龔 敏

(昆明醫(yī)學(xué)院病理生理學(xué)教研室, 云南 昆明 650000.E-mail:gongmincat@sina.com)

目的:建立低等靈長(zhǎng)類動(dòng)物樹鼩視網(wǎng)膜Mǜller細(xì)胞原代培養(yǎng)的技術(shù)方法。方法:將樹鼩大鼠視網(wǎng)膜原代培養(yǎng),換液時(shí)用胰蛋白酶流經(jīng)培養(yǎng)面洗脫神經(jīng)元。免疫組化和電鏡鑒定分次胰蛋白酶清洗后原代培養(yǎng)細(xì)胞的純度。結(jié)果:原代培養(yǎng)的細(xì)胞有大量神經(jīng)元混雜, 經(jīng)多次低濃度胰蛋白酶清洗可將附著在Mǜller細(xì)胞上的神經(jīng)元洗脫,通過電鏡證實(shí)培養(yǎng)的為Mǜller細(xì)胞,GFAP顯示Mǜller細(xì)胞純度可達(dá)95%以上。結(jié)論:分次胰蛋白酶清洗是一種簡(jiǎn)便有效的純化原代視網(wǎng)膜Mǜller細(xì)胞的方法。