摘要：尼帕病毒性腦炎是近年來發(fā)現(xiàn)的對(duì)公共衛(wèi)生安全構(gòu)成嚴(yán)重威脅的人畜共患病之一。由副黏病毒科亨尼帕病毒屬的尼帕病毒引起，果蝠為主要攜帶者，馬、羊、犬、豬等動(dòng)物以及人類均可被感染。本文重點(diǎn)綜述了尼帕病毒性腦炎的病原特點(diǎn)、致病機(jī)制、發(fā)病癥狀、診斷與防治，以期對(duì)國(guó)內(nèi)尼帕病毒性腦炎的防范提供參考。

關(guān)鍵詞：尼帕病毒性腦炎；防控

尼帕病毒性腦炎是一種以果蝠為天然宿主并可在人類及哺乳動(dòng)物之間傳播的嚴(yán)重傳染性疾病，在人類中可引起致命的腦炎，并可通過受污染的食物或直接接觸病人實(shí)現(xiàn)人傳人[1]。該病的臨床表現(xiàn)從亞臨床感染到嚴(yán)重的呼吸道感染和致命的腦炎。該病可在馬、羊、犬、豬等動(dòng)物中引起嚴(yán)重的致死性疾病，給農(nóng)業(yè)生產(chǎn)造成嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失[2]。病原屬于單核細(xì)胞增多癥病毒，該屬其他致命病毒還包括亨德拉病毒、埃博拉病毒和馬爾堡病毒[3]。1998年在馬來西亞報(bào)告了尼帕病毒性腦炎疫情的第一次暴發(fā)，病毒最初是從甘榜雙溪地區(qū)西南的尼帕村的一名患者身上分離出來的，因此，它被命名為尼帕病毒[4]。2001年、2007年、2018年和2023年印度分別報(bào)告了尼帕病毒性腦炎疫情，有報(bào)道稱印度疫情來源于果蝠。所有疫情都報(bào)道了高死亡率，在人類中，感染迅速發(fā)展惡化，導(dǎo)致嚴(yán)重的呼吸系統(tǒng)疾病以及嚴(yán)重的腦炎[5]。針對(duì)該病，目前缺乏有效的抗體或治療藥物。

1 病原

尼帕病毒屬副黏病毒科，亨尼帕病毒屬，核酸為單股負(fù)鏈不分段RNA，核酸全長(zhǎng)約18.2 Kb，電鏡觀察病毒主要為球形和細(xì)長(zhǎng)形，直徑126～150 nm。病毒有囊膜有纖突，核衣殼呈螺旋對(duì)稱[4]。RNA基因組主要包含6個(gè)基本基因，分別是核衣殼蛋白、磷蛋白、基質(zhì)、融合糖蛋白、附著糖蛋白和長(zhǎng)聚合酶。核衣殼蛋白上覆蓋一層脂質(zhì)膜。核心的基因組RNA與核衣殼蛋白和磷酸化蛋白緊密結(jié)合。有1個(gè)由F（融合）蛋白三聚體和G（附著）蛋白組成的突起，G（附著）蛋白本質(zhì)上是四聚體，并包埋在脂質(zhì)膜內(nèi)[2]。G蛋白通過與保守的哺乳動(dòng)物蛋白家族b1、b2或b3相互作用，幫助病毒附著在宿主細(xì)胞表面[3]。融合蛋白有助于病毒與宿主細(xì)胞膜融合，從而釋放病毒粒子進(jìn)入宿主細(xì)胞。病毒還能誘導(dǎo)腫脹的細(xì)胞與鄰近的細(xì)胞融合形成大量的合胞體。尼帕病毒對(duì)外界環(huán)境的抵抗力較弱，56 ℃溫度條件下，經(jīng)30 min即可被滅活。人工培養(yǎng)病毒優(yōu)選Vero細(xì)胞、RK-13細(xì)胞，人工培養(yǎng)3 d可以產(chǎn)生細(xì)胞病變[2]。

2 流行特點(diǎn)

尼帕病毒性腦炎是一種人畜共患傳染病，最初由動(dòng)物傳染給人類，再由人類傳染給人類。該病可以通過豬和果蝠傳播。人類可因食用被感染的豬或果蝠污染的食物感染[1]。病毒還可以通過感染生物的尿液和唾液傳播到人體。因此，被感染動(dòng)物的尿液和被唾液污染的水果也是重要的傳播途徑[2]。蝙蝠也會(huì)將唾液或分泌物留在樹上，因此在爬樹時(shí)可以感染人類。該病可通過人類呼吸道分泌物傳播，是人傳人的主要來源之一[3]?；颊呖赏ㄟ^呼吸道飛沫、尿液、唾液等傳播。

3 致病機(jī)制

在感染初期，病毒主要在上皮細(xì)胞中增殖，特別是在細(xì)支氣管、支氣管甚至肺泡[4]。由于感染可導(dǎo)致呼吸道上皮腫脹而分泌細(xì)胞因子，最終引起急性呼吸窘迫癥候群發(fā)生[5]。在感染后期，氣管上皮細(xì)胞分泌白細(xì)胞介素、集落刺激因子等炎癥介質(zhì)[1]。病毒從呼吸道上皮細(xì)胞感染內(nèi)皮細(xì)胞，隨著感染的發(fā)展，病毒可以進(jìn)入血液。除了呼吸系統(tǒng)、消化系統(tǒng)和排泄系統(tǒng)，大腦和其他器官也可有病毒增殖，從而導(dǎo)致多器官衰竭。在倉(cāng)鼠動(dòng)物模型中，據(jù)報(bào)道白細(xì)胞也可能被病毒感染，導(dǎo)致致命后果[5]。病毒通過大腦的脈絡(luò)叢血管進(jìn)入中樞神經(jīng)系統(tǒng)。由于感染，血腦屏障可能被破壞，最終導(dǎo)致神經(jīng)系統(tǒng)損傷。在人類中，感染的中樞神經(jīng)系統(tǒng)可能含有非活性病毒顆粒，這可能導(dǎo)致壞死[1]。病毒可通過嗅球傳播至整個(gè)腹側(cè)大腦皮層[1]。

4 臨床癥狀

病毒的主要宿主是翼蝠家族的果蝠。在某些情況下，中間宿主（豬）可以將疾病傳播給人類。與人類相比，豬的呼吸窘迫更為嚴(yán)重。這種病毒是導(dǎo)致呼吸系統(tǒng)和神經(jīng)系統(tǒng)嚴(yán)重受損的罪魁禍?zhǔn)住＝佑|病毒后，需4～14 d才會(huì)出現(xiàn)癥狀，因此，疾病潛伏期需4～

14 d[5]。

第一，人類的癥狀。人類感染早期癥狀表現(xiàn)為發(fā)燒、嘔吐、頭痛、咳嗽、咽喉痛和肌肉酸痛。后期可發(fā)展為敗血癥并伴有腎臟系統(tǒng)損害，還可導(dǎo)致腸黏膜出血[3]。另外，部分病人可能會(huì)出現(xiàn)呼吸困難，非典型肺炎和急性呼吸困難。隨后出現(xiàn)嚴(yán)重的神經(jīng)癥狀，如定向障礙、嗜睡、神經(jīng)錯(cuò)亂、癲癇等，出現(xiàn)神經(jīng)癥狀幾天后病人昏迷和死亡[4]。病愈后會(huì)留有抽搐和性格變化以及某些其他神經(jīng)系統(tǒng)疾病[2]。

第二，動(dòng)物的癥狀。豬以呼吸和中樞神經(jīng)癥狀為主，可導(dǎo)致豬呼吸道和腦炎綜合征，感染初期表現(xiàn)為急性體溫升高，咳嗽、呼吸急促，豬群內(nèi)迅速傳播，發(fā)病率可接近100 % [2]。后期由于神經(jīng)系統(tǒng)的受損，表現(xiàn)肌肉抽搐，后腿無力，震顫，以及面癱或痙攣性麻痹[3]。在公豬或普通野豬和成年母豬中，可表現(xiàn)眼球震顫，視力下降，運(yùn)動(dòng)障礙甚至癲癇[5]。犬感染表現(xiàn)發(fā)熱、眼鼻分泌物增多，呼吸困難，可伴發(fā)腎小球和小管壞死[3]。貓科動(dòng)物感染導(dǎo)致多個(gè)器官可發(fā)生內(nèi)皮細(xì)胞出現(xiàn)合胞體和血管異常。在其他幾個(gè)物種，如豚鼠、倉(cāng)鼠和非洲綠猴，當(dāng)他們實(shí)驗(yàn)感染后，出現(xiàn)中樞神經(jīng)系統(tǒng)的實(shí)質(zhì)病變以及多個(gè)器官的嚴(yán)重血管異常和體重減輕[1]。

5 診斷

電鏡觀察、病毒的分離培養(yǎng)及血清學(xué)試驗(yàn)和分子生物檢查，是確診人類和動(dòng)物患病的主要手段。由于尼帕病毒的危害性，需要在生物安全級(jí)別4（BSL-4）的實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行。

第一，電鏡觀察。用薄層電子顯微鏡，觀察細(xì)胞培養(yǎng)物中的病毒粒子，樣品需經(jīng)負(fù)染色處理后，觀察到球形和細(xì)長(zhǎng)形病毒形態(tài)，做出初步判斷[2]。

第二，病毒分離培養(yǎng)。無菌條件下采取腦、肺、腎等病變明顯組織，制成10 %的病料懸液，2 000 r/min離心10 min后取上清接種Vero細(xì)胞，3 d內(nèi)觀察接種細(xì)胞的細(xì)胞病變[4]。在單層Vero細(xì)胞中尼帕病毒的合胞體明顯比亨尼帕病毒合胞體大。尼帕病毒的合胞體中含細(xì)胞核數(shù)量較多，通過合胞體的不同表現(xiàn)對(duì)病毒進(jìn)行比較和鑒定。

第三，PCR序列分析。目前尼帕病毒的基因診斷方法主要有如下幾種，一是巢式引物擴(kuò)增編碼病毒基質(zhì)蛋白的M基因的RT-PCR法，以測(cè)定病料中的病毒M基因序列[5]。另一種是擴(kuò)增編碼核蛋白的N基因PCR法，但需要先對(duì)P基因進(jìn)行RT-PCR擴(kuò)增和鑒定[2]。梁潔怡等建立了快速檢測(cè)尼帕病毒的實(shí)時(shí)熒光RT-PCR方法。國(guó)家外來動(dòng)物疫病研究中心建立了檢測(cè)尼帕病毒的國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)RT-PCR診斷技術(shù)，可檢測(cè)到最低170 Kb的RNA 模板，陽(yáng)性檢出率的重復(fù)性和穩(wěn)定性均達(dá)100 %[2]。

第四，ELISA試驗(yàn)。馬來西亞國(guó)家豬病監(jiān)督計(jì)劃中，采用捕獲ELISA方法檢測(cè)早期感染尼帕病毒病例的IgM。使用γ射線輻射尼帕病毒抗原，并使用一種A蛋白+HRPO結(jié)合物檢測(cè)尼帕病毒抗體的間接ELISA方法，敏感性和特異性可達(dá)95 %[1]。

6 防治

目前尚無特異性預(yù)防和治療尼帕病毒性腦炎藥物、疫苗、血清制品。中國(guó)科學(xué)院武漢病毒研究所單超與袁志明團(tuán)隊(duì)，聯(lián)合上海免疫與感染研究所藍(lán)佳明團(tuán)隊(duì)開發(fā)了以缺陷型黑猩猩腺病毒為載體的重組疫苗和以質(zhì)粒為載體的DNA疫苗，目前尚未投入臨床[4]。美國(guó)摩德納公司與美國(guó)國(guó)家過敏和傳染病研究所疫苗研究中心合作開發(fā)的尼帕病毒候選疫苗mRNA-1215已經(jīng)完成首例受試者給藥[2]。動(dòng)物臨床上可以選用黃芪多糖、大蒜素配合干擾素可降低致死率。根據(jù)農(nóng)業(yè)農(nóng)村部第573號(hào)公告《一、二、三類動(dòng)物疫病病種名錄》，尼帕病毒性腦炎確定為一類動(dòng)物疫病。且鑒于國(guó)內(nèi)目前尚未發(fā)生該病疫情，為防止該病傳入我國(guó)，實(shí)際工作中必須加強(qiáng)進(jìn)境動(dòng)物監(jiān)督檢疫，出入境檢疫部門做好進(jìn)境動(dòng)物及動(dòng)物產(chǎn)品檢疫的審批、預(yù)檢，對(duì)有輸入風(fēng)險(xiǎn)的相關(guān)國(guó)家和地區(qū)進(jìn)行檢疫證書確認(rèn)和議定書磋商；嚴(yán)格進(jìn)境動(dòng)物專設(shè)口岸、隔離場(chǎng)、動(dòng)物產(chǎn)品加工存放場(chǎng)所設(shè)定；一旦確診或疑似尼帕病毒性腦炎病例，要立即按照《進(jìn)出境重大動(dòng)物疫情處置預(yù)案》進(jìn)行處置，防止疫情傳入我國(guó)。

7 結(jié)論

尼帕病毒性腦炎感染的常見宿主動(dòng)物是豬，主要通過呼吸道飛沫、豬的分泌物和糞便等進(jìn)行傳播。此外，飛沫傳播到水果表皮也可能導(dǎo)致尼帕病毒的傳播。為了預(yù)防尼帕病毒的感染，需要采取一系列措施，包括避免接觸野生動(dòng)物或被野生動(dòng)物污染的物品，注意個(gè)人衛(wèi)生，勤洗手、生的水果洗凈去皮、不吃生的可能被污染的食物，注意個(gè)人防護(hù)，特別是醫(yī)護(hù)人員和接觸動(dòng)物的飼養(yǎng)員、獸醫(yī)等。同時(shí)，農(nóng)業(yè)方面也需要改進(jìn)果園及農(nóng)場(chǎng)生態(tài)防護(hù)設(shè)施，科學(xué)養(yǎng)殖畜禽，提高畜禽的防病能力。

參考文獻(xiàn)：

孫燕群.尼帕病毒空間分布及傳播風(fēng)險(xiǎn)預(yù)測(cè)研究[D].軍事科學(xué)院，2023.DOI：10.27193/d.cnki.gjsky.2023.000165. [1]

徐蛟，王英麗，王瑩，等.基于RAA-CRISPR/Cas12a快速檢測(cè)尼帕病毒方法的建立[J].中國(guó)動(dòng)物檢疫，2023，40（10）：95-99+111. [2]

辛雨.印度暴發(fā)致命尼帕病毒[N].中國(guó)科學(xué)報(bào)，2023-09-22（002）.DOI：10.28514/n.cnki.nkxsb.2023.002226. [3]

王瓊，莫若，張穎，等.尼帕病毒截短G蛋白的原核表達(dá)及間接ELISA檢測(cè)方法的建立[J].中國(guó)獸醫(yī)科學(xué)，2023，53（10）：1223-1231.DOI：10.16656/j.issn.1673-4696.2023.0180. [4]

李政蓉.尼帕病毒性腦炎重組狂犬病病毒載體滅活疫苗和細(xì)菌樣顆粒疫苗的構(gòu)建與免疫原性研究[D].吉林大學(xué)，2023.DOI：10.27162/d.cnki.gjlin.2023.000232. [5]