大口黑鱸又被稱為加州鱸、黑鱸,其肉質(zhì)好、無肌間剌,深受消費者喜愛。隨著水產(chǎn)養(yǎng)殖規(guī)模的擴大及集約化程度的提高,大口黑鱸的病害問題逐漸凸顯,特別是病毒性疾?。ㄈ绾绮什《綥MBV病等)。這些疾病尤其在苗種培育階段會導(dǎo)致高達(dá)90%的死亡率,造成巨大經(jīng)濟損失。因此,病害防控是大口黑鱸產(chǎn)業(yè)健康發(fā)展的關(guān)鍵。
“目前,大多數(shù)檢測方法依賴于中心化實驗室,通常需要超過兩天的時間來得出結(jié)果,嚴(yán)重影響了時效性?!鄙虾:Q蟠髮W(xué)水產(chǎn)與生命學(xué)院胡鵬教授表示,養(yǎng)殖戶往往只能依靠經(jīng)驗判斷疾病的暴發(fā),缺乏科學(xué)依據(jù)?!懊鎸@一挑戰(zhàn),實用化檢測技術(shù)需要解決兩個關(guān)鍵問題,即準(zhǔn)確、實時的結(jié)果輸出,以及便攜性和適應(yīng)資源有限環(huán)境的可擴展性,特別是養(yǎng)殖戶的塘口檢測需求?!?/p>
為應(yīng)對上述產(chǎn)業(yè)需求,上海海洋大學(xué)水產(chǎn)與生命學(xué)院胡鵬教授團(tuán)隊與杭州逸檢科技有限公司的宋金召教授團(tuán)隊合作,開發(fā)了一種新型的手持等溫核酸擴增裝置WeD-1。該設(shè)備使用LAMP-PfAgo技術(shù)進(jìn)行病原檢測,并能通過熒光追蹤實現(xiàn)水生病原體的雙重可視檢測。WeD-1裝置的便攜性、可重復(fù)使用性、用戶友好設(shè)計以及合理的成本使其成為一種理想的塘口現(xiàn)場快速檢測工具。WeD-1的設(shè)計允許快速而可靠地診斷水生病原體,其檢測系統(tǒng)的簡化大大減少了對大型設(shè)備、專門的實驗室環(huán)境和訓(xùn)練有素的技術(shù)人員的需求。
試驗結(jié)果表明,該設(shè)備在檢測LMBV DNA時顯示出顯著的敏感性和特異性。此外,其獨特的設(shè)計可通過使用不同的檢測靶標(biāo)顯示不同顏色來識別雙重病原感染。比較WeD-1和傳統(tǒng)PCR方法的檢測結(jié)果顯示,WeD-1的檢出率與PCR檢測結(jié)果一致,而且其檢測精度優(yōu)于1個拷貝/μL。同時,基于技術(shù)優(yōu)勢,能在40 min以內(nèi)讀出結(jié)果,準(zhǔn)確率>96%,并能同時檢測8個樣本,單樣本檢測成本控制在20元/反應(yīng)以下。
“現(xiàn)在,我們可以在塘口為大口黑鱸高效且精準(zhǔn)地做上‘核酸檢測?!焙i介紹,WeD-1裝置及其檢測技術(shù)提供了一種有效的工具,可用于大口黑鱸主要病原體的現(xiàn)場準(zhǔn)確快速檢測,對于加速病害的快速診斷和減少水產(chǎn)行業(yè)因病原微生物造成的損失具有重要意義。
相關(guān)研究成果發(fā)表于Biosensors and Bioelectronics期刊。
(來源:上海海洋大學(xué))