摘要： 【目的】解析細(xì)胞周期蛋白依賴性激酶抑制因子3 （cyclin-dependent kinase inhibitor 3，CDKN3） 在雞前脂肪細(xì)胞分化中的作用，為闡明脂肪沉積的分子機(jī)制奠定理論基礎(chǔ)?！痉椒ā繕?gòu)建熒光表達(dá)載體pECFPCDKN3，轉(zhuǎn)染至雞永生化前脂肪細(xì)胞系（immortalized chicken preadipocyte cell line，ICP1），觀察CDKN3 蛋白的亞細(xì)胞定位；采用油酸鈉誘導(dǎo)ICP1 分化，qRT-PCR 檢測分化過程中CDKN3 mRNA 表達(dá)水平；將pCMVHA-CDKN3 和pCMV-HA 分別轉(zhuǎn)染到ICP1 中，轉(zhuǎn)染24 h 后進(jìn)行誘導(dǎo)分化，通過油紅O 染色檢測脂肪細(xì)胞分化情況，并利用qRT-PCR 檢測過表達(dá)CDKN3 后脂肪分化相關(guān)基因的mRNA 表達(dá)水平?！窘Y(jié)果】轉(zhuǎn)染了pECFP-CDKN3 的細(xì)胞主要在細(xì)胞核中呈青色熒光信號，提示雞CDKN3 定位于細(xì)胞核；在誘導(dǎo)ICP1 成脂分化的過程中，CDKN3 mRNA 表達(dá)量逐漸升高；油紅O 染色結(jié)果顯示：過表達(dá)CDKN3 細(xì)胞內(nèi)脂滴聚集減少，且脂肪分化相關(guān)基因C/EBPα、PPARγ、FABP4 和FAS 的表達(dá)水平均呈下降趨勢， 其中FAS 顯著下降（Plt;0.05），PPARγ 極顯著下降（Plt;0.01）?！窘Y(jié)論】CDKN3 是核蛋白，可抑制雞前脂肪細(xì)胞分化。

關(guān)鍵詞： 細(xì)胞周期蛋白依賴性激酶抑制因子3 （CDKN3）；雞；前脂肪細(xì)胞；脂肪分化；亞細(xì)胞定位

中圖分類號： S831.1 文獻(xiàn)標(biāo)志碼： A 文章編號： 1004–390X （2024） 02?0036?07