辛向陽
摘要:以無刺黑樹莓和紅樹莓枝條頂芽莖尖為試材,進(jìn)行組培快繁試驗(yàn)。結(jié)果表明,兩種樹莓的最佳啟動(dòng)培養(yǎng)基為Ms+6-BA 0.2mg/L+NAA 0.3mg/L+GA30.5mg/L,培養(yǎng)30天后均可形成3—5個(gè)叢狀芽,長(zhǎng)1—2cm,粗壯;最佳增殖培養(yǎng)基分別為Ms+6-BA1.0mg/L+NAA 0.3mg/L,增殖倍數(shù)分別為3.20和3.11,芽生長(zhǎng)粗壯,分化清晰;最佳生根培養(yǎng)基為Ms+NAA 2.0mg/L,培養(yǎng)30天后生根3—5條,根長(zhǎng)4—6cm,生長(zhǎng)粗壯整齊,移植于細(xì)砂加腐土基質(zhì)中,成活率達(dá)93%以上。
關(guān)鍵詞:無刺樹莓;組培快繁
中圖分類號(hào):S663.2文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼:A文章編號(hào):1002—2910(2009)01—0016—03
樹莓生產(chǎn)長(zhǎng)期采用扦插繁殖會(huì)造成品種退化,品質(zhì)下降,且易感染病害。利用組培對(duì)樹莓優(yōu)良品種進(jìn)行離體快速繁殖,既能保持原品種的品質(zhì),提高產(chǎn)量,又能加快繁殖速度,滿足大面積栽培對(duì)苗木的需求。有關(guān)樹莓的組培技術(shù)研究報(bào)道較多,但是對(duì)無刺紅樹莓和黑樹莓尚未見報(bào)道。本試驗(yàn)利用無刺紅樹莓和黑樹莓的枝條頂芽進(jìn)行莖尖離體培養(yǎng)和快速繁殖,篩選出無刺紅樹莓和黑樹莓莖尖離體培養(yǎng)和快速繁殖的培養(yǎng)基,已培育兩種樹莓苗木1萬多株。
1材料與方法
供試材料為無刺紅樹莓和黑樹莓的枝條頂芽。
啟動(dòng)培養(yǎng)基:以MS為基本培養(yǎng)基(下同),設(shè)附加6-BA(0.2,0.5mg/L)、NAA 0.3mg/L,GA30.5 mg/L等3種生長(zhǎng)調(diào)節(jié)物質(zhì)共2個(gè)處理。增殖培養(yǎng)基:設(shè)附加6-BA(0.1,0.3,0.5。1.0 mg/L)、NAA(0.1,0.3mg/L)2種生長(zhǎng)調(diào)節(jié)物質(zhì)共8個(gè)處理。生根培養(yǎng)基:設(shè)附加NAA(2.0,3.0,4.0mg/L)3個(gè)處理。以上各培養(yǎng)基加瓊脂6.0g/L、蔗糖3.0%,pH值5.8~6.0。接種后的材料在培養(yǎng)室溫度24~26℃、光照12小時(shí)/天,光照強(qiáng)度2500Lx的條件下培養(yǎng)。
2結(jié)果與討論
2.1莖尖的啟動(dòng)培養(yǎng)
將兩種樹莓帶頂芽的枝條剪成長(zhǎng)2.0cm左右枝段,于自來水下沖洗30分鐘,常規(guī)消毒法消毒(75%酒精消毒10秒,再用0.1%升汞消毒12分鐘,用無菌水沖洗5次)后,在超凈工作臺(tái)上用解剖針剝出生長(zhǎng)點(diǎn),切取0.5~0.7mm的莖尖接種到不同啟動(dòng)培養(yǎng)基上,結(jié)果見表1。
從表1可看出,黑樹莓和紅樹莓在不同培養(yǎng)基上處理后均可形成長(zhǎng)1~2cm的芽,啟動(dòng)速度沒有差異,但在培養(yǎng)基處理1上形成了3~5個(gè)叢狀芽,在處理2上只形成1~2個(gè)芽。無刺紅樹莓和黑樹莓最佳啟動(dòng)培養(yǎng)基為MS+6-BA 0.2 mg/L+NAA 0.3 mg/L+GA30.5mg/L。
2.2增殖培養(yǎng)
將莖尖苗單芽莖段轉(zhuǎn)接到8種增殖培養(yǎng)基上培養(yǎng)30天后的調(diào)查結(jié)果見表2。
從表2看出,在NAA濃度一定時(shí),兩種樹莓的增殖率均隨6-BA濃度的增加而不斷提高,但在不同的NAA和6-BA濃度配比培養(yǎng)基上,芽的生長(zhǎng)表現(xiàn)差異較大。黑樹莓最佳繼代培養(yǎng)基為MS+6-BA 0.1 mg/L+NAA0.1mg/L。紅樹莓的最佳繼代培養(yǎng)基為MS+6-BA 1.0mg/L+NAA 0.3mg/L。
2.3生根培養(yǎng)及移栽
新梢長(zhǎng)至4~5cm時(shí),轉(zhuǎn)接到生根培養(yǎng)基上,10天后有根尖長(zhǎng)出,17天根長(zhǎng)2cm左右,培養(yǎng)30天后的生根狀況見表3。
從表3可看出,3種培養(yǎng)基均可生根,隨NAA濃度的提高,根的數(shù)量和長(zhǎng)度增加,但生長(zhǎng)變細(xì)、變?nèi)酰L(zhǎng)短不一,移栽時(shí)容易損傷根系,影響成活率。試驗(yàn)表明,無刺紅樹莓和黑樹莓生根最佳生根培養(yǎng)基為MS+NAA2.0mg/L。
將生根的幼苗取出,洗去瓊脂,用1%的高錳酸鉀溶液消毒3—5分鐘,晾30~60分鐘,移栽于細(xì)砂:腐土為1:3的基質(zhì)中,保持溫度25℃左右,相對(duì)濕度80%以上,成活率可達(dá)到93%以上,苗高15~20cm時(shí)可移植于大田。
3小結(jié)
試驗(yàn)結(jié)果表明,無刺黑樹莓和紅樹莓的最佳啟動(dòng)培養(yǎng)基為MS+6-BA 0.2mg/L+NAA0.3mg/L+GA30.5mg/L;最佳增殖培養(yǎng)基分別為MS+6-BA 0.1mg/L+NAA 0.1mg/L和MS+6-BA 1.0mg/L+NAA 0.3mg,/L;最佳生根培養(yǎng)基為MS+NAA 2.0mg/L。生根苗移植于細(xì)砂加腐土的基質(zhì)中,成活率可達(dá)93%以上。
本試驗(yàn)僅以MS作基本培養(yǎng)基對(duì)兩種樹莓進(jìn)行莖尖培養(yǎng)和快速繁殖,莖尖試管苗是否達(dá)到脫毒效果及其對(duì)產(chǎn)量和品質(zhì)的影響,有待繼續(xù)研究。