陳興芬，單承鶯，馬世宏，張衛(wèi)明

(1.南京師范大學生命科學學院，江蘇南京210097;2.南京野生植物綜合利用研究院，江蘇南京210042)

側(cè)柏葉化學成分、生理活性及防脫發(fā)功能研究進展

陳興芬1，2，單承鶯2，馬世宏2，張衛(wèi)明1，2

(1.南京師范大學生命科學學院，江蘇南京210097;2.南京野生植物綜合利用研究院，江蘇南京210042)

綜述了側(cè)柏葉的化學成分、生物活性及其防脫發(fā)功能的研究進展。側(cè)柏葉主要成分為揮發(fā)油、黃酮類化合物以及鞣質(zhì);其具有抑菌、抗腫瘤、抗炎、抗紅細胞氧化和止血等作用，尤其在防脫發(fā)方面具有獨特的效果。

側(cè)柏葉;揮發(fā)油;黃酮;鞣質(zhì);防脫發(fā)

側(cè)柏葉又名柏葉、叢柏葉、扁柏、云片柏等，是柏科植物側(cè)柏(Platycladus orientalis)的干燥嫩枝葉。中醫(yī)認為側(cè)柏葉氣清香，味苦澀、微辛，具有涼血止血、祛風降濕、化痰止咳、消腫散毒的功效，在臨床上常用于治療出血癥、風濕痹痛、高血壓、咳喘燙傷等癥。明代李時珍《本草綱目》中“乃多壽之木，所以可以入服食。道家以之點湯常飲”的記載，并總結(jié)了歷代醫(yī)學家對側(cè)柏葉的功效記述，能主治“吐血衄血，痢血，崩中，赤白，輕身益氣，令人耐寒暑，去濕痹，生肌。治冷風歷節(jié)疼痛，止尿血。炙，詈凍瘡。燒取汁涂頭，黑潤鬢發(fā)。敷燙火傷，止痛滅瘢。服之，療蠱痢。作湯常服，殺五臟蟲，益人?！睘閭?cè)柏葉的食療養(yǎng)生價值做出了權(quán)威性的概括。

1 側(cè)柏葉化學成分研究

據(jù)報道，側(cè)柏葉中的主要成分是揮發(fā)油、黃酮、鞣質(zhì)等［1］，現(xiàn)分述如下：

1.1 揮發(fā)油

揮發(fā)油中含雪松烯、雪松醇、側(cè)柏烯、側(cè)柏酮、小茴香酮、蒎烯、石竹烯等［2］。

目前，普遍采用酶提取法(CE)、同時蒸餾萃取法(SDE)和水蒸氣蒸餾－萃取法(DSE)三種方法提取側(cè)柏葉揮發(fā)性成分，采用氣相色譜－質(zhì)譜法(GC－MS)對揮發(fā)性成分進行分析。

程立方等［3］對全國7個主產(chǎn)區(qū)以及山東12個地市的側(cè)柏葉藥材進行了揮發(fā)油含量測定，結(jié)果在0.32%～0.95%之間;同時測定了2批藥材分別為0.27%，0.32%，鮮樣為0.24%，含量較以上低，估計是受樣品產(chǎn)地(廣州)的影響。

回瑞華等［4］采用酶提取法提取側(cè)柏葉揮發(fā)油，鑒定出32種化合物，占揮發(fā)油總量的98.73%，其主要成分為雪松烯，占揮發(fā)油總量的41.25%;同時蒸餾－萃取法提取側(cè)柏葉揮發(fā)油，鑒定出29種化合物，占揮發(fā)油總量的97.14%，其主要成分為雪松醇，占揮發(fā)油總量的39.06%;水蒸氣蒸餾－萃取法提取側(cè)柏葉揮發(fā)油，鑒定出32種化合物，占揮發(fā)油總量的98.67%，其主要成分為雪松醇，占揮發(fā)油總量的31.43%。

魏剛等［2］用GC－MS分析側(cè)柏葉揮發(fā)油成分，其主要成分為柏木腦(約30%)，還含有α－蒎烯(5%)、3－蒈烯(3%)、乙酸松油酯(4%)、異石竹烯(4%)、α －石竹烯(2%)、萜醇類(5% ～6%)等化學成分。

劉廷禮等［5］采用水蒸氣蒸餾法從側(cè)柏葉中提取揮發(fā)油，采用GC－MS對化學成分進行鑒定，共鑒定了33個成分，占揮發(fā)油總成分的80%以上。

蔣繼宏等［6］采用GC－MS對側(cè)柏葉、種皮和種子揮發(fā)油的化學成分進行了研究。結(jié)果發(fā)現(xiàn)其含有的揮發(fā)物質(zhì)種類，側(cè)柏葉、種皮和種子分別為8、31及21個成分，其揮發(fā)油成分也不盡相同;側(cè)柏葉含量最高的是α，α，4，8－四甲基－3，7－環(huán)癸二烯－1－甲醇和雪松醇，分別占總揮發(fā)油的27.213%與26.193%;種皮和種子揮發(fā)油中含量最高的均是雪松醇，分別占總揮發(fā)油的28.277%和26.919%。

1.2 黃酮類化合物

側(cè)柏葉黃酮類化合物中有香橙素、槲皮素、楊梅樹皮素、扁柏雙黃酮、穗花杉雙黃酮等［7］。

張國琴等［7］對側(cè)柏葉經(jīng)石油醚脫脂后，以甲醇∶水(1∶1)為溶劑，提取液色素干擾小，黃酮成分提取完全。通過對10批樣品測定，黃酮成分平均含量達1.04%。

梁惠珍［8］研究得出側(cè)柏葉超臨界流體提取揮發(fā)油后總黃酮的最佳提取工藝，采用該工藝進行試驗，總黃酮的提取率約為3.79%。

趙永光等［9］用超聲波提取側(cè)柏葉中的黃酮類成分，提取率達到93.60%，較不用超聲處理的提取率提高23.4%;紫外光譜掃描發(fā)現(xiàn)側(cè)柏葉提取物在265 nm、308 nm、352 nm 處各有一吸收峰，黃酮、黃酮醇的紫外吸收光譜在240～280 nm與300～380 nm間有兩個主要的吸收峰。因此趙永光等初步推測側(cè)柏葉中黃酮類化合物主要為黃酮、黃酮醇類，又根據(jù)以氫氧化鈉為顯色試劑作定性分析溶液呈棕黃色，確定側(cè)柏葉中黃酮類化合物主要為黃酮醇類。

側(cè)柏葉中的總黃酮成分以槲皮苷為主。槲皮苷為槲皮素的3－O－鼠李糖苷，對槲皮苷及其苷元的分析研究，從單純的HPLC法含量測定，到HPLCNMR － MS 分析研究均有報道［10，11］。

1.3 鞣質(zhì)

曾祥麗等［12］采用2005版《中華人民共和國藥典》鞣質(zhì)含量測定方法，即磷鉬鎢酸－干酪素比色法，以沒食子酸為對照，測定側(cè)柏葉生品和炭品中的鞣質(zhì)含量分別為0.268 0%和0.143 4%。

程立方等［13］等在干酪素法的基礎(chǔ)上對側(cè)柏葉中鞣質(zhì)含量測定方法進行探索，尋找適合測定含量較低的側(cè)柏葉鞣質(zhì)的實驗條件：干酪素法的特點是選擇性比皮粉法要高，測出有生理活性的鞣質(zhì)，而無生理活性的鞣質(zhì)不被測定。用皮粉法測定側(cè)柏葉中鞣質(zhì)含量均在6%以下，應(yīng)采用干酪素法較為理想。

2 藥理作用研究

2.1 抑菌作用

公衍玲等［14］采用細菌培養(yǎng)實驗，把側(cè)柏葉揮發(fā)油加入到分別含大腸桿菌、枯草桿菌、四聯(lián)球菌、產(chǎn)氣桿菌和金黃色葡萄球菌的平板中，觀察并測量抑菌圈的大小，檢測側(cè)柏葉揮發(fā)油對上述菌種的抑制作用。結(jié)果顯示側(cè)柏葉揮發(fā)油對金黃色葡萄球菌、四聯(lián)球菌、大腸桿菌和產(chǎn)氣桿菌都有明顯的抑制作用，并且表現(xiàn)出不同程度的劑量依賴關(guān)系，而對枯草桿菌的抑制作用不明顯。

劉愛如等［15］證明側(cè)柏葉水煎液對金黃色葡萄球菌有抑制作用，其醇提物抑制金黃色葡萄球菌的作用強于水煎液，且對卡他球菌也有抑制作用。

李園園等［16］發(fā)現(xiàn)側(cè)柏葉乙醇提取物對蘋果腐爛葡萄病菌、葡萄黑痘病菌、葡萄白腐病菌和番茄早疫病菌等4種供試菌種均具有較強的抑制作用，抑菌率均大于70%。

2.2 抗腫瘤作用

蔣繼宏等［6］把側(cè)柏葉、種皮及種子揮發(fā)油中分離純化出雪松醇進行抗人肺癌細胞實驗，實驗結(jié)果得出44.98 μg·mL－1的雪松醇能抑制50%的NCI－H460(人肺癌)細胞死亡，當雪松醇含量達50 μg·mL－1時，60.83%的肺癌細胞受抑制。表明雪松醇有較強的抗肺癌細胞活性。但是結(jié)果分析發(fā)現(xiàn)揮發(fā)油成分中雪松醇含量依次為26.193%、28.277%和26.919%的側(cè)柏葉、種皮和種子，其抗腫瘤活性卻依次為86.24%、47.80和97.73%，分析其原因可能是側(cè)柏葉和種子揮發(fā)油成分中還有其它成分具有較高的抗腫瘤活性或和雪松醇具有協(xié)同抗腫瘤活性。

2.3 抗炎作用

梁統(tǒng)等［17，18］探討側(cè)柏葉總黃酮的抗炎機理。其方法是以二甲苯致小鼠耳腫脹及角叉菜膠誘發(fā)大鼠足爪腫脹模型分別探討側(cè)柏總黃酮對小鼠耳片腫脹及大鼠足爪腫脹的抑制作用。用高效液相色譜法測定角叉菜膠致炎的大鼠中性粒細胞花生四烯酸代謝產(chǎn)物白三烯B4(LTB4)及5－羥廿碳四烯酸(5－HETE)的生成，熒光法測定β－葡糖苷酸酶釋放。結(jié)果：濃度為5.0～125.0 mg·L－1總黃酮對大白鼠中性粒細胞花生四烯酸代謝產(chǎn)物5－HETE及LTB4生物合成的抑制率分別為30.5%～87.3%和27.8% ～84.3%。5.0，25.0，45.0 mg·L－1的總黃酮對A23187誘導的β－葡糖苷酸酶釋放抑制率分別為13.4%，26.2%和32.2%。結(jié)論：側(cè)柏總黃酮具有較強的抗炎作用，其對中性粒細胞花生四烯酸代謝產(chǎn)物LT B4、5－HETE生物合成及β－葡糖苷酸酶釋放的抑制作用可能與其抗炎作用有關(guān)。

2.4 抗紅細胞氧化作用

丁航等［19］發(fā)現(xiàn)從側(cè)柏葉中提取的黃酮加入到紅細胞懸液中可明顯抑制H2O2誘發(fā)的人RBC溶血，溶血度及丙二醛的含量均下降，并隨著黃酮劑量的增加，抑制作用加強，為臨床應(yīng)用側(cè)柏葉防RBC氧化損傷溶血性疾病提供了實驗依據(jù)。

2.5 止血作用

以小鼠剪尾法為生物指標從側(cè)柏葉熱水提取部分分得止血有效部分黃酮醇甙，小鼠出血時間比對照組縮短62.1%。該黃酮醇甙紫外光譜特征與蘆丁很相似，經(jīng)鑒定為槲皮甙［1］。

側(cè)柏葉的止血作用，文獻記載是槲皮甙具有良好的抗毛細血管脆性和止血作用，槲皮素對由ADP膠原或凝血酶引起的血小板聚集及血栓形成有抑制作用［15］。

除側(cè)柏葉黃酮具有止血的作用外，側(cè)柏葉鞣質(zhì)又有收縮微血管和促凝血的作用，自古以來用于止血。以小鼠剪尾法觀察側(cè)柏葉止血作用，分得有效止血成分鞣質(zhì)，經(jīng)鑒定為縮合型鞣質(zhì)［1］。

2.6 對心血管系統(tǒng)的作用

王昌明等［20］研究發(fā)現(xiàn)槲皮素具有降血壓、保護心肌缺血再灌注損傷等作用。槲皮素能顯著抑制血小板衍生生長因子(PDGF)誘導的肺動脈平滑肌細胞增殖，對于肺動脈高壓的防治具有重要作用。黃慧等［21］實驗得出槲皮素阻斷肺動脈平滑肌細胞(PASMC)G0/G1期進入DNA合成的S期，且能抑制PDGF誘導的酪氨酸磷酸化程度。通過阻斷肺小動脈平滑肌細胞增生而降低肺循環(huán)阻力。對于胸主動脈平滑肌細胞的增殖，槲皮素也有抑制作用。可見槲皮素能抑制動脈平滑肌增殖，預防血管再狹窄。

3 主要脫發(fā)原因及治療

關(guān)于脫發(fā)的原因，不同類型的脫發(fā)是由不同的致病因素所造成的，歸納起來，無外乎以下幾個方面［22，23］：

(1)雄性激素有關(guān)的毛囊機能低下。頭部毛發(fā)嚴格地受雄性激素的影響，男性激素的睪丸酮，在毛囊處經(jīng)5α－還原酶催化變成活性更高的5α－二氫睪丸酮(DHT)，這種變化是不可逆的。DHT是引起脫發(fā)的主要原因，它能與細胞內(nèi)的受體蛋白質(zhì)結(jié)合，轉(zhuǎn)移到細胞核內(nèi)，將特定的基因活化，誘導生成特定的蛋白質(zhì)，從而阻礙了毛發(fā)的生長，進而產(chǎn)生永久性的脫發(fā)或禿發(fā)。

(2)毛囊、毛球部及頭發(fā)生理機能低下。頭發(fā)是從毛囊底部長出，而毛囊底部的毛乳頭上有許多分裂的細胞，它們便是毛球，毛球是頭發(fā)的發(fā)端，在毛球的上半球生有色素細胞，它們共同的作用是分泌油脂，滋潤毛發(fā)。當油脂分泌過剩，則會導致產(chǎn)生脂溢性脫發(fā)，或引發(fā)細菌從而產(chǎn)生糠秕性脫發(fā)癥。

(3)頭皮緊張造成的局部血液循環(huán)障礙，引起毛囊、毛乳頭的末梢毛細血管的流量減少，毛乳頭和毛母細胞的養(yǎng)料物質(zhì)供應(yīng)不足，使頭發(fā)的生長出現(xiàn)異常。

(4)營養(yǎng)不良、應(yīng)激反應(yīng)和藥物副作用。

(5)遺傳因素等。

在中國早期，人們對付脫發(fā)，一般是采用中國的傳統(tǒng)中草藥，以民間醫(yī)學的藥方、偏方為主，或采用搽、敷、食相結(jié)合的多重作用，通過刺激毛囊，促進血液微循環(huán)，提供頭發(fā)生長養(yǎng)分等手段，從而達到防脫生發(fā)的作用。但一般程序較為繁鎖，辛辣刺激較重，目前已很少被采用。

目前公認最有效的治療雄性激素脫發(fā)方法是外用米諾地爾洗劑及口服非那雄胺［24］。

據(jù)實驗研究，在毛囊的體外培養(yǎng)中，加入米諾地爾(minuodier)可增加培養(yǎng)毛囊的生長時間。米諾地爾刺激、維持毛囊生長和延長毛囊生長期，使微小化的毛囊發(fā)育增大以及促毛乳頭血管形成與功能，從而在治療脫發(fā)中起重要作用。

非那雄胺(Finasteride)為一種4－氮雜甾體化合物，它是睪酮代謝成為更強的5α－二氫睪酮過程中的細胞內(nèi)酶－II型5α－還原酶的特異性抑制劑。

但是米諾地爾對頭皮有一定的刺激性，主要不良反應(yīng)為多毛癥，并且存在副作用;非那雄胺具有遺傳和生殖毒性。

4 側(cè)柏葉防脫發(fā)研究

側(cè)柏葉清熱涼血，為治療血燥脫發(fā)之佳品，晉·葛洪《肘后方》生發(fā)方：“取側(cè)柏葉，陰干作末。和油涂之?！薄侗静菥V目》謂其主治“頭發(fā)不生”，“浸油，生發(fā)。燒汁，黑發(fā)。和豬脂，沐發(fā)長黑。根皮，生發(fā)?！碧啤ね鯛c《外臺秘要》載：“生側(cè)柏葉一升，附子(炮)四枚，豬膏三斤。上二味末，以膏三斤，和為三十丸。用布裹一丸，內(nèi)煎沐頭汁中，令發(fā)長不復落也。”

4.1 中醫(yī)中側(cè)柏葉防治脫發(fā)研究

侯士良在《中藥八百種詳解》著：鮮側(cè)柏葉切碎后浸于60% ～75%酒精中7天，用濾液涂搽患處，治療斑禿160例，顯效33例，有效91例，總有效率77.5%;取鮮側(cè)柏葉、何首烏、白蘚皮和骨碎補放入95%酒精中浸泡7天過濾后備用，外搽患處，治療脂溢性脫發(fā)38例，總有效率63%［25］。

林朝亮等［26］選用自制四白生發(fā)搽劑(白鮮皮、女貞子、側(cè)柏葉、生山楂、豬苓、蔓荊子、益母草各200 g，白芥子 250 g，白芨、白芷各 150 g，透骨草、辛夷各100 g，以上藥物粗粉碎，加入15%的醫(yī)用酒精2000 mL，浸泡2周后過濾，藥液分裝備用)，每日2次外涂于局部，并揉搓頭皮2 min，3個月為1個療程。治療患者230例，1療程結(jié)束后顯效175例(76.1%)，有效 21例(9.1%)，微效 26例(11.3%)，無效8例(3.4%)。

4.2 防脫發(fā)體外模型研究

吳巧云等［27］通過采用Williams Emedium培養(yǎng)小鼠觸須毛囊游離器官和毛球細胞，研究不同濃度的紅花、當歸、生側(cè)柏葉三味中藥混合煎劑對體外培養(yǎng)的小鼠觸須毛囊毛發(fā)生長的影響;采用乳鼠背部皮膚毛囊球部細胞體外培養(yǎng)的方法，研究上述中藥對小鼠毛囊球部細胞生長活力的影響。經(jīng)顯微鏡和MTT還原測定(單核細胞直接細胞毒性測定)法觀察毛發(fā)的生長。7天后，實驗組明顯快于對照組(P<0.05)。

紅花、當歸、生側(cè)柏葉三味中藥混合煎劑對體外培養(yǎng)的小鼠毛囊毛發(fā)生長起促進作用，可直接促進毛囊球部細胞增殖，其有效藥物濃度范圍在1.5×10－7g/mL～1.5×10－5g/mL之間(以當歸計)。說明傳統(tǒng)的中國草藥其水溶性產(chǎn)物能在離體條件下促進毛囊球細胞的增殖和大鼠毛發(fā)的生長。

谷朝霞等［28］用中醫(yī)治療脫發(fā)的方劑中4味使用頻率較高的中藥首烏、川芎、甘草和側(cè)柏葉的水提取物混合劑作為實驗的研究對象，研究其水提取物對體外培養(yǎng)人毛囊生長的影響。結(jié)果發(fā)現(xiàn)提取物混合劑中劑量組(100 μg/mL和200 μg/mL)較對照組毛發(fā)生長快，生長長度也增加，并且可以延長毛發(fā)的生長期。高劑量組(1 000 μg/mL和2 000 μg/mL)可明顯抑制毛發(fā)的生長，顯著縮短毛發(fā)的生長時間，該抑制作用可能與中藥濃度過高時，產(chǎn)生細胞毒性作用有關(guān)。低劑量組(2 μg/mL和20 μg/mL)對毛發(fā)生長無明顯影響。

4.3 側(cè)柏葉防脫發(fā)功能的應(yīng)用

趙永光等［29］研究了側(cè)柏葉中總黃酮成分的藥理作用主要在于激活毛母細胞和促進血液循環(huán)，使毛發(fā)生長能力衰退的毛囊復活和促進血液循環(huán)后補充營養(yǎng)成分而發(fā)揮出養(yǎng)發(fā)、生發(fā)的作用。采用側(cè)柏葉總黃酮提取液為療效劑，以去屑防脫功能性香波為研究對象，對側(cè)柏葉功能性洗發(fā)香波的制備工藝及配方進行了研究，確定了去屑防脫發(fā)功能性洗發(fā)香波的工藝及配方。

施昌松等［22］采用側(cè)柏葉、川芎、當歸、何首烏的浸膏配制成防脫發(fā)生發(fā)香波，并做了相關(guān)的配方試驗。通過人群受試實驗，證實產(chǎn)品的實際有效性，滿足了產(chǎn)品開發(fā)的相關(guān)設(shè)計理論與最初設(shè)想。

趙爭鳴［30］根據(jù)中醫(yī)藥學，精選了側(cè)柏葉、何首烏、川芎、當歸、枸杞、連翹、黃花、薏苡等八味中草藥制成療效藥液，并以廢蠶繭水解而得的絲素肽液為調(diào)理劑，與表面活性劑復配制成去頭屑防脫發(fā)護理香波。

5 展望

側(cè)柏葉主要成分為揮發(fā)油、黃酮類和鞣質(zhì)等，具抑菌抗炎、擴脹血管和祛屑防脫及能生須發(fā)等功效。可改善毛囊發(fā)育生長，同時對金黃色葡萄球菌、白色葡萄球菌等具有抑制作用，能去頭皮屑，促進頭發(fā)再生，增強毛囊代謝功能。

研究開發(fā)側(cè)柏葉去屑防脫類的洗發(fā)香波，用于預防及輔助治療脫發(fā)癥狀，從而滿足廣大消費者的需要。不足之處是其功效尚有待于更科學的藥理和臨床驗證，其次側(cè)柏葉其獨特的防治脫發(fā)功能，可以減輕脫發(fā)的癥狀。但是，加入香波中的成分提取液的制備還是采用傳統(tǒng)的方法，以至于香波顏色較深，并有一些藥味。隨著提取液的加入定會影響洗發(fā)香波的外觀、藥效等，為洗發(fā)香波的配制帶來了難度。這些還有待于進一步學習借鑒國內(nèi)外先進的中草藥液的提取、制備技術(shù)給予改進［30］。

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10.3969/j.issn.1006－ 9690.2010.03.001

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