在急診心內(nèi)科,用免疫抑制法檢測血清肌酸激酶同工酶(CK-MB)活性,觀察其活力單位及與肌酸激酶( CK)的比值關(guān)系,作為診斷急性心肌梗死的特異性指標(biāo)、預(yù)測冠狀動脈再通的治療效果和觀察病情變化等,已被臨床廣泛應(yīng)用。
理論上說,CK應(yīng)當(dāng)?shù)扔贑K-MM、CK-MB、CK-BB之和。但在日常檢測中偶爾發(fā)現(xiàn)臨床血清標(biāo)本中CK-MB大于總酶CK檢測值,即出現(xiàn)CK-MB/CK倒置。這種情況使檢驗工作者和臨床醫(yī)生產(chǎn)生疑惑,有些臨床醫(yī)生甚至懷疑檢測結(jié)果的真實(shí)性。為什么會出現(xiàn)這樣的結(jié)果呢?下面我們就筆者醫(yī)院實(shí)驗室出現(xiàn)的一例CK-MB/CK倒置的原因進(jìn)行簡單分析。
一般情況下,檢查結(jié)果中CK-MB應(yīng)當(dāng)小于CK。當(dāng)CK-MB大于CK時,大家首先會想到,一定是檢測過程出錯了。筆者發(fā)現(xiàn)這個病例后,首先查看了當(dāng)日質(zhì)控,結(jié)果在控;要求化驗室重新復(fù)查一次,結(jié)果依然是CK+MB高于CK。把檢測樣本用生理鹽水稀釋5倍后再檢測,CK-MB仍然高于CK,血清為淡黃色。隨后又進(jìn)行了細(xì)致排查,排除了系統(tǒng)誤差和偶然誤差,排除了濃度超過線性范圍的因素,排除了血樣溶血、脂血和血清膽紅素高等因素,結(jié)果仍然是CK-MB大于CK。到底是什么原因?qū)е碌倪@種情況?
其實(shí),如果詳細(xì)了解CK-MB的檢測方法及檢測原理,就可以從中找出原因。
首先,我們來復(fù)習(xí)下CK。CK是由M和B兩個亞單位組成的二聚體,共3種同工酶,分別為CKl (BB)、CK2(MB)、CK3 (MM),主要存在于胞漿中;另外,血清中還有少量的線粒體同工酶( CKm)。人的心肌細(xì)胞中CK的活性較高(僅次于骨骼肌),其中CK-MB占13%~22%(骨骼肌中l(wèi)t;1%)。因此,CK-MB作為心肌損傷的指標(biāo)具有特異性。
一般實(shí)驗室檢測CK-MB采用的是免疫抑制法。檢測原理是用抗人M血清,抑制患者血清中M亞單位。這樣,標(biāo)本中的全部CK-MM就會失去活性,而CK-MB活性失去一半;然后測定剩余的B亞單位活性即CK-MB活性的一半。實(shí)驗結(jié)果乘以2即得CK-MB活性。但是,這樣的結(jié)果建立在一個前提下,即忽略CK-BB活力。它是根據(jù)CK-BB在正常人血清中含量極微,僅為總CK活力的5%左右,故在制定檢測方法時,假設(shè)沒有CK-BB存在。
正常情況下,CK-BB在血清中是極微量的,不會影響CK-MB的檢測。但是當(dāng)CK-BB大量升高時,機(jī)器會誤判CK-BB為CK-MB,即報告CK-MB=2(即CK-MB+CK-BB),導(dǎo)致CK-MB假性增高。此時,不能簡單地認(rèn)為CK-MB升高,而去懷疑患者發(fā)生了心肌梗死。
那么,有哪些原因會導(dǎo)致血清中的CK-BB大量升高呢?CK-BB主要存在于平滑肌和腦組織神經(jīng)中,其他組織器官中含量很低。當(dāng)上述器官發(fā)生器質(zhì)性損傷時,如常見的腦梗死、缺血性腦病、平滑肌受損等,其細(xì)胞中的CK-BB會大量釋放入血,導(dǎo)致CK-BB急劇升高。此時進(jìn)行臨床生化檢驗,就會出現(xiàn)CK-MBgt; CK的情況。
于是筆者迅速查看患者信息:患者入院診斷為(1)冠心病,不穩(wěn)定心絞痛,心功能不全;(2)2型糖尿??;(3)高血壓3級;(4)腔隙性腦梗死;(5)動脈粥樣硬化伴斑塊形成;(6)前列腺增生。
患者所患疾病的種類較多,因此筆者迅速聯(lián)系管床醫(yī)生,解釋檢驗結(jié)果,懷疑是腦梗死引起的假性CK-MB升高。并告知可以加做肌鈣蛋白予以檢驗,但是陰性可能性比較大。當(dāng)然,巨CK1(BB)和巨CK2(MB)也會導(dǎo)致這種情況發(fā)生,只是比較罕見。
那么問題來了,臨床大夫反問,難道沒有什么好的檢測方法可以避免這種情況嗎?
檢測CK-MB有免疫電泳法、免疫抑制法、金標(biāo)記法和單克隆抗體免疫法等。一般臨床檢驗中常見的方法為免疫抑制法,其優(yōu)點(diǎn)是可在生化全自動分析儀上使用,具有速度快、成本低的優(yōu)點(diǎn)。但在出現(xiàn)本文前述的情況時,為了避免假性CK-MB升高,不妨試試其他的檢測方法。
臨床上常規(guī)生化檢驗肌酸激酶及其同工酶,出現(xiàn)CK-MB/CK倒置時,排除溶血、脂血、質(zhì)控失控及相關(guān)影響因素的前提下,可使用免疫電泳法進(jìn)行復(fù)查。在不具備條件的基層實(shí)驗室,出現(xiàn)異常結(jié)果時,建議臨床醫(yī)生加做肌鈣蛋白、肌紅蛋白等其他實(shí)驗室指標(biāo),同時結(jié)合患者臨床表現(xiàn)、心電圖等,綜合評判心肌梗死的診斷和療效,可能更合適。
在臨床工作中,也會遇到同一位患者在同一時間采集血樣送檢,其“心肌酶五項”中的CK-MB與“心肌梗死三項”中的CK-MB結(jié)果不一致,一個結(jié)果正常而另一個異常,不知道到底以哪一個結(jié)果為準(zhǔn)?實(shí)驗室是否檢測有誤?
首先需要搞明白,目前檢驗科開展兩種方法的CK-MB檢測,分別檢測的是“心肌酶五項”中的CK-MB酶“活性”,以及“心肌梗死三項”中的CK-MB酶“質(zhì)量”,一個是酶活性而另一個是酶含量(質(zhì)量),兩者存在本質(zhì)的區(qū)別。
“心肌酶五項”中檢測CK-MB酶活性的方法,由于方法學(xué)本身的局限性,當(dāng)遇到患有惡性腫瘤、腦神經(jīng)損傷、平滑肌受損或體內(nèi)含有巨CK酶的患者時,在其血清中可有較高水平的CK-B亞單位存在,或出現(xiàn)線粒體CK(CK-Mt)。此時,由于CK-MB當(dāng)中的B亞基活性不能被抗-M抗體所抑制,在測定CK-MB活性時會出現(xiàn)假性增高現(xiàn)象。這也是為什么在同一患者出現(xiàn)不一致結(jié)果時,多為CK-MB酶活性升高但CK-MB酶質(zhì)量卻正常的原因。
在排除標(biāo)本質(zhì)量不合格的情況下,CK-MB質(zhì)量檢測所受的影響因素較CK-MB活性檢測的影響因素小。因此,當(dāng)二者結(jié)果不一致時,建議臨床醫(yī)生能夠結(jié)合患者臨床表現(xiàn)、心電圖、肌鈣蛋白、肌紅蛋白等其他實(shí)驗室指標(biāo),綜合評判心肌梗死的診斷和療效,做出更合理的判斷并給予合理處置。