摘要：目的 研究重組結(jié)核桿菌融合蛋白（EC）在結(jié)核病潛伏感染診斷和篩查中應(yīng)用價(jià)值。方法 選取我縣2023年9月秋季入學(xué)的3000名高一年級(jí)新生進(jìn)行結(jié)核病篩查，采用隨機(jī)數(shù)字表法分為對(duì)照組（n=1500）和觀察組（n=1500），對(duì)照組進(jìn)行卡介菌純蛋白衍生物（BCG-PPD）皮膚試驗(yàn)檢測(cè)，觀察組進(jìn)行EC皮膚試驗(yàn)檢測(cè)，同時(shí)篩查肺結(jié)核可疑癥狀及結(jié)核病密切接觸史。對(duì)PPD皮膚試驗(yàn)強(qiáng)陽(yáng)性者進(jìn)行胸片DR檢查，EC皮膚試驗(yàn)陽(yáng)性者進(jìn)行胸片DR檢查。比較兩組皮試陽(yáng)性率、有肺結(jié)核可疑癥狀及結(jié)核病密切接觸史患者陽(yáng)性率、胸片DR結(jié)果及試驗(yàn)不良反應(yīng)。結(jié)果 觀察組皮試陽(yáng)性率（0.80%）低于對(duì)照組（16.53%）（P<0.05）;觀察組有肺結(jié)核可疑癥狀及結(jié)核病密切接觸史者陽(yáng)性率與對(duì)照組比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）;觀察組皮試陽(yáng)性/強(qiáng)陽(yáng)性者胸片DR檢出率為8.33%，高于對(duì)照組的6.67%（P<0.05）;觀察組檢測(cè)不良反應(yīng)發(fā)生率低于對(duì)照組（P<0.05）。結(jié)論 EC在結(jié)核病潛伏感染診斷和篩查中具有顯著的作用，可一定程度提高篩查準(zhǔn)確性，同時(shí)檢測(cè)安全性相對(duì)高，可作為學(xué)校結(jié)核病篩查的首選方法。

關(guān)鍵詞：結(jié)核病;重組結(jié)核桿菌融合蛋白;潛伏感染;篩查

中圖分類號(hào)：R52 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A DOI：10.3969/j.issn.1006-1959.2024.20.031

文章編號(hào)：1006-1959（2024）20-0147-04

Application of Recombinant Mycobacterium Tuberculosis Fusion Protein （EC） in the Diagnosisand Screening of Latent Infection of Tuberculosis

LIAO Yuanyuan1，SUN Yanfei2，CHEN Dasheng1，ZHANG Zhicong2

（1.Department of Tuberculosis Prevevtion，Anyuan County Center for Disease Control and Prevention，Anyuan 342100，Jiangxi，China;

2.Department of Infectious Diseases，Anyuan County People's Hospital，Anyuan 342100，Jiangxi，China）

Abstract：Objective To study the application value of recombinant Mycobacterium tuberculosis fusion protein （EC） in the diagnosis and screening of latent tuberculosis infection. Methods A total of 3000 high school freshmen enrolled in the autumn of September 2023 in our county were selected for tuberculosis screening. They were divided into control group （n=1500） and observation group （n=1500） by random number table method. The control group was tested by BCG-PPD skin test， and the observation group was tested by EC skin test. At the same time， the suspicious symptoms of tuberculosis and the history of close contact with tuberculosis were screened. Chest DR examination was performed on those with strong positive PPD skin test， and chest DR examination was performed on those with positive EC skin test. The positive rate of skin test， the positive rate of patients with suspicious symptoms of tuberculosis and close contact history of tuberculosis， the results of chest X-ray DR and adverse reactions were compared between the two groups.Results The positive rate of skin test in the observation group （0.80%） was lower than that in the control group （16.53%） （P<0.05）. There was no significant difference in the positive rate of patients with suspicious symptoms of tuberculosis and close contact history of tuberculosis between the observation group and the control group （P>0.05）. The detection rate of chest DR in patients with positive/strong positive skin test in the observation group was 8.33%， which was higher than 6.67% in the control group （P<0.05）. The incidence of adverse reactions in the observation group was lower than that in the control group （P<0.05）.Conclusion EC plays a significant role in the diagnosis and screening of latent tuberculosis infection， which can improve the accuracy of screening to a certain extent， and the safety of detection is relatively high. Thus， it can be used as the preferred method for tuberculosis screening in schools.

Key words：Tuberculosis;Recombinant Mycobacterium tuberculosis fusion protein;Latent infection;Screening

結(jié)核?。╰uberculosis）是由結(jié)核分枝桿菌感染引起的慢性傳染病，嚴(yán)重危害人類的健康[1]。結(jié)核潛伏感染是指機(jī)體內(nèi)感染了結(jié)核分枝桿菌，但沒有發(fā)生臨床結(jié)核病，沒有臨床細(xì)菌學(xué)或者影像學(xué)方面活動(dòng)結(jié)核的證據(jù)[2]。結(jié)核潛伏感染者沒有結(jié)核病相關(guān)的癥狀和體征，沒有傳染性[3]。相關(guān)數(shù)據(jù)調(diào)查顯示[4]，結(jié)核潛伏感染人群（latent tuberculosis infection， LTBI）是結(jié)核新發(fā)病的重要來(lái)源。目前檢測(cè)診斷 LTBI 者尚缺乏統(tǒng)一的方法及相應(yīng)的標(biāo)準(zhǔn)[5]。因此，如何簡(jiǎn)便且確性又高地診斷感染者并實(shí)施預(yù)防是結(jié)核病防治工作的關(guān)鍵。目前我國(guó)注冊(cè)上市的TBST產(chǎn)品ESAT-6/CFP-10蛋白有重組結(jié)核桿菌融合蛋白（EC），EC具有結(jié)核分枝桿菌復(fù)合群抗原特異性，可將其作為變態(tài)反應(yīng)原用于結(jié)核感染篩查[6，7]。本研究選擇我縣2023年9月秋季入學(xué)的3000名高一年級(jí)新生作為篩查對(duì)象，進(jìn)一步探究EC 在結(jié)核病潛伏感染診斷和篩查中的價(jià)值，現(xiàn)報(bào)道如下。

1資料與方法

1.1一般資料 選取安遠(yuǎn)縣2023年9月秋季入學(xué)的3000名高一年級(jí)新生進(jìn)行結(jié)核病篩查，采用隨機(jī)數(shù)字表法分為對(duì)照組（n=1500）和觀察組（n=1500），對(duì)照組男780名，女720名;年齡15～17歲，平均年齡（16.02±1.03）歲;有肺結(jié)核可疑癥狀及結(jié)核病密切接觸史者20名。觀察組男765名，女735名;年齡14～17歲，平均年齡（15.98±0.80）歲;有肺結(jié)核可疑癥狀及結(jié)核病密切接觸史者17名。兩組性別、年齡及有肺結(jié)核可疑癥狀及結(jié)核病密切接觸史者比例比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），具有可比性。所有學(xué)生均自愿參加本研究，并簽署知情同意書。

1.2納入和排除標(biāo)準(zhǔn) 納入標(biāo)準(zhǔn)：①均為高一年級(jí)新生;②均進(jìn)行現(xiàn)場(chǎng)流行病學(xué)個(gè)案調(diào)查。排除標(biāo)準(zhǔn)：①隨訪資料不完善者;②依從性較差，不能積極配合者。

1.3方法 對(duì)照組進(jìn)行卡介菌純蛋白衍生物（BCG-PPD）皮膚試驗(yàn)檢測(cè)[8]，觀察組進(jìn)行EC皮膚試驗(yàn)檢測(cè)，同時(shí)篩查肺結(jié)核可疑癥狀及結(jié)核病密切接觸史。皮膚試驗(yàn)檢測(cè)法：分別在對(duì)照組、觀察組的受試者左前臂掌側(cè)中下1/3的皮膚部位皮內(nèi)注射BCG-PPD 0.1ml（5 IU）、EC 0.1 ml（5 IU）試劑，直至出現(xiàn)6～10 mm大小橘皮樣的圓形丘，不要揉摩，將針稍捻轉(zhuǎn)后退出，在皮試后72 h（48～72 h）查驗(yàn)反應(yīng)，PPD皮試以觸摸和測(cè)皮膚硬結(jié)為陽(yáng)性判斷標(biāo)準(zhǔn)，EC皮試以紅暈或硬結(jié)為判斷標(biāo)準(zhǔn)。對(duì)PPD和EC皮膚試驗(yàn)陽(yáng)性者進(jìn)行胸片DR檢查。

1.4觀察指標(biāo) 在皮試后72 h （48～72 h）查驗(yàn)反應(yīng)，比較兩組皮試陽(yáng)性率、有肺結(jié)核可疑癥狀及結(jié)核病密切接觸史患者陽(yáng)性率、胸片DR結(jié)果以及試驗(yàn)不良反應(yīng)。

1.4.1 BCG-PPD判斷標(biāo)準(zhǔn)[9] 以觸摸和測(cè)皮膚硬結(jié)為陽(yáng)性判斷標(biāo)準(zhǔn)，根據(jù)《肺結(jié)核診斷標(biāo)準(zhǔn)》（WS 288-2017），皮試硬結(jié)平均直徑[（橫徑+縱徑）/2）]<5 mm或無(wú)反應(yīng)者為陰性;硬結(jié)平均直徑 ≥5 mm為陽(yáng)性反應(yīng)（其中硬結(jié)平均直徑5～10 mm為一般陽(yáng)性;硬結(jié)平均直徑10～15 mm為中度陽(yáng)性;硬結(jié)平均直徑≥15 mm或局部出現(xiàn)雙圈、水皰、壞死及淋巴管炎者為強(qiáng)陽(yáng)性，為結(jié)核感染強(qiáng)陽(yáng)性反應(yīng)）。

1.4.2 EC判斷標(biāo)準(zhǔn)[10] 以紅暈或硬結(jié)大者為準(zhǔn)。無(wú)紅暈或硬結(jié)反應(yīng)為陰性;紅暈或硬結(jié)平均直徑[橫徑+縱徑）/2]≥5 mm或水皰、壞死、淋巴管炎者為陽(yáng)性，為結(jié)核感染。

1.5統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用統(tǒng)計(jì)軟件包SPSS 20.0版本對(duì)本研究的數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，采用（x±s）表示符合正態(tài)分布的計(jì)量資料，組間比較采用t檢驗(yàn);計(jì)數(shù)資料采用[n（%）]表示，采用χ2檢驗(yàn)，P<0.05說(shuō)明差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2結(jié)果

2.1兩組皮試陽(yáng)性率比較 觀察組陽(yáng)性率低于對(duì)照組（P<0.05），見表1。

2.2兩組有肺結(jié)核可疑癥狀及結(jié)核病密切接觸史者陽(yáng)性率比較 觀察組陽(yáng)性率與對(duì)照組比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），見表2。

2.3兩組胸片DR檢測(cè)結(jié)果比較 觀察組皮試陽(yáng)性/強(qiáng)陽(yáng)性者胸片DR檢出率高于對(duì)照組DR檢出率（P<0.05），見表3。

2.4兩組檢測(cè)不良反應(yīng)發(fā)生率比較 觀察組檢測(cè)不良反應(yīng)發(fā)生率低于對(duì)照組（P<0.05），見表4。

3討論

當(dāng)前，結(jié)核病潛伏感染的診斷主要依賴于特定的診斷技術(shù)和輔助檢查[11]。目前，世界衛(wèi)生組織（WHO）推薦的主要診斷技術(shù)包括結(jié)核菌素皮膚試驗(yàn)（PPD）、γ-干擾素釋放試驗(yàn)以及新型皮膚試驗(yàn)如EC，其中EC是一種新型檢測(cè)方法，它結(jié)合了兩種檢測(cè)技術(shù)的特點(diǎn)，成為結(jié)核感染檢測(cè)技術(shù)家族的新成員[12，13]。但是目前關(guān)于EC對(duì)結(jié)核病潛伏感染診斷和篩查的相關(guān)研究較少，且已有研究結(jié)論存在差異，是否具有良好應(yīng)用有效性、安全性，還需要臨床進(jìn)一步探究證實(shí)[14，15]。

本研究結(jié)果顯示，觀察組陽(yáng)性率低于對(duì)照組（P<0.05），提示EC皮試檢測(cè)陽(yáng)性檢出率低于BCG-PPD皮試。但是EC皮試均為陽(yáng)性或強(qiáng)陽(yáng)性，提示兩者強(qiáng)陽(yáng)性率基本相似。因此，EC與BCG-PPD皮膚試驗(yàn)檢測(cè)均可對(duì)結(jié)核病潛伏感染進(jìn)行篩查。分析認(rèn)為，因?yàn)镻PD 成分復(fù)雜，易受卡介苗接種和非結(jié)核分枝桿菌感染產(chǎn)生的交叉免疫反應(yīng)影響，從而假陽(yáng)性概率較高[16，17]。本研究顯示，觀察組陽(yáng)性率與對(duì)照組比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），表明對(duì)肺結(jié)核可疑癥狀及結(jié)核病密切接觸史者進(jìn)行篩查，EC皮膚試驗(yàn)檢測(cè)陽(yáng)性率與BCG-PPD結(jié)果基本相似，進(jìn)一步提示對(duì)高危人群進(jìn)行篩查，以上兩種方法可自由選擇[18]。盧鵬等[19]的研究與本次結(jié)果類似，說(shuō)明在肺結(jié)核可疑癥狀及結(jié)核病密切接觸史人群中，采用EC皮膚試驗(yàn)診斷結(jié)核潛伏感染可能更為合適。建議在肺結(jié)核可疑癥狀及結(jié)核病密切接觸史人群中采用EC皮膚試驗(yàn)陽(yáng)性以提高靈敏度。因此，臨床在高危人群篩查中EC皮膚試驗(yàn)檢測(cè)具有顯著的優(yōu)勢(shì)[19]。本研究發(fā)現(xiàn)，觀察組皮試陽(yáng)性/強(qiáng)陽(yáng)性者胸片DR檢出率為8.33%，高于對(duì)照組DR檢出率6.67%（P<0.05），提示對(duì)EC皮試陽(yáng)性者進(jìn)行胸片DR檢查，可提高檢出率。該結(jié)論表明通過(guò)EC皮試大規(guī)模篩查后，進(jìn)行DR進(jìn)一步檢查，可相對(duì)提高結(jié)核病潛伏感染檢出率，有效降低假陽(yáng)性，縮小篩查范圍。同時(shí)EC皮膚試驗(yàn)檢查價(jià)格適中，操作簡(jiǎn)便，在大規(guī)模人群篩查中具有優(yōu)勢(shì)。此外，觀察組檢測(cè)不良反應(yīng)發(fā)生率低于對(duì)照組（P<0.05），提示EC皮試檢測(cè)安全性更好，檢測(cè)不良反應(yīng)少，利于良好的篩查耐受性，尤其適合學(xué)校大規(guī)模篩查[20]。

總之，EC作為我國(guó)自主研發(fā)的一種新型結(jié)核感染皮膚試驗(yàn)的檢測(cè)，不僅價(jià)格適中，操作簡(jiǎn)便，而且具有良好的敏感度，可避免卡介疫苗影響，降低假陽(yáng)性。同時(shí)EC在高危人群篩查中可獲得與比BCG-PPD高的靈敏度，且不良反應(yīng)少，在大規(guī)模人群篩查中具有顯著的應(yīng)用優(yōu)勢(shì)。

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編輯/成森

基金項(xiàng)目：2023年贛州市指導(dǎo)性科技計(jì)劃項(xiàng)目（編號(hào)：GZ2023ZSF372）

作者簡(jiǎn)介：廖媛媛（1979.10-），女，江西安遠(yuǎn)縣人，本科，主治醫(yī)師，主要從事結(jié)核病預(yù)防及治療工作