李萌 曾婷婷 楊金初 徐永明 李歡 馬林 饒智

文章編號(hào)：2096-398X2024）03-0038-08

（1.鄭州輕工業(yè)大學(xué) 煙草科學(xué)與工程學(xué)院， 河南 鄭州 450001； 2.河南中煙工業(yè)有限責(zé)任公司 技術(shù)中心， 河南 鄭州 450000； 3.廣西中煙工業(yè)有限責(zé)任公司 柳州卷煙廠， 廣西 柳州 545001； 4.紅云紅河煙草（集團(tuán)）有限責(zé)任公司， 云南 昆明 650202）

摘 要：為探究應(yīng)用冠突散囊菌固態(tài)發(fā)酵提升低次煙葉品質(zhì)的可行性，從茯磚茶中分離篩選冠突散囊菌并接種于低次煙葉進(jìn)行固態(tài)發(fā)酵，通過(guò)感官評(píng)吸考察固態(tài)發(fā)酵對(duì)煙葉品質(zhì)的影響，應(yīng)用同時(shí)蒸餾萃取和GC/MS檢測(cè)固態(tài)發(fā)酵過(guò)程中1、3、5、7 d的煙葉主要致香成分的變化.結(jié)果表明，從茯磚茶中成功分離到候選菌株GT-1，經(jīng)形態(tài)和分子生物學(xué)鑒定確認(rèn)為冠突散囊菌.將GT-1接種于低次煙葉進(jìn)行固態(tài)發(fā)酵，發(fā)酵5天煙葉感官質(zhì)量最佳，香氣量、香氣質(zhì)、濃度和余味較對(duì)照均有較為明顯改善.發(fā)酵煙葉中共檢測(cè)出33種主要致香成分，包含16種類胡蘿卜素降解產(chǎn)物、9種芳香族氨基酸轉(zhuǎn)化產(chǎn)物、1種葉綠素降解產(chǎn)物、1種類西柏烷降解產(chǎn)物、6種美拉德反應(yīng)產(chǎn)物.隨著固態(tài)發(fā)酵時(shí)間的延長(zhǎng)，煙葉主要致香成分總量呈現(xiàn)先上升后下降的趨勢(shì)，致香成分總量在第5 d達(dá)到最高，為402.03 μg/g；相較于未發(fā)酵煙葉，致香成分含量提高了22.54%，其中4，7，9-巨豆三烯-3-酮、香葉基丙酮、二氫獼猴桃內(nèi)酯、苯甲醇、苯乙醇、2-乙酰基吡咯等致香物質(zhì)含量顯著提高，極大的豐富了煙氣的甘甜香、煙草香、果香、花香等香氣.冠突散囊菌固態(tài)發(fā)酵可提高煙葉香氣物質(zhì)含量和種類，有效提升低次煙葉品質(zhì).

關(guān)鍵詞：冠突散囊菌； 固態(tài)發(fā)酵； 低次煙葉； 致香成分； 發(fā)酵時(shí)間

中圖分類號(hào)：TS45; S572??? 文獻(xiàn)標(biāo)志碼： A

Effect of the solid-state fermentation with Eurotium cristatum GT-1 on the quality of low-grade tobacco leaves

LI Meng1， ENG Ting-ting1， YANG Jin-chu2， XU Yong-ming2， LI Huan3， MA Lin1， RAO hi4*

1.College of Tobacco Science and Engineering， hengzhou University of Light Industry， hengzhou 450001， China; 2.Technology Center， China Tobacco Henan Industrial Co.， Ltd.， hengzhou 450000， China; 3.Liuzhou Cigarette Factory， China Tobacco Guangxi Industrial Co.， Ltd.， Liuzhou 545001， China; 4.Hongyun Honghe Tobacco（Group）Co.， Ltd.， unming 650202， China）

Abstract：To investigate the feasibility of solid-state fermentation of low-grade tobacco leaves with Eurotium cristatum，E.cristatum was isolated from Fuzhuan tea and inoculated into low-grade tobacco leaves for solid-state fermentation.Simultaneous distillation extraction and GC/MS were used to detect the changes in the main aroma components of tobacco leaves at 1，3，5，7 days during solid-state fermentation.Sensory evaluation was conducted to investigate the impact of solid-state fermentation time on tobacco quality.The candidate strain GT-1 was successfully isolated from Fuzhuan tea，and confirmed as E.cristatum by morphological and molecular identification.The results showed that the sensory quality of tobacco leaves was the best after fermentation for 5 days，and the aroma amount，concentration and aftertaste were significantly improved compared with untreated tobacco leaves.A total of 33 main aroma components were detected，including 16 carotenoid degradation products，9 aromatic amino acid conversion products，1 chlorophyll degradation product，1 of cembranoid degradation products，and 6 Maillard reaction products.With the extension of solid-state fermentation time，the total amount of main aroma components in tobacco leaves shows a trend of increasing and then decreasing.The total amount of aroma components reaches its highest point at 402.03 μg/g on the 5th day.Compared to the C，the content of aroma components increased by 22.54%.Among them，the content of aroma substances such as 4，7，9-macrostigmen-3-one，geranylacetone，dihydrokiwifruit lactone，benzyl alcohol，phenylethanol，and 2-acetylpyrrole were significantly increased，which greatly enriching the sweet，tobacco，fruit，flower aromas of the smoke.Solid-state fermentation with E.cristatum GT-1 can increase the content and variety of aromatic substances in tobacco leaves，and thus effectively improve the quality of low-grade tobacco leaves.

Key words：Eurotium cristatum； solid-state fermentation； low-grade tobacco leaves； aromatherogenic ingredients； fermentation time

0 引言

低次煙葉是卷煙生產(chǎn)過(guò)程中質(zhì)量較差的煙葉，具有香氣量不足、雜氣重、刺激性強(qiáng)等缺點(diǎn)，難以在配方中應(yīng)用或僅能用于低檔卷煙，如何提高低次煙葉的利用率是煙草行業(yè)中的研究熱點(diǎn)之一.煙葉固態(tài)發(fā)酵是提高煙葉品質(zhì)的一個(gè)重要環(huán)節(jié)，相比于液態(tài)發(fā)酵，固態(tài)發(fā)酵是一種接近自然狀態(tài)下的發(fā)酵，發(fā)酵工藝簡(jiǎn)單、穩(wěn)定，產(chǎn)物濃度高，發(fā)酵過(guò)程無(wú)廢水、廢氣產(chǎn)生［1］.微生物在煙草發(fā)酵過(guò)程中發(fā)揮重要作用，能夠降解低次煙葉中的糖類、蛋白質(zhì)、纖維素等物質(zhì)改善煙葉品質(zhì)［2］.薛云等［3］利用芽孢桿菌固態(tài)發(fā)酵處理廣西河池C4F煙葉，發(fā)酵后煙葉香氣質(zhì)有所改善，雜氣減小，提升了煙葉利用率.李萌等［4］通過(guò)混菌固態(tài)發(fā)酵低次煙葉發(fā)現(xiàn)，煙葉的揮發(fā)性致香成分含量增加，香氣質(zhì)和香氣量得到提升，煙葉品質(zhì)明顯改善.

冠突散囊菌Eurotium cristatum）俗稱“金花菌”，是茯磚茶發(fā)酵過(guò)程中的優(yōu)勢(shì)微生物［5］，能夠利用茶葉中的茶多酚、糖類等物質(zhì)，同時(shí)分泌纖維素酶、蛋白酶、果膠酶等胞外酶促進(jìn)茶葉物質(zhì)的代謝，從而形成茯磚茶特有的香味［6-8］.此外，研究人員發(fā)現(xiàn)冠突散囊菌能夠通過(guò)調(diào)節(jié)微生物菌群依賴的色氨酸代謝來(lái)緩解結(jié)腸炎的結(jié)腸損傷，具有降血糖、抑菌的作用［9，10］.冠突散囊菌目前主要應(yīng)用于茯磚茶及其它茶葉的固態(tài)發(fā)酵上［8，11］，在煙草中主要應(yīng)用在液態(tài)發(fā)酵中［12，13］，在固態(tài)發(fā)酵中應(yīng)用較少.因此，本研究從茯磚茶中篩選冠突散囊菌應(yīng)用于低次煙葉固態(tài)發(fā)酵，并探究發(fā)酵時(shí)間對(duì)于煙葉品質(zhì)的影響，評(píng)價(jià)冠突散囊菌固態(tài)發(fā)酵對(duì)煙葉增香和感官質(zhì)量提升的效果，旨在發(fā)掘適用于卷煙增香的微生物，改善低次煙葉的吸食品質(zhì)，為提升低次煙葉的工業(yè)可用性提供新的技術(shù)手段.

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)原材料

低次煙葉由云南中煙工業(yè)有限責(zé)任公司提供；茯磚茶購(gòu)自安化縣安榮茶業(yè)有限公司.

瓊脂粉（北京索萊寶科技有限公司）；氯化鈉（東京化成工業(yè)株式會(huì)社）；蛋白胨（成都普思生物科技有限公司）；牛肉膏（河南天孚化工有限公司）；酵母粉（中國(guó)醫(yī)藥集團(tuán)上海化學(xué)試劑公司）；2×Taq Master Mix（南京諾唯贊生物科技股份有限公司）；真菌基因組DNA提取試劑盒（生工生物工程（上海）股份有限公司）；引物由生工生物工程（上海）股份有限公司合成.

馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基（PDA）：去皮馬鈴薯200 g，葡萄糖20 g，瓊脂15 g.將去皮馬鈴薯切成塊，加入1 000 mL去離子水，煮沸10～20 min，用紗布過(guò)濾后，加入蒸餾水至1 000 mL.將pH值調(diào)整為7.0，經(jīng)121 ℃，20 min 高壓滅菌后，倒入已滅菌的培養(yǎng)皿中，等待冷卻.

酵母浸出粉胨葡萄糖培養(yǎng)基（YPD）：葡萄糖2 g，蛋白胨2 g，酵母粉1 g，100 mL去離子水，調(diào)節(jié)pH值至7.0，121 ℃高壓滅菌20 min.

1.2 實(shí)驗(yàn)儀器與設(shè)備

固態(tài)煙葉發(fā)酵反應(yīng)艙（鄭州輕工業(yè)大學(xué)研制）；恒溫培養(yǎng)箱（濟(jì)南愛(ài)來(lái)寶儀器設(shè)備有限公司）；LX-C35L型立式自動(dòng)電熱壓力蒸汽菌器（合肥華泰醫(yī)療設(shè)備有限公司）；小型勻漿機(jī)（上海凈信實(shí)業(yè)發(fā)展有限公司）；離心機(jī)（ThermoFisher賽默飛世爾科技公司）；PCR儀（AppliedBiosystems美國(guó)應(yīng)用生物系統(tǒng)公司）；電泳儀（BIO-RAD伯樂(lè)生命醫(yī)學(xué)產(chǎn)品有限公司）.

1.3 實(shí)驗(yàn)方法

1.3.1 菌株的分離純化及鑒定

稱取10 g茯磚茶葉于250 mL錐形瓶中，加入90 mL無(wú)菌水，于30 ℃、180 r/min條件下振蕩2 h后，將菌懸液稀釋成10-2～10-7的濃度梯度，均勻涂布在PDA平板中，置于30 ℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)48 h，待黃色“金花”狀的菌落長(zhǎng)出后進(jìn)行分離鑒定并保藏.

形態(tài)學(xué)鑒定：將分離純化得到的菌株進(jìn)行活化，接種至PDA培養(yǎng)基，30 ℃培養(yǎng)至形成菌落，顯微鏡下觀察菌絲和孢子形態(tài).

分子生物學(xué)鑒定：應(yīng)用試劑盒提取PDA培養(yǎng)基培養(yǎng)得到的單菌落菌株基因組DNA，以此為模板進(jìn)行PCR擴(kuò)增.引物為真菌鑒定通用引物ITS1 5′-TCCGTAGGTGAACCTGCGG-3′）和ITS4（5′-TCCTCCGCTTATTGATATGC-3′）. PCR擴(kuò)增體系（20 μL）為：2×Taq Master Mix 10 μL；上下游引物各0.5 μL；模板DNA 2 μL；ddH2O補(bǔ)足至20μL.PCR擴(kuò)增條件為：94 ℃預(yù)變性4 min；94 ℃變性30 s，52 ℃退火50 s，72 ℃延伸40 s，35 個(gè)循環(huán)；72 ℃再延伸7 min，4 ℃保存.擴(kuò)增產(chǎn)物送往生工生物工程（上海）有限責(zé)任公司測(cè)序，測(cè)序結(jié)果在NCBI（National Center of Biotechnology Information，美國(guó)國(guó)家生物信息技術(shù)中心）數(shù)據(jù)庫(kù)進(jìn)行BLAST同源性比對(duì)，利用MEGA 7軟件構(gòu)建系統(tǒng)發(fā)育樹鑒定菌株［14］.

1.3.2 固態(tài)發(fā)酵

將冠突散囊菌GT-1于PDA平板培養(yǎng)基上活化2次.超凈工作臺(tái)中用接種鏟刮取孢子于100 mL已滅菌帶有玻璃珠的無(wú)菌水內(nèi)，振搖20 min，用脫脂棉過(guò)濾到新的無(wú)菌燒瓶?jī)?nèi)，制成均勻的孢子懸浮液，通過(guò)血球計(jì)數(shù)法［15］得到孢子懸浮液濃度為1×106 CFU/mL（該孢子懸浮液用于接種）.以上微生物實(shí)驗(yàn)均無(wú)菌操作.動(dòng)態(tài)固態(tài)發(fā)酵條件為GT-1接種量10%，濕度 70%，溫度28 ℃，轉(zhuǎn)速15 rpm/min.

試驗(yàn)共分為原樣、對(duì)照組和處理組三組進(jìn)行.原樣煙葉不接種GT-1，平衡48 h后直接制樣進(jìn)行致香成分檢測(cè)和評(píng)吸.對(duì)照組煙葉不接種GT-1，平衡48 h后直接放入固態(tài)發(fā)酵反應(yīng)艙中發(fā)酵7天，分別在1，3，5，7 d取出進(jìn)行感官評(píng)吸.處理組煙葉平衡48 h后噴灑菌懸液，放入固態(tài)發(fā)酵反應(yīng)艙中發(fā)酵7天，分別在第1、3、5、7 d取出進(jìn)行感官評(píng)吸并測(cè)定煙葉揮發(fā)性致香成分含量.試驗(yàn)均重復(fù)3次.

1.3.3 煙葉致香成分的測(cè)定

采用同時(shí)蒸餾萃取技術(shù)結(jié)合氣相色譜/質(zhì)譜（GC/MS）聯(lián)用測(cè)定發(fā)酵煙葉揮發(fā)性致香成分［4］.將發(fā)酵后的煙葉在 40 ℃ 烘箱中干燥，粉碎機(jī)粉碎后過(guò)孔徑為 0.425 mm 篩.準(zhǔn)確稱取 25 g 煙末樣品、30 g 氯化鈉和 200 mL水放入同時(shí)蒸餾萃取裝置一端的圓底燒瓶中，裝置的另一端盛有 60 mL 二氯甲烷，在 60 ℃下水浴加熱，同時(shí)蒸餾萃取 2.5 h.同時(shí)蒸餾萃取完成后，二氯甲烷萃取液用無(wú)水硫酸鈉干燥，4 ℃下靜置過(guò)夜，過(guò)濾，加入1 mL的內(nèi)標(biāo)物（乙酸苯乙酯，二氯甲烷作為溶劑）后濃縮，萃取液濃縮不足 1 mL 時(shí)，用二氯甲烷定容至 1 mL，過(guò)0.22 μm 濾膜于 2.0 mL 的色譜瓶中，立即進(jìn)行上機(jī)檢測(cè).

GC/MS 檢測(cè)條件：色譜柱為HP-5MS60 m×0.25 mm×0.25 μm）；進(jìn)樣口溫度280 ℃；載氣為高純氦氣；柱溫箱為程序升溫，起始溫度50 ℃保持1 min，以4 ℃/min升至148 ℃保持1 min，以2 ℃/min升至172 ℃保持1 min，以4 ℃/min升至280 ℃保持5 min；分流比5∶1；流速3.0 mL/min.離子源溫度230 ℃；四極桿溫度 150 ℃；EI 離子源 70 e V；質(zhì)量掃描范圍35～550 amu；采用NIST 17檢索.

1.3.4 感官評(píng)吸

分別將未發(fā)酵煙葉、對(duì)照和接菌發(fā)酵煙葉切絲后進(jìn)行卷制，置于溫度（22±1） ℃、相對(duì)濕度（60±2）%的恒溫恒濕箱中平衡48 h.由7 人組成的專業(yè)評(píng)吸小組根據(jù)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) YC/T 138-1998［16］中的方法進(jìn)行評(píng)吸，對(duì)抽吸結(jié)果進(jìn)行感官質(zhì)量評(píng)價(jià).

1.4 數(shù)據(jù)分析

應(yīng)用 Excel 2010處理原始數(shù)據(jù).應(yīng)用SPSS 22.0 對(duì)試驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行差異顯著性分析和多重比較.

2 結(jié)果與討論

2.1 菌株的分離純化及鑒定

2.1.1 菌落形態(tài)特征分析

候選菌株GT-1接種在PDA培養(yǎng)基上生長(zhǎng)良好，菌落表面致密，孢子呈黃色（圖1），與茶葉表面的“金花”形態(tài)類似.在100倍油鏡下觀察其菌株形態(tài)，該菌株孢子呈圓形，大部分聚集于菌絲頂端，與菌絲緊密相連，菌絲無(wú)隔膜（圖2）.

2.1.2 菌株分子生物學(xué)鑒定

從茯磚茶分離純化出的疑似冠突散囊菌的ITS 序列擴(kuò)增產(chǎn)物的電泳結(jié)果如圖3所示（圖中M為Marker），在550 bp處有單一、明亮且清晰條帶.獲得的ITS序列在NCBI數(shù)據(jù)庫(kù)進(jìn)行BLAST同源性比對(duì)顯示，該菌株與冠突散囊菌（E.cristatum）的序列相似度度為100%.應(yīng)用GT-1菌株和近緣菌株ITS序列構(gòu)建的系統(tǒng)發(fā)育樹如圖4所示.GT-1菌株與冠突散囊菌聚為一支，結(jié)合菌落和孢子形態(tài)確定菌株GT-1為冠突散囊菌.

2.2 冠突散囊菌GT-1發(fā)酵煙葉感官評(píng)吸

由7位評(píng)吸人員組成的評(píng)吸小組分別對(duì)原樣、無(wú)菌水處理對(duì)照樣和GT-1發(fā)酵煙葉卷制而成的卷煙進(jìn)行評(píng)吸，并按照1.3.4中所述的評(píng)分方法進(jìn)行評(píng)分，取評(píng)分的平均值繪制成圖5.由圖5可知，噴灑無(wú)菌水發(fā)酵1、3、5和7d的對(duì)照煙葉感官質(zhì)量與未發(fā)酵原樣類似，僅勁頭略有下降，香氣質(zhì)和香氣量均無(wú)改善.低次煙葉感官質(zhì)量較差，主要表現(xiàn)香氣量不足、香氣質(zhì)不佳且雜氣重、余味不佳.添加GT-1顯著提高了供試煙葉的感官質(zhì)量，發(fā)酵5 d的評(píng)吸結(jié)果最好，其次是發(fā)酵3 d.經(jīng)過(guò)接菌處理發(fā)酵后，煙葉的香氣量、濃度和余味均有較為明顯的改善，雜氣減輕，對(duì)勁頭影響不大或略有降低.微生物種群是影響發(fā)酵質(zhì)量的關(guān)鍵因素，本研究中直接發(fā)酵未能改善供試煙葉感官質(zhì)量，推測(cè)可能是煙葉攜帶微生物缺乏對(duì)煙葉感官質(zhì)量有正向作用的功能微生物所致.

2.3 冠突散囊菌GT-1發(fā)酵煙葉主要致香成分變化

煙葉的致香物質(zhì)是評(píng)價(jià)煙葉品質(zhì)的重要指標(biāo)［17］，接種冠突散囊菌GT-1發(fā)酵煙葉的香氣質(zhì)和香氣量均較原樣顯著提升.通過(guò)同時(shí)蒸餾萃取和GC/MS對(duì)不同發(fā)酵時(shí)間冠突散囊菌GT-1發(fā)酵煙葉的致香成分進(jìn)行檢測(cè)，并和原樣的檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行比較，其致香成分變化如圖6和表1所示.煙葉樣品中共檢測(cè)出33種主要致香成分，根據(jù)香味前體物質(zhì)分類可分為五類，即類胡蘿卜素降解產(chǎn)物、芳香族氨基酸轉(zhuǎn)化產(chǎn)物、葉綠素降解產(chǎn)物、類西柏烷降解產(chǎn)物和美拉德反應(yīng)產(chǎn)物［18］，分別有16種、9種、1種、1種和6種.不同發(fā)酵時(shí)間煙葉致香成分具有明顯變化，致香成分含量呈現(xiàn)先上升后下降的趨勢(shì).隨著固態(tài)發(fā)酵時(shí)間的延長(zhǎng)，煙葉主要致香成分總量呈現(xiàn)先上升后下降的趨勢(shì)，推測(cè)是煙葉上接種的冠突散囊菌5 d后開(kāi)始衰亡、細(xì)胞代謝活力下降.與感官評(píng)吸結(jié)果一致，發(fā)酵5 d時(shí)致香成分含量達(dá)到最高，為402.03 μg/g，相較于未發(fā)酵煙葉，致香成分含量提高了22.54%，這可能是發(fā)酵煙葉感官質(zhì)量提升的重要原因.

新植二烯對(duì)煙葉的品質(zhì)有著重要的影響［19，20］，其含量在各個(gè)發(fā)酵階段占比均較高，發(fā)酵5天煙葉較對(duì)照含量提高12.67%.類胡蘿卜素降解產(chǎn)物是發(fā)酵中除新植二烯外含量最高的香氣物質(zhì)，類胡蘿卜素降解產(chǎn)物含量在第5 d最高（63.56 μg/g），較原樣含量提高了37.11%，該類物質(zhì)能夠減少煙葉刺激性，可增加花香和果香等香韻［21，22］.類胡蘿卜素降解產(chǎn)物中4，7，9-巨豆三烯-3-酮含量占比較高，具有甘甜香和煙草香［23，24］；香葉基丙酮含量變化最大，相較于原樣提高了192.37%，可豐富煙葉果香［25］，具有良好的自由基清除能力［26］.與在苦丁茶上研究結(jié)果類似［27］，發(fā)酵煙葉芳樟醇含量也有較大提升.除此之外，與原樣相比，發(fā)酵煙葉檢出了4種新的類胡蘿卜素降解產(chǎn)物（β-環(huán)檸檬醛、6-甲基-5-庚烯-2-醇、愈創(chuàng)木酚、4-環(huán)戊烯-1，3-二酮、3-羥基-2-丁酮），這些成分具有果香、甜香和香草香.

芳香族氨基酸轉(zhuǎn)化產(chǎn)物含量雖然占比較小，但也是煙葉重要的風(fēng)味組成，具有豐富的花香香味的苯甲醇和苯乙醇［28］在發(fā)酵過(guò)程中顯著變化，發(fā)酵5d分別提高了133.23%和85.81%.芳香族氨基酸轉(zhuǎn)化產(chǎn)物中產(chǎn)生了3種新物質(zhì)（3，4-二甲基苯甲醛、鄰苯二甲酸二丁酯、3-甲基苯酚），具有杏仁香和果香［29］.茄酮是煙葉致香物質(zhì)中類西柏烷降解產(chǎn)物的代表指標(biāo)［30］，具有新鮮胡蘿卜的香味，增加煙草香氣，使煙氣醇和細(xì)膩［31］，發(fā)酵5 d提高了72.86%.美拉德反應(yīng)產(chǎn)物2-乙酰基吡咯具有花香、清香［32］，發(fā)酵5d提高了183.64%.

冠突散囊菌發(fā)酵可顯著提高茶葉的香氣物質(zhì)含量與種類［27，33-35］，本研究在煙葉上也得了類似的研究結(jié)果.目前對(duì)于冠突散囊菌發(fā)酵產(chǎn)香的機(jī)制尚不清楚，推測(cè)可能與菌體生長(zhǎng)及代謝過(guò)程中對(duì)大分子香氣前體物的降解［36］、芳香物質(zhì)的合成［37，38］及分泌胞外酶的催化作用［39，40］有關(guān)，未來(lái)可綜合應(yīng)用化學(xué)分析和代謝組學(xué)、基因組學(xué)及轉(zhuǎn)錄組學(xué)等高通量組學(xué)技術(shù)開(kāi)展進(jìn)一步研究.

3 結(jié)論

本研究從茯磚茶茶葉中分離、篩選得到一株冠突散囊菌GT-1并將其應(yīng)用于煙葉固態(tài)發(fā)酵.發(fā)酵后煙葉感官質(zhì)量提升顯著，發(fā)酵5 d效果最佳，發(fā)酵后煙葉香氣質(zhì)和香氣量顯著提升，雜氣減少，余味舒適.發(fā)酵煙葉香味物質(zhì)種類和含量較對(duì)照煙葉均顯著提高，香味物質(zhì)含量總體呈現(xiàn)先升高再降低的趨勢(shì)，其中發(fā)酵5 d煙葉香味物質(zhì)含量最高，表明香氣物質(zhì)的增加可能是冠突散囊菌GT-1發(fā)酵煙葉感官質(zhì)量提升的重要原因.本研究首次將冠突散囊菌應(yīng)用于低次煙葉增香提質(zhì)，后續(xù)可進(jìn)一步對(duì)接種量、溫度、濕度及轉(zhuǎn)速等發(fā)酵條件發(fā)酵參數(shù)進(jìn)行優(yōu)化并對(duì)其增香機(jī)制進(jìn)行深入研究，為其在卷煙工業(yè)中的應(yīng)用提供基礎(chǔ)數(shù)據(jù).

參考文獻(xiàn)

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【責(zé)任編輯：蔣亞儒】

基金項(xiàng)目：國(guó)家自然科學(xué)基金項(xiàng)目（31401810）； 云南中煙工業(yè)有限責(zé)任公司科研項(xiàng)目（JB2022YL02）

作者簡(jiǎn)介：李 萌（1982—），男，河南長(zhǎng)葛人，講師，博士，研究方向：煙草生物技術(shù)

通訊作者：饒 智（1973—），男，云南昭通人，高級(jí)農(nóng)藝師，碩士，研究方向：煙草原料與卷煙工藝，rzhyhe@163.com