎng)全體會(huì)議認(rèn)為,西諾西和蒙塔尼值得雙雙榮膺諾貝爾獎(jiǎng),因?yàn)樗麄冊(cè)?1983年首先在《科學(xué)》雜志上發(fā)表了關(guān)于鑒定艾滋病病毒的論文。在電話采訪中 Jornvall表?yè)P(yáng)了蓋洛的工作,但是卻在原則問(wèn)題上沒(méi)有讓步,他說(shuō):“我們認(rèn)為,我們提名的兩人是該病毒的發(fā)現(xiàn)者。如果你看一看論文,你就能判斷誰(shuí)是發(fā)現(xiàn)者?！?/p>

采取同樣立場(chǎng)的還有美國(guó)國(guó)立變應(yīng)性和感染性研究所所長(zhǎng) Anthony Fauci,他說(shuō)道:“蓋洛應(yīng)該享受許多榮譽(yù)。不能同時(shí)給 4人授獎(jiǎng)(如果給蓋洛授以 2008年度諾貝爾醫(yī)學(xué)獎(jiǎng),獲獎(jiǎng)?wù)呔蛯⒃鲋?4人,超過(guò)了最多只能授予 3人/年度的規(guī)定)是一件羞事,因?yàn)樯w洛的貢獻(xiàn)是很多的。”

獲獎(jiǎng)?wù)呙伤嵩谙笱篮０兜陌⒈茸寘⒓右粋€(gè)國(guó)際性艾滋病學(xué)術(shù)會(huì)議時(shí)對(duì)媒體說(shuō),他希望也給蓋洛授獎(jiǎng)。他還具體地談起:“他作出的貢獻(xiàn)和我們兩人一樣多”。[5]至于蓋洛本人,他在一份書面文件中祝賀兩位獲獎(jiǎng)?wù)?并且說(shuō)他“滿足于”蒙塔尼的“友好表述”。蓋洛還說(shuō):“我樂(lè)于見(jiàn)到,諾貝爾委員會(huì)選擇用諾貝爾獎(jiǎng)來(lái)承認(rèn)艾滋病的重要性。我感到驕傲的是,我的同行與我繼續(xù)從事艾滋病疫苗的研究?！盵6]

[1] The Nobel Prize in Physiology or Medicine 2008[EB/OL].http://nobelprize.org.

[2] The Nobel Assembly at Karolinska Institute.The discoveries ofhumanpapillomaviruses that cause cervical cancerand of human immunodeficiency virus[EB/OL].http://nobelprize.org,(2008-10-08)[2008-11-16].

[3] Interviews:Harald zur Hausen,Francisoise Barré-Sinoussi,Luc Montagnier[EB/OL].http://nobel prize.org.

[4] Abbott A,Brumfiel G.Nobel for AIDS virus discovery,finally[J].Nature,2008,(455):712-713.

[5] Cohen J,Enserink M.HIV,HPV researchers honored,butone scientist is leftout[J].Science,2008,(322):174-175.

[6] Stein R.Two receive Nobel for AIDS virus discovery[N].Washington Post,2008-10-07.