魯愛峰,賈文玉,徐琳娜
1.臨澤縣平川鎮(zhèn)畜牧獸醫(yī)工作站,甘肅 臨澤 734200
2.高臺縣羅城鎮(zhèn)畜牧獸醫(yī)工作站,甘肅 高臺 734300
3.甘肅省畜牧技術(shù)推廣總站,甘肅 蘭州 730030
李氏桿菌病典型的癥狀表現(xiàn)之一是患病動(dòng)物原地轉(zhuǎn)圈,走路呈醉酒狀,所以這種疾病也被稱之為旋轉(zhuǎn)病。羊是李氏桿菌病的易感個(gè)體,羊李氏桿菌病分為多種類型,比如敗血型、腦炎型、子宮炎型,其中羊腦炎型李氏桿菌病較為常見,如果治療不及時(shí),羊的致死率非常高,給養(yǎng)殖戶帶來較大的經(jīng)濟(jì)損失。加強(qiáng)對羊腦炎型李氏桿菌病診斷與防治工作,對降低該疾病對羊養(yǎng)殖產(chǎn)業(yè)的影響,帶動(dòng)羊養(yǎng)殖產(chǎn)業(yè)實(shí)現(xiàn)穩(wěn)定可持續(xù)發(fā)展意義重大。
李氏桿菌是一種革蘭氏陽性菌,形態(tài)為短桿狀,兩端鈍圓,大小為(0.35~0.5) μm×(0.45~2) μm。李氏桿菌一般呈單個(gè)存在,但也有呈“V”字形或者成叢排列,無芽孢,正常情況下不產(chǎn)生莢膜。但在一些特殊環(huán)境下,會形成莢膜。李氏桿菌在20~25 ℃環(huán)境下,可以形成4根左右的鞭毛,利用鞭毛,細(xì)菌可以自主運(yùn)動(dòng)。在37 ℃環(huán)境下,李氏桿菌會形成1根鞭毛,運(yùn)動(dòng)性下降。
李氏桿菌是一種需氧兼性厭氧菌,生長溫度條件為1~45 ℃,其中30~37 ℃是適宜生長溫度,細(xì)菌的活性最強(qiáng)。在常溫培養(yǎng)條件下,透過顯微鏡細(xì)心觀察,會發(fā)現(xiàn)李氏桿菌肉湯培養(yǎng)物有獨(dú)特的翻轉(zhuǎn)運(yùn)動(dòng)。李氏桿菌對培養(yǎng)條件要求不高,在普通的瓊脂培養(yǎng)基中也能生長,但菌落生長并不旺盛,數(shù)量較少。李氏桿菌在普通瓊脂培養(yǎng)基培養(yǎng)24~48 h后,可以發(fā)現(xiàn)有圓形小菌落存在,菌落呈透明狀,輪廓為藍(lán)灰色。采用光線斜照,菌落呈現(xiàn)出藍(lán)綠色光澤。在血液葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基中培養(yǎng)李氏桿菌,生長狀況良好,培養(yǎng)的菌落為圓形,呈露滴狀,表明光滑,并有β-溶血環(huán)存在。
李氏桿菌對外界環(huán)境有著較強(qiáng)的適應(yīng)能力與抵抗能力,無論是低溫、高溫環(huán)境,還是酸性、堿性、高滲透壓環(huán)境,李氏桿菌均能夠生存。例如李氏桿菌可以在-0.1~0.4 ℃的雞湯中存活生長,可以在TSB(加入了25.5%的NaCl,高滲透壓)可以存活132 d。在70 ℃環(huán)境下,可以存活5 min。在巴氏消毒75 ℃環(huán)境下可以存活5 s。李氏桿菌的生長pH范圍是5.6~9.4。不僅如此,李氏桿菌還具有較強(qiáng)的抗干燥能力,在干燥的糞便、飼草中也可以長期存活。但李氏桿菌對消毒劑較為敏感,常用的消毒劑比如酒精、新苯扎氯銨等可以有效滅殺李氏桿菌,紫外線照射李氏桿菌15 min,也可以使其失活。
1)易感群體。李氏桿菌病是一種人畜共患病,可以感染40多種哺乳類動(dòng)物,20多種禽類動(dòng)物。在自然感染條件下,牛、羊、豬、家兔等都是易感動(dòng)物,尤其是綿羊,易感性比山羊更強(qiáng)。人也會感染李氏桿菌病,尤其是一些抵抗力差的群體,幼兒、孕婦等也很容易感染李氏桿菌病。人自感染李氏桿菌病后,將會引起腦膜炎、發(fā)熱性胃腸炎、敗血癥等。雖然李氏桿菌引起的疾病不如大腸桿菌、沙門氏菌等引起的疾病較為常見,但由于死亡率非常高,所以李氏桿菌病被列為僅次于沙門氏菌的第2大致病性食源性細(xì)菌。
2)傳染源。帶菌羊與患病羊是李氏桿菌病重要的傳染源。在自然界中,李氏桿菌廣泛存在,作為一種食源性致病菌,李氏桿菌主要通過糞口進(jìn)行傳播[1]。動(dòng)物的皮膚、眼結(jié)膜破損也是李氏桿菌的傳播途徑。李氏桿菌也會污染飼養(yǎng)器具、生產(chǎn)設(shè)備等,造成間接性傳播。人主要通過食用沒有經(jīng)過檢疫或者充分殺菌消毒的肉制品、奶制品等患上李氏桿菌病。此外,在羊飼養(yǎng)過程中,如果飼養(yǎng)密度過大、飼養(yǎng)衛(wèi)生條件較差、長期飼喂單一飼料等,都會增加李氏桿菌病的傳播率。
3)流行特點(diǎn)。李氏桿菌病流行特點(diǎn)表現(xiàn)為以下3點(diǎn):①呈散發(fā)性流行,例如羊因?yàn)楫愂绸钡仍?口腔黏膜受損,很容易感染李氏桿菌而發(fā)病。②呈季節(jié)性流行,李氏桿菌病在寒冷的春季初、冬季較為流行,其他季節(jié)也有發(fā)病,但數(shù)量較少。③羔羊群體較為流行,相較于成年羊,羔羊身體抵抗力較弱,更容易發(fā)病。
羔羊在感染羊腦炎型李氏桿菌病后,發(fā)病較快,病程較短,如果治療不及時(shí),短時(shí)間內(nèi)會死亡。羔羊的主要癥狀表現(xiàn)為急性腦膜炎癥狀,在發(fā)病初期,羔羊精神沉郁、身體高熱,隨著時(shí)間的推移,羔羊身體肌肉變得僵硬,尤其是頭、頸部肌肉表現(xiàn)明顯,在哺乳時(shí)會出現(xiàn)頭部抽搐或者頸部肌肉痙攣。后續(xù)羔羊癥狀加重,口吐白沫,精神狀態(tài)異常,時(shí)而亢奮,四處奔走。羔羊在走路時(shí),似醉酒狀,搖搖晃晃,原地轉(zhuǎn)圈,不時(shí)搖晃腦袋,在發(fā)病后期,羔羊倒地昏迷,最終身體衰竭死亡。
成年羊在患病后,精神不振,食欲下降,體溫升高,最高可以上升到41℃。成年羊通常口腔或者皮膚其他部位有創(chuàng)傷,咀嚼緩慢,吞咽困難。隨著時(shí)間的推移,病羊出現(xiàn)腦炎癥狀,主要表現(xiàn)為原地轉(zhuǎn)圈,以頭抵墻,病羊的視力減弱或者完全失明,對外界反應(yīng)遲鈍,經(jīng)常在羊圈內(nèi)胡亂沖撞,病羊的眼結(jié)膜紅腫,伴有黏性分泌物流出。在發(fā)病后期,病羊食欲廢絕,角弓反張,四肢抽搐,身體肌肉痙攣,瀕死時(shí)側(cè)臥,四肢呈劃船狀,最終身體衰竭死亡。
妊娠母羊在感染羊腦炎型李氏桿菌病后,除了表現(xiàn)出典型的腦炎癥狀以外,流產(chǎn)也是一種非常典型的癥狀。有的妊娠母羊在患病初期,沒有明顯癥狀表現(xiàn),但在產(chǎn)前3周左右時(shí)間,母羊突然發(fā)病并流產(chǎn)。母羊流產(chǎn)后,胎衣會在子宮內(nèi)滯留3 d左右,后續(xù)會自動(dòng)排出。一般情況下,母羊流產(chǎn)后,通常會安全度過病理期,最終痊愈。流產(chǎn)的胎羊已經(jīng)發(fā)育完全,但身體瘦弱,整體病變并不明顯。
通過對病死羊剖檢可發(fā)現(xiàn)主要病變部位在羊的腦部,表現(xiàn)為腦膜充血、水腫嚴(yán)重,腦部血管擴(kuò)張明顯,凸出在腦部,呈樹枝狀。病死羊的腦脊液增多,輕微渾濁,顏色微紅。剖檢流產(chǎn)母羊的羔羊胎兒,發(fā)現(xiàn)胎盤子葉出血壞死,羔羊胎兒皮下水腫,體液異常增多。
在對羊腦炎型李氏桿菌病進(jìn)行常規(guī)診斷時(shí),可以先了解養(yǎng)殖場的實(shí)際情況,分析發(fā)病原因,然后結(jié)合該疾病典型的癥狀進(jìn)行判斷,例如羊頭頸部抽搐、精神狀態(tài)亢奮,視力減退,走路似醉酒狀等。還可以結(jié)合對病羊的腦部剖檢進(jìn)行輔助診斷,完成羊腦炎型李氏桿菌病的初步診斷。為了確診,還需要應(yīng)用實(shí)驗(yàn)室診斷方法。
5.2.1 鏡檢
通過采集病死羊腦組織等進(jìn)行涂片處理,然后再進(jìn)行革蘭氏染色,最后通過低倍顯微鏡進(jìn)行觀察,如果發(fā)現(xiàn)病料中存在革蘭氏陽性菌,菌體呈桿狀,兩端鈍圓,單個(gè)或“V”字形排列,芽孢、莢膜等,可以確診羊患有羊腦炎型李氏桿菌病。
5.2.2 細(xì)菌分離培養(yǎng)
在完成病死羊病料樣本采集后,將病料與生理鹽水1:5混合,充分研磨并處理后,接種到血液瓊脂培養(yǎng)基和肉湯培養(yǎng)基中,培養(yǎng)溫度條件為37 ℃,經(jīng)過24 h培養(yǎng),培養(yǎng)環(huán)境為厭氧兼有氧環(huán)境。肉湯變得渾濁,無氣泡產(chǎn)生[2]。血液瓊脂培養(yǎng)基中,菌落呈現(xiàn)出圓形的外觀,表面光滑、透明,周圍環(huán)繞著溶血環(huán)。透過光線檢查菌落顏色時(shí),發(fā)現(xiàn)呈現(xiàn)出藍(lán)灰色的特征。符合李氏桿菌培養(yǎng)特性,說明病羊患有腦炎型李氏桿菌病。
5.2.3 運(yùn)動(dòng)性檢查
在檢查時(shí),應(yīng)選擇采用血清葡萄糖甘油肉湯作為病料樣本的純培養(yǎng)物,然后在半固體培養(yǎng)基完成穿刺接種,培養(yǎng)溫度條件是20 ℃,培養(yǎng)時(shí)間是3 d。通過鏡檢觀察,如果發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)的菌體符合李氏桿菌特征,且細(xì)菌可以沿著穿刺線生長,整體呈倒立的傘狀,細(xì)菌能夠移動(dòng),說明病死羊因感染李氏桿菌患病。
5.3.1 與羊腦包蟲病的鑒別診斷
羊腦包蟲病也會出現(xiàn)醉酒樣走路、肌肉痙攣等癥狀,但不同之處在于,患有腦包蟲病的病羊也會直線走動(dòng),不會原地轉(zhuǎn)圈。受腦包蟲的寄生刺激,病羊還會出現(xiàn)頻繁低頭、仰頭等動(dòng)作,這與羊李氏桿菌病有很大區(qū)別。
5.3.2 與羊鼻蠅蛆的鑒別診斷
羊鼻蠅蛆和李氏桿菌2種疾病都會導(dǎo)致病羊精神沉郁、視力減弱、運(yùn)動(dòng)失調(diào)。但不同之處在于,羊鼻蠅蛆會導(dǎo)致羊興奮或者沉郁狀態(tài)交替發(fā)生,在鼻孔處,還會流出分泌物帶有血液,且病羊鼻腔因?yàn)橄壡纳碳?還會頻繁的打噴嚏,這與羊李氏桿菌病有很大區(qū)別。
5.3.3 與羊腦灰質(zhì)軟化病的鑒別診斷
羊腦灰質(zhì)軟化病和李氏桿菌病都會讓羊出現(xiàn)原地轉(zhuǎn)圈,視力減退、運(yùn)動(dòng)失調(diào)等神經(jīng)癥,但患腦灰質(zhì)軟化病的病羊體溫不會升高,剖檢發(fā)現(xiàn)病死羊大腦皮層灰質(zhì)非常地柔軟,伴有增生現(xiàn)象,這與羊李氏桿菌病有很大區(qū)別。
羊李氏桿菌病主要通過糞口途徑傳播,外傷也會造成該疾病感染,衛(wèi)生狀況不佳、飼養(yǎng)密度過大、飼喂不合理等也會增加李氏桿菌病的發(fā)病率。
每天按時(shí)打掃羊舍,清除羊舍內(nèi)的糞便,可以有效切斷糞口傳播的途徑。清掃完羊糞后再用清水沖洗1遍羊舍,確保羊舍干凈整潔。清掃的羊糞應(yīng)統(tǒng)一運(yùn)往外部進(jìn)行堆肥,利用堆肥發(fā)酵技術(shù)滅殺細(xì)菌病毒,并完成羊糞肥料的再利用。
針對該病應(yīng)加強(qiáng)護(hù)欄、飼養(yǎng)器具設(shè)備的檢查,清除尖銳的鐵絲。將羊舍地面、運(yùn)動(dòng)場地尖銳的鐵片、碎石子、玻璃殘?jiān)鍜吒蓛?。飼喂時(shí)加強(qiáng)飼料檢查,清除摻雜在飼料內(nèi)的鐵片、鐵絲、石子等雜物,避免羊口腔受傷,可以有效預(yù)防李氏桿菌病[3]。同時(shí),還應(yīng)做好飼料的合理配比,飼喂全價(jià)飼料,不頻繁更換飼料,確保羊營養(yǎng)供應(yīng)全面均衡,提升羊抵抗力,降低羊李氏桿菌病發(fā)病率。
在羊舍內(nèi),要求槽位、活動(dòng)空間和休息場地面積足夠,綿羊1.5~2.5 m2/只為宜,山羊2.2~3 m2/只為宜,可以避免羊群相互踐踏、打架,預(yù)防羊受傷,從而避免羊李氏桿菌病的感染與傳播。
治療羊李氏桿菌病主要是抗菌消炎,改善羊身體不適癥狀。每只病羊按體質(zhì)量肌內(nèi)注射氨芐西林10 000~15 000 IU/kg、硫酸慶大霉素注射液6 000~12 000 IU/kg,用藥治療2次/d,早晚各1次,連續(xù)用藥3~5 d?;蛎恐徊⊙虬大w質(zhì)量肌內(nèi)注射地塞米松磷酸鈉注射液1 mg/kg、硫酸慶大霉素注射液4 000 IU/kg、磺胺六甲氧嘧啶鈉25 mg/kg、復(fù)合維生素B注射液0.5 mL/kg,進(jìn)行治療,用藥1次/d,連續(xù)用藥5~7 d,可以起到良好的治療效果[4]?;蜢o脈注射5%葡萄糖生理鹽水注射液200 mL、20%磺胺嘧啶鈉注射液10 mL/kg進(jìn)行治療,用藥2次/d,早晚各1次,連續(xù)用藥3~5 d。
如果病羊存在排尿困難的情況,在上述用藥基礎(chǔ)上,還可以加入40%烏洛托品注射液進(jìn)行治療,用藥量每次20 mL,具有良好的利尿效果。如果腦炎型李氏桿菌病腦炎神經(jīng)癥狀表現(xiàn)嚴(yán)重,例如病羊經(jīng)常原地轉(zhuǎn)圈、在羊圈內(nèi)胡亂沖撞,運(yùn)動(dòng)共濟(jì)失調(diào)等,還可以采用鹽酸氯丙嗪注射液進(jìn)行治療,每只病羊按體質(zhì)量1.5~2 mg/kg進(jìn)行肌內(nèi)注射,可以有效改善上述神經(jīng)癥狀。
李氏桿菌病是一種嚴(yán)重的傳染性疾病,疾病類型有敗血型、腦炎型等,其中腦炎型李氏桿菌病較為常見,對羊養(yǎng)殖產(chǎn)業(yè)的危害較大,因此應(yīng)提高防治,了解這種疾病的病原特點(diǎn)以及流行特點(diǎn),做好相關(guān)癥狀的辨別分析,結(jié)合病理剖檢以及各種診斷方法,做到早發(fā)現(xiàn)、早治療,以此來降低腦炎型李氏桿菌病的危害,減少該疾病帶來的養(yǎng)殖經(jīng)濟(jì)損失。