摘要 為了解鼓槌石斛、細(xì)莖石斛和球花石斛種子無(wú)菌播種快繁技術(shù)，以3種石斛種子為研究對(duì)象，探討不同培養(yǎng)基、激素種類以及濃度配比對(duì)3種石斛種子無(wú)菌萌發(fā)、原球莖增殖和種苗壯苗生根的影響。結(jié)果表明：3種石斛種子的萌發(fā)率最高均在1/2MS基礎(chǔ)培養(yǎng)基和添加10%馬鈴薯的1/2MS培養(yǎng)基上；鼓槌石斛和球花石斛原球莖增殖培養(yǎng)基以1/2MS+10%馬鈴薯+0.5 mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA最佳，細(xì)莖石斛原球莖增殖培養(yǎng)基以1/2MS+10%馬鈴薯+1.0 mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA最佳；鼓槌石斛生根壯苗培養(yǎng)基以1/2MS+0.10 mg/L IBA+10%馬鈴薯+2.0%蔗糖+0.6%瓊脂最佳，球花石斛和細(xì)莖石斛的生根壯苗培養(yǎng)基以1/2MS+0.50 mg/L IBA+10%馬鈴薯+2.0%蔗糖+0.6%瓊脂最佳。

關(guān)鍵詞 石斛屬；無(wú)菌萌發(fā)；原球莖增殖；壯苗生根

中圖分類號(hào) S 567.23 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼 A

文章編號(hào) 0517-6611（2024）20-0155-05

doi：10.3969/j.issn.0517-6611.2024.20.038

開放科學(xué)（資源服務(wù)）標(biāo)識(shí)碼（OSID）：

Rapid Propagation Technique of 3 Kinds of Dendrobium Seeds

LINGHU Ke-nian，YANG Yan-bing，YAN Feng-xia et al

（Key Laboratory of National Forestry and Grassland Administration on Biodiversity Conservation in Karst Mountainous Areas of Southwestern China，Guizhou Academy of Forestry，Guiyang，Guizhou 550005）

Abstract To understand the Dendrbium chrysotoxum，Dendrobium moniliforme and Dendrobium thyrsiflorum seed sterile plant rapid propagation techniques，in this paper，three kinds of Dendrobium seeds as the research object，discusses different types of medium，hormone and concentration ratio of 3 kinds of Dendrobium sterile seed germination，protocorm proliferation and seedling seedling rooting effect.The results showed that the highest germination rate of the 3 Dendrobium seeds was on 1/2MS base culture and 1/2MS medium with 10% potato.Dendrobium chrysotoxum and Dendrobium thyrsiflorum were optimized with 1/2MS +10% potato +0.50 mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA，while Dendrobium moniliforme was optimized with 1/2MS +10% potato +1.0 mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA.The best rooting and seedling medium of Dendrobium chrysotoxum moniliforme was 1/2MS+0.10 mg/L IBA+10% potato +2.0% sucrose +0.6% AGAR，and the best rooting and seedling medium of Dendrobium thyrsiflorum and Dendrobium moniliforme was 1/2MS+0.50 mg/L IBA+10% potato +2.0% sucrose +0.6% AGAR.

Key words Dendrobium spp.;Sterile germination;Protocorm proliferation;Strong seedling rooting

石斛（Dendrobium spp.）是蘭科（Orchidaceae）石斛屬（Dendrobium Sw.）植物的總稱，全世界約有1 500個(gè)原始種，13 600余個(gè)雜交種［1-2］。早期記載我國(guó)共有72種和2個(gè)變種［3］，但隨著新種和新紀(jì)錄的發(fā)現(xiàn)，我國(guó)石斛屬植物已上升至81種，分布在西南、華南等熱帶、亞熱帶地區(qū)以及秦嶺以南各省［4］。石斛莖含有生物堿、多糖、黃酮等多種藥用成分［5］，具有良好的抗腫瘤、抗衰老、抗氧化、降血糖以及提高免疫力等藥用功效［6-8］，是著名的傳統(tǒng)中藥材。同時(shí)，由于石斛種類繁多、花形多樣、花色豐富、花期長(zhǎng)，亦極具觀賞價(jià)值，民間常稱“石斛蘭”，是世界“四大洋蘭”之一［9-11］。

作為附生的蘭科植物，對(duì)環(huán)境要求嚴(yán)［12-13］，高度特化與艷麗的花特征，致使其傳粉受精需要特定形態(tài)昆蟲，自然狀態(tài)下授粉困難，結(jié)實(shí)率低；此外，其種子無(wú)胚乳，需特定的共生菌為其提供營(yíng)養(yǎng)才能正常萌發(fā)，自然更新困難［14-16］。加之人為過(guò)度采挖，受威脅嚴(yán)重，野生資源極度稀少，在《中國(guó)生物多樣性紅色名錄——高等植物卷（2020）》中已有42種石斛被評(píng)估為極危（CR）或?yàn)l危（EN）物種，且2021年9月發(fā)布的《國(guó)家重點(diǎn)保護(hù)植物名錄》中，石斛所有種均列為國(guó)家重點(diǎn)保護(hù)植物。因此，開展石斛擴(kuò)繁技術(shù)研究對(duì)石斛資源保護(hù)意義重大。

目前，石斛主要依靠分株繁殖，繁育能力低下且生長(zhǎng)緩慢，存在繁殖系數(shù)低、周期長(zhǎng)等缺陷［16］。近年來(lái)，隨著組培快繁技術(shù)快速發(fā)展，翅萼石斛、鐵皮石斛等均突破了快速擴(kuò)繁技術(shù)瓶頸，并取得了顯著成效［17-18］，為石斛資源的保育與可持續(xù)利用提供了重要基礎(chǔ)。鑒于此，筆者以鼓槌石斛、細(xì)莖石斛和球花石斛3種石斛種子為材料，探討不同的基礎(chǔ)培養(yǎng)基、天然有機(jī)添加物、激素種類和激素濃度配比對(duì)石斛種子萌發(fā)率、原球莖增殖以及生根壯苗等的影響，旨在通過(guò)快繁技術(shù)建立3種石斛的規(guī)模化技術(shù)體系，為石斛資源的保育與可持續(xù)利用提供科學(xué)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

供試材料來(lái)自貴州省林業(yè)科學(xué)研究院貴州·石斛種質(zhì)資源庫(kù)，是經(jīng)人工授粉后的鼓槌石斛（Dendrobium chrysotoxum）、細(xì)莖石斛（Dendrobium moniliforme）和球花石斛（Dendrobium thyrsiflorum）的蒴果。其中，鼓槌石斛5月中旬開花，7 d后進(jìn)行人工授粉，11月初果實(shí)成熟，孕育期170 d；細(xì)莖石斛6—11月陸續(xù)開花，11月初開花，10 d左右進(jìn)行人工授粉，次年6月中旬果實(shí)成熟，孕育期210 d；球花石斛6月初開花，7 d左右人工授粉，12月初果實(shí)成熟，孕育期160 d。

_{zrqFmMhW+g+SmH8UDWnwgw==}1.2 方法

1.2.1 培養(yǎng)條件。

試驗(yàn)采用MS、1/2MS、B5、1/2B5作為基礎(chǔ)培養(yǎng)基，篩選最優(yōu)基礎(chǔ)培養(yǎng)基后附加一定量的植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑（6-BA、NAA、IAA、IBA）和10%天然有機(jī)附加物（馬鈴薯、香蕉、玉米、大豆），所有培養(yǎng)基均以加入0.5 g/L活性炭、葡萄糖20 g/L（生根為10 g/L）及6 g/L瓊脂作為固定劑，加熱完全融化后調(diào)pH在5.2～5.4，分裝入培養(yǎng)瓶中，每瓶40 mL，用瓶蓋封口，每處理接種20瓶，放置于蒸氣高壓鍋內(nèi)（壓力1.05 kg/cm2，溫度121 ℃，維持20 min）消毒，室溫冷卻后待用。3種石斛種子無(wú)菌萌發(fā)各階段培養(yǎng)基所含天然添加物、激素配比和濃度見(jiàn)表1。

1.2.2 培養(yǎng)環(huán)境。

接種材料各生長(zhǎng)階段的培養(yǎng)在培養(yǎng)室完成，將接種材料置于培養(yǎng)室中每層具2支40 W的日光燈的培養(yǎng)架上培養(yǎng)，培養(yǎng)室溫度維持在（25±2）℃，光照強(qiáng)度30～40 μmol/（m2·s），光照時(shí)間12 h/d。

1.2.3 種子消毒。

建立無(wú)菌培養(yǎng)物時(shí)，外植體表面滅菌關(guān)系到試驗(yàn)成敗，因此在石斛的組培研究中，待果實(shí)漸變?yōu)榈S色時(shí)，剪取成熟未開裂飽滿果實(shí)，先將石斛果實(shí)在自來(lái)水下沖洗3～4 h，乙醇消毒5 min，取出置于10％次氯酸鈉溶液中浸泡5 min，之后用0.1％升汞溶液浸泡5 min，無(wú)菌水沖洗3～4次，無(wú)菌濾紙吸干表面水分，備用。

1.2.4 種子撒播與萌發(fā)。

在超凈工作臺(tái)上無(wú)菌條件下切開果皮，用接種器具將種子撒落于所配制的MS、1/2MS、B5、1/2B5固體瓊脂培養(yǎng)基上，以篩選基礎(chǔ)培養(yǎng)基對(duì)石斛種子萌發(fā)的影響；另將同一批種子分別接種于添加10%天然有機(jī)附加物馬鈴薯、香蕉、玉米和大豆的1/2MS基礎(chǔ)培養(yǎng)上。

1.2.5 原球莖增殖與分化。

將原球莖轉(zhuǎn)接于增殖分化培養(yǎng)基上，基礎(chǔ)培養(yǎng)基選用1/2MS+10%馬鈴薯，并添加不同激素濃度6-BA和NAA（表1），觀察3種石斛原球莖分化增殖情況。

1.2.6 壯苗生根。

當(dāng)種子萌發(fā)培養(yǎng)基中石斛原球莖長(zhǎng)出1 cm 及以上的芽后，將其轉(zhuǎn)接至壯苗生根培養(yǎng)基中進(jìn)行生根壯苗試驗(yàn)。培養(yǎng)基配方：以1/2MS+10%馬鈴薯+0.5 g/L活性炭+2.0%蔗糖+0.6%瓊脂為基礎(chǔ)培養(yǎng)基，并添加不同濃度IBA（0.05、0.10、0.50和1.00 mg/L）。

1.3 數(shù)據(jù)處理

采用Excel軟件對(duì)試驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)處理。

萌發(fā)率=（萌發(fā)瓶數(shù)/接種瓶數(shù)）×100%

增殖率=（增殖數(shù)/接種數(shù)）×100%

生根率=（生根數(shù)/接種數(shù)）×100%

2 結(jié)果與分析

2.1 不同培養(yǎng)基對(duì)3種石斛種子萌發(fā)的影響

分別以MS、1/2MS、B5、1/2B5為基礎(chǔ)培養(yǎng)基，將3種石斛種子（圖1：A1、B1、C1）分別接種到不同萌發(fā)基礎(chǔ)培養(yǎng)基D1～D4上（表2），接種后置于光照下培養(yǎng)28 d（圖1：A2、B2、C2），可見(jiàn)種子由白色轉(zhuǎn)為綠色，49 d葉原基長(zhǎng)出，77 d后原球莖長(zhǎng)成小芽（圖1：A3、B3、C3），觀察統(tǒng)計(jì)種子在各培養(yǎng)基中的萌發(fā)情況。結(jié)果發(fā)現(xiàn)（表2），3種石斛種子在1/2MS培養(yǎng)基上萌發(fā)數(shù)和萌發(fā)率最高，鼓槌石斛、球花石斛和細(xì)莖石斛的萌發(fā)率分別達(dá)到85%、65%和100%，以細(xì)莖石斛的萌發(fā)率最高，鼓槌石斛其次，球花石斛最低。

2.2 不同有機(jī)添加物對(duì)3種石斛種子萌發(fā)的影響

以1/2MS為基礎(chǔ)培養(yǎng)基，將鼓槌石斛、球花石斛和細(xì)莖石斛種子分別接種到添加10%的馬鈴薯、香蕉、玉米、大豆4種培養(yǎng)基E1～E4上（表3）。由表3可知，種子接入以上培養(yǎng)基均能萌發(fā)，但萌發(fā)率各有不同。4種有機(jī)添加物中，3種石斛種子在添加10%馬鈴薯的培養(yǎng)基上萌發(fā)數(shù)和萌發(fā)率最高，萌發(fā)率高達(dá)85%及以上。其他3種有機(jī)添加物雖然萌發(fā)率均低于馬鈴薯，但并無(wú)褐化現(xiàn)象，原球莖之間不黏連，有利于轉(zhuǎn)瓶繼代培養(yǎng)。

2.3 不同激素組合對(duì)3種石斛原球莖增殖與分化的影響

以1/2MS為基礎(chǔ)培養(yǎng)基，添加10%馬鈴薯及不同配比的激素組合（6-BA和NAA），將原球莖及帶有葉芽的原球莖轉(zhuǎn)接至不同激素組合及配比的培養(yǎng)基F1～F6上（表4、圖1：A4、B4、C4）。鼓槌石斛培養(yǎng)基上原球莖及芽增殖速度較慢，少量植株有嚴(yán)重褐化現(xiàn)象，其余2種石斛均正常發(fā)育（圖1：A5、B5、C5）。當(dāng)細(xì)胞分裂素6-BA為0.2 mg/L條件下，NAA濃度為0.2 mg/L時(shí)，3種石斛植物的分化增殖率最高，之后隨著NAA濃度的增加，3種石斛植株的分化均呈下降趨勢(shì)，說(shuō)明生長(zhǎng)素NAA的濃度以0.2 mg/L為宜，NAA濃度≥0.5 mg/L有抑制植株分化的趨勢(shì)。

在生長(zhǎng)素NAA為0.2 mg/L條件下（F1～F3），隨著細(xì)胞分裂素6-BA濃度的增加，鼓槌石斛和球花石斛原球莖的增殖數(shù)和增殖率呈下降趨勢(shì)，說(shuō)明0.5 mg/L 6-BA適宜誘導(dǎo)鼓槌石斛和球花石斛增殖；對(duì)細(xì)莖石斛來(lái)說(shuō)，隨著6-BA濃度的增加，原球莖的增殖數(shù)和增殖率呈先上升后下降的趨勢(shì)，6-BA濃度為1.0 mg/L時(shí)，細(xì)莖石斛增殖數(shù)和增殖率最高，表明1.0 mg/L 6-BA濃度能明顯促進(jìn)細(xì)莖石斛增殖。因此，鼓槌石斛和球花石斛原球莖增殖較適宜的培養(yǎng)基為1/2MS+10%馬鈴薯+0.5 mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA；細(xì)莖石斛原球莖增殖適宜的培養(yǎng)基為1/2MS+10%馬鈴薯+1.0 mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA。

2.4 不同激素組合配比對(duì)3種石斛壯苗生根的影響

以1/2MS為基礎(chǔ)培養(yǎng)基，添加10%馬鈴薯及不同濃度IBA，將較大的無(wú)根苗轉(zhuǎn)入生根培養(yǎng)基G1～G4上培養(yǎng)（表5）。觀察G1～G4培養(yǎng)基發(fā)現(xiàn)，培養(yǎng)28 d左右，植株生長(zhǎng)旺盛，3種石斛均長(zhǎng)出2～3條1～3 cm長(zhǎng)的根（圖1：A6、B6、C6）。隨著IBA濃度的增加，3種石斛種苗的生根數(shù)和生根率均呈先上升然后下降趨勢(shì)。當(dāng)IBA為0.10 mg/L時(shí)，鼓槌石斛生根率達(dá)95.0%，高于0.10 mg/L時(shí)，該種的生根率降低，表明低濃度的IBA有利于鼓槌石斛根的產(chǎn)生，高濃度IBA對(duì)根的誘導(dǎo)及萌發(fā)有抑制作用。當(dāng)IBA濃度為0.50 mg/L時(shí)，球花石斛和細(xì)莖石斛生根數(shù)和生根率達(dá)到最高，分別為87.5%和100%，且根呈綠色，根與根之間有相互纏繞，植株生長(zhǎng)旺盛，無(wú)褐化現(xiàn)象，因此鼓槌石斛的生根培養(yǎng)基以1/2MS+0.10 mg/L IBA+10%馬鈴薯+2.0%蔗糖+0.6%瓊脂為宜；球花石斛和細(xì)莖石斛的生根培養(yǎng)基以1/2MS+0.50 mg/L IBA+10%馬鈴薯+2.0%蔗糖+0.6%瓊脂為宜。

3 討論

3.1 基礎(chǔ)培養(yǎng)基對(duì)3種石斛種子萌發(fā)和原球莖誘導(dǎo)的影響

自然條件下的石斛種子存在萌發(fā)困難、萌發(fā)率低等問(wèn)題，隨著無(wú)菌播種快繁技術(shù)的應(yīng)用，越來(lái)越多的石斛屬植物播種技術(shù)趨于成熟。適宜的基礎(chǔ)培養(yǎng)基為種子萌發(fā)提供所需要的養(yǎng)分和水分，是提高種子萌發(fā)率的基礎(chǔ)。在該試驗(yàn)中，用MS、1/2MS、B5和1/2B5培養(yǎng)基誘導(dǎo)鼓槌石斛、球花石斛和細(xì)莖石斛種子萌發(fā)，結(jié)果表明，4種培養(yǎng)基均能促使石斛種子萌發(fā)，但在1/2MS培養(yǎng)基上3種石斛種子的萌發(fā)數(shù)和萌發(fā)率最高。這可能是由于不同培養(yǎng)基所含元素和濃度不同，進(jìn)而影響種子的萌發(fā)率；同時(shí)，與張梅等［19-20］研究結(jié)果相似，低濃度無(wú)機(jī)鹽培養(yǎng)基更能促進(jìn)種子萌發(fā)。

種子萌發(fā)還受天然有機(jī)添加物的影響，適宜的天然有機(jī)添加物能為種子萌發(fā)提供礦質(zhì)元素和養(yǎng)分。該研究結(jié)果表明，接種于分別添加10%馬鈴薯、10%香蕉、10%玉米和10%大豆的4種培養(yǎng)基上的3種石斛種子均能萌發(fā)，其中以添加10%馬鈴薯培養(yǎng)基上的萌發(fā)數(shù)和萌發(fā)率最高，高達(dá)85%及以上。這表明種子萌發(fā)期間需要營(yíng)養(yǎng)支持，而相較于其他天然有機(jī)添加物，10%馬鈴薯對(duì)石斛種子萌發(fā)的促進(jìn)效果最好，這可能與馬鈴薯富含維生素（B1和B2）和礦質(zhì)元素（鉀、鐵、鎂以及碳水化合物和氨基酸）有關(guān)［21-22］。此外，Miransari等［23］研究認(rèn)為，種子在萌發(fā)過(guò)程中需要大量的氮，因而在培養(yǎng)基中添加馬鈴薯會(huì)提高種子的發(fā)芽率。

3.2 不同激素配比對(duì)3種石斛原球莖分化增殖的影響

石斛屬植物擴(kuò)繁的關(guān)鍵時(shí)期是原球莖增殖和叢生芽誘導(dǎo)階段，試驗(yàn)中常采用激素處理并添加一定量的細(xì)胞分裂素來(lái)提高增殖誘導(dǎo)效果［18］。石斛原球莖對(duì)激素的需求較為敏感，分化程度也越高，張梅等［19，24］研究認(rèn)為，0.5 mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA培養(yǎng)基中原球莖的分化效果最佳，與該研究結(jié)果相同。當(dāng)細(xì)胞分裂素6-BA為0.2 mg/L條件下，NAA濃度為0.2 mg/L時(shí)，3種石斛植物的分化率最高，之后隨著NAA濃度的增加，3種石斛植株的分化均呈下降趨勢(shì)；生長(zhǎng)素NAA為0.2 mg/L條件下，細(xì)胞分裂素6-BA濃度為0.5 mg/L時(shí)，鼓槌石斛和球花石斛原球莖增殖率最高；6-BA濃度為1.0 mg/L時(shí)，細(xì)莖石斛增殖分化率最高。這表明在培養(yǎng)基含有低濃度的細(xì)胞分裂素時(shí)，只有低濃度的NAA能有效促進(jìn)石斛原球莖的增殖率，高濃度NAA反而對(duì)原球莖的增殖起抑制作用。在低濃度NAA（0.2 mg/L）培養(yǎng)基中，低濃度的6-BA（0.2 mg/L）能有效促進(jìn)鼓槌石斛和球花石斛原球莖的增殖，中等濃度NAA（1.0 mg/L）則促進(jìn)細(xì)莖石斛原球莖增殖，高濃度NAA均抑制石斛原球莖增殖，說(shuō)明3種石斛原球莖的誘導(dǎo)在低、中濃度的生長(zhǎng)素NAA和細(xì)胞分裂素6-BA中最佳，因此鼓槌石斛和球花石斛分化較適宜的培養(yǎng)基為1/2MS+10%馬鈴薯+0.5 mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA；細(xì)莖石斛適宜的培養(yǎng)基為1/2MS+10%馬鈴薯+1.0 mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA。

3.3 不同外源激素對(duì)3種石斛種苗壯苗生根的影響

壯苗生根階段是植物組織培養(yǎng)的重要階段之一，常在培養(yǎng)基中使用一定量的激素誘導(dǎo)石斛種苗壯苗生根［25］。如張書萍等［26-27］研究認(rèn)為，添加一定量的激素IBA能有效促進(jìn)石斛苗生根。該研究發(fā)現(xiàn)，3種石斛種子的生根數(shù)和生根率隨IBA濃度增加均呈先上升后下降的趨勢(shì)，當(dāng)IBA為0.10 mg/L時(shí)誘導(dǎo)的鼓槌石斛生根率最高，為95.0%，當(dāng)IBA濃度為0.50 mg/L時(shí)誘導(dǎo)的球花石斛和細(xì)莖石斛生根數(shù)和生根率最高，分別為87.5%和100%，且根生長(zhǎng)旺盛，無(wú)褐化現(xiàn)象。這說(shuō)明IBA對(duì)石斛種苗生根壯苗的誘導(dǎo)效率與激素濃度有關(guān)，且不同種類石斛種苗所需激素濃度不同。羅玉婷等［28］研究發(fā)現(xiàn)，IBA濃度超過(guò)種苗適宜范圍，會(huì)導(dǎo)致苗矮化，長(zhǎng)勢(shì)呈下降狀態(tài)，降低組培苗的質(zhì)量。因此，通過(guò)研究得出鼓槌石斛的生根培養(yǎng)基以1/2MS+0.10 mg/L IBA+10%馬鈴薯+2.0%蔗糖+0.6%瓊脂為宜；球花石斛和細(xì)莖石斛的生根培養(yǎng)基以1/2MS+0.50 mg/L IBA+10%馬鈴薯+2.0%蔗糖+0.6%瓊脂為宜。

4 結(jié)論

通過(guò)大量的培養(yǎng)基篩選試驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)1/2MS培養(yǎng)基比MS、B5和1/2B5培養(yǎng)基更有利于3種石斛種子萌發(fā)；在1/2MS培養(yǎng)基中添加10%馬鈴薯比添加10%香蕉、10%玉米或10%大豆更能提高3種石斛種子的萌發(fā)率。3種石斛原球莖的誘導(dǎo)在低、中濃度生長(zhǎng)素NAA和細(xì)胞分裂素6-BA中最佳，表現(xiàn)出鼓槌石斛和球花石斛原球莖增殖培養(yǎng)基為1/2MS+10%馬鈴薯+0.5 mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA；細(xì)莖石斛原球莖適宜培養(yǎng)基為1/2MS+10%馬鈴薯+1.0 mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA。不同濃度對(duì)3種石斛生根壯苗效率不同，表現(xiàn)為鼓槌石斛的生根培養(yǎng)基以1/2MS+0.10 mg/L IBA+10%馬鈴薯+2.0%蔗糖+0.6%瓊脂最佳；球花石斛和細(xì)莖石斛的生根培養(yǎng)基以1/2MS+0.50 mg/L IBA+10%馬鈴薯+2.0%蔗糖+0.6%瓊脂最佳。

參考文獻(xiàn)

［1］ PRIDGEON A，MORRISON A.The illustrated encyclopedia of orchids：Over 1100 species illustrated and identified，v.1［Z］.Portland：Timber Press，2005.

［2］ 王雁，周進(jìn)昌，鄭寶強(qiáng)，等.石斛蘭［M］.北京：中國(guó)林業(yè)出版社，2015.

［3］ 鄒成勇，劉燕.我國(guó)石斛屬植物研究進(jìn)展［J］.安徽農(nóng)業(yè)科學(xué)，2010，38（12）：6164-6166，6223.

［4］ 龔建英，王華新，龍定建，等.我國(guó)石斛屬植物資源及其主要種類觀賞特性［J］.江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué)，2015，43（10）：233-235，261.

［5］ 王東暉，范蓓，孫晶，等.石斛屬植物化學(xué)成分的研究進(jìn)展［J］.中國(guó)食物與營(yíng)養(yǎng)，2019，25（3）：12-18.

［6］ XING X H，CUI S W，NIE S P，et al.A review of isolation process，structural characteristics，and bioactivities of water-soluble polysaccharides from Dendrobium plants［J］.Bioactive carbohydrates and dietary fibre，2013，1（2）：131-147.

［7］ WANG J H，LUO J P，ZHA X Q，et al.Comparison of antitumor activities of different polysaccharide fractions from the stems of Dendrobium nobile Lindl［J］.Carbohydrate polymers，2010，79（1）：114-118.

［8］ 陳曉梅，郭順星.石斛屬植物化學(xué)成分和藥理作用的研究進(jìn)展［J］.天然產(chǎn)物研究與開發(fā)，200 13（1）：70-75.

［9］ 葉秀仙，陳藝荃，林榕燕，等.石斛蘭雜交結(jié)實(shí)性研究［J］.福建農(nóng)業(yè)科技，202 52（3）：1-5.

［10］ 潘麗晶，曹友培，肖楊，等.觀賞石斛育種技術(shù)研究綜述［J］.廣東農(nóng)業(yè)科學(xué)，2009，36（9）：71-73.

［11］ 王蓮輝.石斛無(wú)菌播種及培養(yǎng)［J］.大眾科學(xué)，2021（8）：14-17.

［12］ 王亞妮，王麗琨，苗宗保，等.蘭科石斛屬植物菌根真菌研究進(jìn)展［J］.熱帶亞熱帶植物學(xué)報(bào)，2013，21（3）：281-288.

［13］ 中國(guó)科學(xué)院中國(guó)植物志編輯委員會(huì).中國(guó)植物志：第1卷 總論［M］.北京：科學(xué)出版社，2004.

［14］ 丁秋露，趙旵軍.蘭花組織培養(yǎng)和分子生物學(xué)研究進(jìn)展［J］.生物學(xué)雜志，2010，27（2）：76-79.

［15］ 曾碧玉，朱根發(fā)，劉海濤.蘭花選育種研究進(jìn)展［J］.中國(guó)農(nóng)學(xué)通報(bào)，2005，21（12）：272-276.

［16］ 范成明，李枝林，何月秋.蘭花組織培養(yǎng)及分子生物學(xué)研究進(jìn)展［J］.園藝學(xué)報(bào)，2003，30（4）：487-491.

［17］ 張華通，孫同高，林曉萍，等.鐵皮石斛種子組織培養(yǎng)研究［J］.林業(yè)與環(huán)境科學(xué)，2016，32（6）：40-43.

［18］ 仇碩，趙志國(guó)，趙健，等.翅萼石斛組織培養(yǎng)及快繁技術(shù)研究［J］.廣東農(nóng)業(yè)科學(xué)，2018，45（9）：48-52.

［19］ 張梅，許冬月，朱自坤.報(bào)春石斛種子萌發(fā)及原球莖的快繁培養(yǎng)條件研究［J］.安徽農(nóng)學(xué)通報(bào)，2019，25（21）：27-29.

［20］ 毛秀華，金家興，劉作易，等.環(huán)草石斛種子萌發(fā)培養(yǎng)的研究［J］.貴州農(nóng)業(yè)科學(xué)，2004，32（3）：48-49.

［21］ 李曉君，潘繼軍，曹琦，等.天然有機(jī)物添加對(duì)金釵石斛快繁的影響［J］.江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué)，2019，47（18）：79-82.

［22］ 唐桂香，黃福燈，周偉軍.鐵皮石斛的種胚萌發(fā)及其離體繁殖研究［J］.中國(guó)中藥雜志，2005，30（20）：1583-1586.

［23］ MIRANSARI M，SMITH D L.Plant hormones and seed germination［J］.Environmental and experimental botany，2014，99：110-121.

［24］ 余樂(lè)，蘭芹英，王曉靜，等.3種石斛蘭種子非共生萌發(fā)和離體保存［J］.安徽農(nóng)學(xué)通報(bào)，2009，15（8）：27-28，69.

［25］ 田英男，張?zhí)鞚?，秦曉杰，?黑毛石斛×鼓槌石斛雜交種組培快繁技術(shù)研究［J］.熱帶作物學(xué)報(bào)，202 42（2）：356-361.

［26］ 張書萍，白石，陳麗靜.鐵皮石斛的組織培養(yǎng)與快速繁殖［J］.遼寧農(nóng)業(yè)科學(xué)，2008（6）：12-15.

［27］ 韓曉紅，孫金龍，段春紅.鐵皮石斛生根壯苗培養(yǎng)基優(yōu)化及移栽基質(zhì)選擇［J］.廣東農(nóng)業(yè)科學(xué)，2013，40（2）：16-18，23.

［28］ 羅玉婷，藍(lán)玉甜，黃嵐，等.鉤狀石斛組織培養(yǎng)技術(shù)研究［J］.安徽農(nóng)業(yè)科學(xué)，2014，42（21）：6931-6933.