馬小燕
(廣西壯族自治區(qū)南溪山醫(yī)院檢驗(yàn)科 廣西桂林 541002)
隨機(jī)選取2008年3月到2010年3月間在本院住院的慢性丙型肝病患者50例。其中男26例、女24例,年齡從36~66歲,平均年齡(50.4±5.7)歲。臨床分型為,慢性丙型肝炎40例,合并肝硬化10例。均為抗HCV陽(yáng)性,HCV-RNA陽(yáng)性,HBsAg陰性,均未接受過(guò)干擾素治療的患者。
抽取患者靜脈血,分離血清,保存于-20℃冰箱待測(cè)。ELISA法檢測(cè)抗HCV:抗HCV的檢測(cè)是臨床診斷急性或慢性丙型肝炎、篩選獻(xiàn)血員的重要手段之一??笻CV陽(yáng)性表明曾經(jīng)或正在感染HCV。抗HCV不能作為HCV感染的早期指標(biāo),也不能判斷病毒感染的階段。檢測(cè)HCV特異性抗體需要用重組抗原。ELISA檢測(cè)抗HCV是最常用的方法。其試劑已經(jīng)經(jīng)歷了幾代??购丝贵w(ANA),抗平滑肌抗體(ASA),抗線粒體抗體(AMA)檢測(cè)采用間接免疫熒光法,抗心磷脂抗體(ACL)檢測(cè)采用ELISA法;抗HCV、HBsAg檢測(cè)采用ELISA法;HCV-RNA檢測(cè)采用實(shí)時(shí)PCR法。
在醫(yī)院住院的50例慢性丙型肝炎患者中男性占26例,女性占24例。其中血清內(nèi)5種自身抗體檢測(cè)中發(fā)現(xiàn),至少有1個(gè)陽(yáng)性的31例,占整個(gè)測(cè)試對(duì)象的62.0%。其中男12例(占男性患者的46.1%)、女性19例(占女性患者的79.2%)。ACL陽(yáng)性最多20例(占40.0%),其次為ANA陽(yáng)性15例,RF陽(yáng)性10例,ASA陽(yáng)性4例,AMA陽(yáng)性1例(2.0%)。女性患者每一種自身抗體陽(yáng)性率均高于男性。
自身抗體陽(yáng)性組和陰性比較,結(jié)果發(fā)現(xiàn)自身抗體陽(yáng)性組較陰性組年齡大,自身抗體陽(yáng)性慢性丙型肝炎的丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(ALT)、天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(AST),普遍高于自身抗體陰性患者。
丙型肝炎病毒屬于黃病毒科。丙型肝炎病毒為直徑55nm的球形顆粒,去包膜后為直徑33nm的核完蛋白包被的核心部分,內(nèi)臺(tái)全長(zhǎng)約9400個(gè)核苷酸的單股正鏈RNA基因組。HCV感染后的血清標(biāo)志物檢測(cè)是丙型肝炎病原學(xué)診斷的基礎(chǔ)。其標(biāo)志物主要包括HCV-RNA和抗HCV。由于血清中HCV的含量相當(dāng)?shù)?盡管有用核酸雜交方法直接檢測(cè)HCV-RNA的報(bào)告,但其陽(yáng)性率較低。目前主要是采用逆轉(zhuǎn)錄cDNA多聚酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)采檢測(cè)HCV-RNA。由于HCV的變異較多,RT-PCR檢出的敏感性受到了引物序列的影響。經(jīng)過(guò)比較和分析,發(fā)現(xiàn)引物取自于核苷酸結(jié)構(gòu)比較穩(wěn)定的區(qū)域PCR的成功率比較高,而取白于變異較多的區(qū)域則RT-PCR的陽(yáng)性串較低。
RT-PCR檢測(cè)HCV-RNA陽(yáng)性常見(jiàn)于HCV的近期感染或持續(xù)感染的病毒血癥期間。因此它是診斷HCV感染的最直接而可靠的標(biāo)志。HCV-RNA檢測(cè)也可用于來(lái)觀察藥物治療的療效考核。有報(bào)告用干擾素治療丙型肝炎時(shí),如ALT不能降至正常范圍,則血清中HCNRNA持續(xù)陽(yáng)性,而HCN-RNA的陰轉(zhuǎn)往往同時(shí)伴有癥狀的緩解。ALT降至正常范圍。經(jīng)過(guò)治療后即使ALT下降,只要血清中HCVBNA末陰轉(zhuǎn),則治療效果往往是暫時(shí)的。
抗HCV也是診斷HCV感染的重要標(biāo)志由于抗HCV檢測(cè)方法簡(jiǎn)便易行,已將到了廣泛的應(yīng)用。新抗HCV檢查技術(shù)是采用多個(gè)HCV的多肽作為抗原建立起來(lái)的第二代ELISA和基因置組蛋白印跡免疫試驗(yàn)。上述方法撿出的抗體為IgG型抗體。該抗體在血中出現(xiàn)較晚,故早期診斷的價(jià)值鉸差,只能作為慢性HCV感染的標(biāo)志。也曾嘗試檢測(cè)血清中IgM型抗HCV,以協(xié)助HCV感染的早期診斷。盡管IgM抗HCV出現(xiàn)的時(shí)間早于IgG型抗HCV,但在慢性HCV感染者,特別是在那些慢性活動(dòng)性肝炎患者的血清中往往也可檢出抗HCV-IgM??笻CV-IgM的出現(xiàn)頻率往往與患者肝損害程度的嚴(yán)重性相關(guān)。因此抗HCV-IgM較抗HCV–IgG更能反映HCV感染考的肝臟受損程度。由于抗HCV-IgM應(yīng)用還不太多,其特異性的臨床意義還有待進(jìn)一步觀察。
丙型肝炎患者檢測(cè)自身抗體,對(duì)治療也有一定的指導(dǎo)作用。自身免疫性肝炎多用免疫抑制劑治療,而丙型肝炎的治療可用干擾素。干擾素在HCV感染者的治療中,可誘發(fā)自身免疫現(xiàn)象,干擾素具有清除病毒的效應(yīng)外,還具有廣泛的生物活性。干擾素治療丙型肝炎的過(guò)程中有可能誘發(fā)自身免疫發(fā)作。干擾素既增強(qiáng)免疫活性,又能增加自身免疫,兩者作用相反。自身抗體低滴度時(shí),以抗病毒作用為主,高滴度時(shí)則抑制免疫反應(yīng)為主。因此,在整個(gè)治療過(guò)程中應(yīng)對(duì)自身抗體滴度進(jìn)行檢測(cè),隨時(shí)對(duì)治療方案做出必要的調(diào)整。
[1]蔣明.自身抗體測(cè)定對(duì)診斷自身免疫性肝病的臨床意義[J].中國(guó)實(shí)用內(nèi)科雜志,2002(1).
[2]梁喜林,鄭曉芙,彭亞丁,等.PCT檢測(cè)HCV-RNA陽(yáng)性與血清HCV抗體的對(duì)比研究[J].武警醫(yī)學(xué),1998(3).