摘要：生豬的免疫抗體水平評估是動物疫控部門最重要的工作，在非洲豬瘟常態(tài)化防控形勢下，所有豬場都強化了生物安全措施，嚴禁外人進入，動物疫控部門進入豬場采集血樣進行生豬免疫抗體監(jiān)測變得不太現(xiàn)實。近年來，筆者對生豬的免疫抗體監(jiān)測只限于能自主采樣的較大規(guī)模豬場，其余豬場成了監(jiān)測的盲區(qū)。為解決這一問題，筆者以豬瘟為例，探索采用屠宰生豬血清監(jiān)測轄區(qū)內(nèi)生豬免疫抗體水平的方法，獲得了成功，使得全面監(jiān)測生豬的免疫抗體成為可能。

關鍵詞：屠宰；血清；監(jiān)測；免疫抗體；方法

生豬的免疫抗體水平評估是動物疫控部門最重要的工作，每年春秋兩季集中免疫后，都要隨機抽取部分豬場采集血樣，評估重大動物疫病免疫效果，在非洲豬瘟常態(tài)化防控形勢下，所有豬場都強化了生物安全措施，動物疫控部門進入豬場采集血樣進行生豬免疫抗體監(jiān)測，要遵守嚴格的生物安全規(guī)定，所有進入豬場的工作人員必須經(jīng)過隔離、淋浴、更衣、消毒等程序，走完這一流程需要3～5 d時間，否則，確實存在生物安全風險[1]。近年來，推行重大動物疫病免疫“先打后補”政策，要求對所有申請豬場的25 %進行免疫效果評估，生豬的免疫效果評估工作量大幅增加。就算是按洗消程序進入了豬場，采集血樣也不輕松，保定生豬是高強度的體力活，耳靜脈采血速度慢，前腔靜脈采血技術要求高。更為甚者，個別豬場以生物安全為借口，逃避主管部門的檢查、監(jiān)管。事實上，近5年來，筆者沒有進入過豬場采樣。免疫抗體監(jiān)測只針對具有較強技術能力、能自主采樣的較大規(guī)模豬場，而不具備采樣能力的大多數(shù)豬場成為監(jiān)測的盲區(qū)，國內(nèi)其他地區(qū)的情況也大致如此。上級動物疫控部門在開展疫病凈化、無疫小區(qū)評估時，也只是采用視頻監(jiān)督方法，由豬場技術人員采樣[2]。

1 材料與方法

1.1 屠宰生豬血清采集

在某生豬定點屠宰場每次隨機選取2～3個豬場的生豬，調(diào)取產(chǎn)地檢疫證明，與屠宰生產(chǎn)同步，安排3名采樣人員，位于放血槽前端，待工作人員刺殺生豬后，立即從放血孔用一次性水杯接血液適量，迅速倒入50 mL或20 mL塑料離心管，每個豬場采10份左右，編號標記，室溫靜置過夜，離心，每份取血清5 mL以上。共12個豬場，120份血樣。

1.2 主要儀器、試劑

離心機、酶標儀等，豬瘟抗體阻斷ELISA試劑盒，愛得士公司生產(chǎn)，市購。

1.3 豬瘟抗體檢測

用阻斷ELISA方法進行豬瘟抗體檢測，具體按說明書進行操作，讀取并記錄OD值，計算阻斷率。

2 結果與分析

2.1 阻斷率情況

用A—L依次代表12個豬場，1～12為各豬場血樣序號，阻斷率情況見表1。阻斷率是直接表明血清中的抗體含量，阻斷率越高，說明血清中抗體含量越高，阻斷率極低或為負數(shù)，表明血清中不含相應抗體。

2.2 陽性率分析

按說明書判定標準，阻斷率40 %以上為陽性，陽性血清共84份，占比70 %，阻斷率30 %以下為陰性，陰性血清共24份，占比20 %，12份血樣介于30 %～40 %之間，為可疑樣品。12個豬場中9個豬場陽性率70 %以上，占比75 %。各豬場情況見表2。

2.3 離散度分析

離散度也是評價免疫效果的另一個重要指標，離散度越低，表明抗體的整齊度越高，理想的情況是阻斷率高、離散度低，表明每頭豬的抗體水平都高，免疫效果理想，如L、I豬場的情況。在阻斷率高的情況下，種豬群的離散度最好在0.3以下，肥豬0.5以下[3]，本次檢測為肥豬血清，有10個豬場達到這一標準。如果阻斷率低，離散度分析就沒有意義，如B豬場情況。各豬場阻斷率離散度情況見圖1。

2.4 免疫時間調(diào)查

采樣后，利用檢疫信息平臺，找到相應豬場聯(lián)系方式，電話調(diào)查最后一次免疫豬瘟的大致時間，從采樣時間推算，免疫后到出欄采樣間隔4～7個月（表3）。根據(jù)觀察，本次試驗所涉及生豬普遍在150 kg以上，有的豬場出欄的生豬接近或超過200 kg，可能與當前生豬的價格低迷和波動導致不同程度的壓欄有關，所以，筆者認為所調(diào)查情況基本屬實。

3 結論

第一，所有12個豬場中，有9個豬場豬瘟抗體陽性率在70 %以上，能提供有效保護，2個能提供部分保護，1個免疫失?。ɑ驔]有免疫），豬場陽性率達75 %；從離散度分析，除B場外，都接近或0.5以下；最后一次免疫4～7個月后，一直到生豬出欄均能提供有效保護。綜合以上情況表明，豬瘟的免疫密度高，達到100 %，免疫效果較好。但免疫失敗的情況還是存在，有必要做進一步調(diào)查研究，查找免疫失敗的原因，加以改進，否則，還是有疫情散發(fā)風險。

第二，通過本次豬瘟抗體檢測，表明用屠宰生豬血樣監(jiān)測免疫抗體水平是可行的，在非洲豬常態(tài)化防控情況下，具有重要的推廣應用價值。

4 討論

第一，在屠宰生產(chǎn)線上采集生豬血樣，簡單易行，在生產(chǎn)流水線上采集10頭左右血樣不到5 min，只需3人可完成，所花時間不到活豬采血的1/10，可大幅節(jié)省人力、物力成本，避免生物安全風險。在實際工作中，動物疫控部門可先隨機選定要監(jiān)測的豬場，在屠宰場采集其出欄肥豬的血樣，從而實現(xiàn)對轄區(qū)內(nèi)所有豬場的各種疫病抗體水平監(jiān)測。各豬場也可采用本方法，評估其免疫效果。

第二，前期，筆者就生豬的免疫情況做過調(diào)研，豬場不論規(guī)模大小，在所有病種中，豬瘟是免疫密度最高的[4]，所以本次試驗以豬瘟為例。我國的豬瘟疫苗質(zhì)量可靠，試驗表明，免疫后4～7個月，均能提供有效保護，可能是所有病種中有效保護時間最長，在制定免疫程序時，可靠前安排豬瘟免疫。生豬的重大動物疫病免疫效果評估與“先打后補”主要針對口蹄疫，其監(jiān)測方法有待進一步探索、驗證。

第三，當前，各級動物疫控部門正在大力推動疫病凈化和無疫小區(qū)建設工作，各豬場在自評期間，可多批次采集出欄生豬血樣進行檢測，提高成功率。因為采樣方便，動物部門也可進行較長時期、多批次監(jiān)測，以提高評估的準確性。

第四，因本次是隨機采樣，涉及的豬場不在轄區(qū)內(nèi)，也不熟悉，免疫劑量、疫苗品種、母源抗體情況等不方便做全面調(diào)查，各豬場有關免疫失敗的情況或多或少存在，不便于做進一步反饋、分析。

第五，在流水線上采樣，應采剛從放血孔冒出的新鮮血液，如果混入生豬體表污水、污物等會造成血樣很快腐?。换烊胪僖旱葧斐扇苎?，都不能得到合格的血清樣品。從放血孔接到的血液也會迅速凝固（如果凝成了血塊，不方便倒入，但只要能裝入離心管，不會影響血清析出和檢測結果），要盡快倒入離心管，須3人以上協(xié)作。離心管以50 mL較好，方便快速倒入血液，20 mL以下不宜采用。

第六，在屠宰生產(chǎn)線上接取血樣時，生豬處于放血掙扎期，生豬吊在高處，掙扎激烈，且有掉落風險，須注意人身安全，并要求線上工人配合。接取血液時，筆者采用1.5 m以上長桿，前端設一圓圈，剛好將一次性水杯固定，方便又安全。

致謝：本試驗由湖南匯宏實業(yè)有限公司提供試驗生豬并全力支持采樣，特此致謝。

參考文獻：

[1] 劉志偉，何斌，楊永平，等.豬場非洲豬瘟防控之人員管理[J].豬業(yè)科學，2022，39（4）：42-44.

[2] 楊耀，王子堅，崔王芳，等.高寒牧區(qū)蕨麻豬豬瘟、口蹄疫免疫抗體研究[J].中國動物保健，2022，24（12）：13-14.

[3] 林純潔，盧明文，張文通，等.規(guī)模豬場的豬瘟免疫抗體檢測及免疫預防效果[J].浙江畜牧獸醫(yī)，2017，42（6）：5-8.

[4] 汪金發(fā)，成瓊，王劍，等.非洲豬瘟常態(tài)化防控下中小規(guī)模豬場免疫情況調(diào)查與分析[J].中國動物保健，2024，26（9）.