吳國(guó)智 郝硯英 王 勇 楊 元

摘要:利用花葉玉簪的側(cè)芽為外植體,研究了其工廠化組培育苗技術(shù)。結(jié)果表明:芽誘導(dǎo)較理想的培養(yǎng)基為MS+6-BA 3.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L;MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L作為繼代培養(yǎng)基效果最好,可以保持原來(lái)的花葉特征;以MS+NAA 0.2 mg/L作為花葉玉簪的生根培養(yǎng)基,生根數(shù)較多;以蛭石∶珍珠巖=5∶1配比的成活率為最高,生長(zhǎng)勢(shì)也較強(qiáng)。

關(guān)鍵詞:花葉玉簪;組織培養(yǎng);育苗技術(shù)

中圖分類(lèi)號(hào):S682.1+9文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼:A DOI編碼:10.3969/j.issn.1006-6500.2009.05.024

Study on Industrialized Seedling Technique of Tissue Culture in Hosta plantagineu

WU Guo-zhi,HAO Yan-ying,WANG Yong,YANG Yuan

(Tianjin Flower Garden,Tianjin 300112,China)

Abstract:Rapid seedling technique via tissue culture in Hosta plantagineu was studied by lateral bud as explant in the paper. The results showed that the appropriate medium for bud induction was MS+6-BA 3.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L; the best medium for successive transfer culture was MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L, it could keep the primary character of flower and leaf; the root number was more in the rooting medium with MS+NAA 0.2 mg/L; the survival rate was high and the growth vigor was strong in the combination of vermiculite and pearl rock =5∶1 .

Key words:Hosta plantagineu;tissue culture;seedling technique

花葉玉簪(Hosta plantagineu)為多年生宿根花卉,是百合科著名觀葉植物玉簪的變種,對(duì)喜光花卉有極強(qiáng)的互補(bǔ)性,是園林綠化的優(yōu)良品種。花葉玉簪的引進(jìn)與推廣,極大地提高了其觀賞效果,豐富了天津市園林綠化的景觀色彩。該品種株矮喜蔭,復(fù)色葉面,帶褶皺,金邊銀心相互交織,絢麗多彩的葉片呈現(xiàn)出魔幻般的花團(tuán)錦簇。在城市高大樓群的背側(cè)、立交橋下、庭院大樹(shù)遮蔭處、樹(shù)籬邊等喜陽(yáng)花卉生長(zhǎng)不利的地方均可種植。裝盆后,可登堂入室,客廳、書(shū)房、大廳、會(huì)議室、窗臺(tái)上均可用它來(lái)點(diǎn)綴、裝飾,花葉玉簪的花還可散發(fā)出淡淡幽香,高雅不凡。

花葉玉簪常規(guī)的繁殖方法主要是通過(guò)分株,增殖率低,僅為3～5倍左右,短期內(nèi)要形成大規(guī)模的生產(chǎn)困難較大,如果引進(jìn)種苗,價(jià)格又很高。采用組織培養(yǎng)的繁殖方法,可以很好地解決上述難題[1],但通過(guò)花蕾誘導(dǎo)愈傷組織后形成的芽有變異現(xiàn)象發(fā)生,有些失去了原來(lái)的花葉特征,而由側(cè)芽直接誘導(dǎo)產(chǎn)生的不定芽性狀穩(wěn)定,基本沒(méi)有發(fā)現(xiàn)變異,保留著原來(lái)的花葉特征,在短期內(nèi)獲得了數(shù)以萬(wàn)計(jì)的組培苗,為花葉玉簪的大面積推廣打下了堅(jiān)實(shí)的基礎(chǔ)。本試驗(yàn)利用花葉玉簪的芽為外植體,研究了工廠化組培育苗技術(shù),提高了花葉玉簪的繁殖系數(shù)。

1材料和方法

1.1材料

1.1.1品種法蘭西、甜心、金冠。

1.1.2外植體選取花葉玉簪未出土的側(cè)芽和和花蕾作為外植體。

1.2方法

1.2.1無(wú)菌材料的獲得將側(cè)芽的外層皮及花蕾的外苞葉剝掉,自來(lái)水沖洗10 min后,放入漂白粉消毒液處理30 min,取出置入0.1%升汞溶液消毒10 min,無(wú)菌水洗3次,切取芽長(zhǎng)0.8～1 cm,花蕾縱切成4塊,分別接種在不同激素水平的芽和愈傷組織誘導(dǎo)培養(yǎng)基上。

1.2.2培養(yǎng)基和培養(yǎng)條件芽和愈傷組織誘導(dǎo)、繼代培養(yǎng)和生根培養(yǎng)均以MS為基本培養(yǎng)基,附加不同濃度的細(xì)胞分裂素和生長(zhǎng)素。蔗糖30 g/L,瓊脂5 g/L,培養(yǎng)溫度為25 ℃左右。外植體接種后,先進(jìn)行暗培養(yǎng)30 d,誘導(dǎo)出愈傷組織和分化出不定芽后,再轉(zhuǎn)到光照培養(yǎng),光照強(qiáng)度為1 000～1 500 lx,光照時(shí)間12 h/d。

1.2.3煉苗基質(zhì)的選擇蛭石+珍珠巖的3種比例為5∶1,3∶1,1∶1。草炭土+珍珠巖的 3種比例為8∶1,5∶1,2∶1。

2結(jié)果與分析

2.1不同激素水平對(duì)芽和愈傷組織誘導(dǎo)的影響

外植體接種在誘導(dǎo)培養(yǎng)基上,經(jīng)過(guò)30 d的暗培養(yǎng)后,芽基部不斷分化出不定芽,花蕾則形成小突起狀的愈傷組織。繼續(xù)進(jìn)行光照培養(yǎng)15 d,不定芽由白色變?yōu)榫G色,花蕾形成的愈傷組織也逐漸不斷分化出叢生芽。不同激素水平對(duì)芽和愈傷組織的誘導(dǎo)結(jié)果見(jiàn)表1。

從表1可看出,芽誘導(dǎo)的較理想培養(yǎng)基為MS+6-BA 3.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L;花蕾誘導(dǎo)愈傷組織的培養(yǎng)基則以MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L為最好。

2.2繼代培養(yǎng)階段,不同激素水平對(duì)芽分化數(shù)量、質(zhì)量的影響

外植體通過(guò)不定芽誘導(dǎo),產(chǎn)生了大量不定芽,但不定芽的數(shù)量多少又直接影響到芽的質(zhì)量。如果芽分化過(guò)旺,不定芽纖細(xì),無(wú)效芽增加,影響到下一步的生根培養(yǎng);而芽分化過(guò)少,芽雖生長(zhǎng)健壯,但達(dá)不到組培擴(kuò)繁基數(shù)的需要。通過(guò)繼代培養(yǎng)基的篩選試驗(yàn),找到了芽分化的最佳培養(yǎng)基,結(jié)果見(jiàn)表2。從表2得知,處理3(MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L)作為繼代培養(yǎng)基,效果最好,不但其分化的芽較多,而且質(zhì)量高,健壯,有效芽比例達(dá)100%,完全符合花葉玉簪通過(guò)組培方法提高的繁殖系數(shù),實(shí)現(xiàn)工廠化育苗的需要。

2.3不同生長(zhǎng)素組合對(duì)生根的影響

切取繼代瓶?jī)?nèi)的健壯芽,接種于含有不同濃度生長(zhǎng)素的培養(yǎng)基上,培養(yǎng)25 d,統(tǒng)計(jì)生根數(shù)量和生根率,結(jié)果見(jiàn)表3。

由表3 可見(jiàn),以MS+NAA 0.2 mg/L作為花葉玉簪的生根培養(yǎng)基,效果最好,根數(shù)較多,生根率達(dá)89%。

2.4不同基質(zhì)配比對(duì)花葉玉簪移栽成活率及生長(zhǎng)勢(shì)的影響

當(dāng)生根苗根長(zhǎng)0.5～1.5 cm時(shí),取出移栽,30 d后,統(tǒng)計(jì)不同基質(zhì)配比對(duì)小苗移栽的成活率及生長(zhǎng)勢(shì),結(jié)果見(jiàn)表4。

從表4可見(jiàn),花葉玉簪小苗移栽時(shí),蛭石+珍珠巖和草炭土+珍珠巖兩種組合的小苗移栽的成活率及生長(zhǎng)勢(shì)相差不大,其中以蛭石+珍珠巖=5∶1配比的成活率為最高,生長(zhǎng)勢(shì)也較強(qiáng);草炭土+珍珠巖=5∶1配比的移栽成活率也較高,生長(zhǎng)勢(shì)最強(qiáng)。

3討論

(1)花葉玉簪在遺傳、生理、組織學(xué)上與常規(guī)玉簪品種有一定的差異?？刂迫~片斑紋性狀的基因在激素刺激下容易發(fā)生變異而失去花葉特征。因此,在組織培養(yǎng)過(guò)程中,取材部位和激素種類(lèi)、濃度控制非常重要。在本研究中,花葉玉簪芽和花蕾誘導(dǎo)出叢生芽后,在繼代培養(yǎng)中,我們發(fā)現(xiàn)通過(guò)花蕾誘導(dǎo)愈傷組織后形成的芽有變異現(xiàn)象發(fā)生,有些失去了原來(lái)的花葉特征,而由芽直接誘導(dǎo)產(chǎn)生的不定芽性狀穩(wěn)定,基本沒(méi)有發(fā)現(xiàn)變異,保留著原來(lái)的花葉特征。

(2)在組培繁殖過(guò)程中,法蘭西、甜心、金冠等3個(gè)花葉玉簪品種芽的分化率略有一定的差異。因此,應(yīng)根據(jù)品種和瓶苗的生長(zhǎng)情況調(diào)整細(xì)胞分裂素和生長(zhǎng)素使用的濃度。

(3)出瓶苗中有少數(shù)苗的根發(fā)育較差或根莖處有愈傷化,會(huì)影響新根的發(fā)生,可用利刀切除,淺植于蛭石床上2～3周,待新根長(zhǎng)好后再移栽。一般4—5月份下地栽種或上盆的小苗,經(jīng)過(guò)精心養(yǎng)管,翌年即可開(kāi)花。

(4)花葉玉簪通過(guò)組織繁殖可以在短期內(nèi)獲得數(shù)十萬(wàn)株小苗,繁殖系數(shù)極高。目前,我們通過(guò)側(cè)芽直接誘導(dǎo)產(chǎn)生不定芽的方法已成功生產(chǎn)出30萬(wàn)株小苗,滿(mǎn)足了我市的綠化工程用苗和盆栽花卉生產(chǎn)的需要,取得了很高的經(jīng)濟(jì)效益和社會(huì)效益。

參考文獻(xiàn):

[1] 郝硯英,趙哀梅,王勇,等.花葉玉簪的組織培養(yǎng)與快速繁殖技術(shù)研究[J].天津農(nóng)業(yè)科學(xué),2006,12 (2):18-19.