劉媛媛 馬強(qiáng) 張磊 李正男 孫平平

(內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué),呼和浩特,010018)

楊樹(Populus)為高大落葉喬木,因生長速度快、經(jīng)濟(jì)效益高,成為三北地區(qū)防護(hù)林、用材林和綠化的優(yōu)選樹種[1]。其中,新疆楊(Populusalbavar.pyramidalis)是林木生物學(xué)研究的重要模式樹種[2],因其抗逆性強(qiáng)、生長速度快、經(jīng)濟(jì)效益高等特點(diǎn)成為我國北部地區(qū)重要的經(jīng)濟(jì)林、用材林和防風(fēng)林樹種之一[3-4]。隨著楊樹的大面積種植,楊樹腐爛病作為楊樹的主要病害之一,在楊樹上的發(fā)生率達(dá)到20%～40%,嚴(yán)重區(qū)域達(dá)到90%[5],感病楊樹表現(xiàn)為樹干干腐或者枯梢,甚至整株死亡,對(duì)楊樹的生長、林業(yè)生態(tài)和經(jīng)濟(jì)的可持續(xù)發(fā)展造成了嚴(yán)重威脅[6-7]。

楊樹腐爛病主要由金黃殼囊孢菌Cytosporachrysosperma(有性型為Valsasordida)引起,病原菌以無性型危害為主[8-9]。此外,Valsanivea、C.davidiana、C.atrocirrhata、C.kantschavelii和C.tritici等也可引起該病害[10-13]。青海和內(nèi)蒙古是我國“三北”防護(hù)林工程建設(shè)的主要省和自治區(qū),楊樹成為當(dāng)?shù)刂匾姆里L(fēng)和造林樹種,但是由于寒冷、干旱等條件造成當(dāng)?shù)氐母癄€病發(fā)生尤其嚴(yán)重。目前,從青海地區(qū)的新疆楊、小葉楊(P.simonii)、河北楊(Populus×hopeiensis)、毛白楊(P.tomentosa)等分離到C.chrysosperma、C.gigaspora、Cryptosphaeriapullmanensis、C.ailanthicola等病原菌[8,14]。從內(nèi)蒙古地區(qū)的新疆楊、山楊(P.davidiana)和大青楊(P.ussuriensis)上分離發(fā)現(xiàn)了C.chrysosperma、C.davidiana、C.fugax、C.translucens和Cryptosphaeriapullmanensis等病原菌[8,14-15]。明確當(dāng)?shù)貤顦涓癄€病的病原種類將為病害的有效防控提供基礎(chǔ)。

青海和內(nèi)蒙古地區(qū)因晝夜溫差大,光照條件好等氣候特點(diǎn),成為李子(Prunussalicina)、杏(P.sarmeniaca)、金紅蘋果(Maluspumilacv. Jinhong)、海棠(M.spectabilis)和枸杞(Lyciumchinense)等果樹的高品質(zhì)產(chǎn)區(qū)[16-17]。其中,楊樹作為果園防護(hù)林的主要樹種,能有效降低風(fēng)力、風(fēng)速,減少風(fēng)害對(duì)果園的影響,提高果樹的抗逆能力,達(dá)到增產(chǎn)、增收的目的,成為當(dāng)?shù)刂饕姆里L(fēng)林樹種。楊樹腐爛病為典型的寄主主導(dǎo)型病害,除了危害楊屬(Populus)植物,還可危害柳屬(Salix)、榆樹屬(Ulmus)、胡桃屬(Juglans)等多個(gè)樹種[14,18-19]。明確該病害是否能夠侵染李子、杏、金紅蘋果、海棠和枸杞等果樹,將為果園病害的防控提供技術(shù)指導(dǎo)。

化學(xué)藥劑的施用是楊樹腐爛病防控的有效措施,劉淑香等[20]發(fā)現(xiàn)苯醚甲環(huán)唑微乳劑對(duì)楊樹腐爛病菌C.chrysosperma有良好的抑制效果。徐明等[21]測(cè)定了不同殺菌劑對(duì)楊樹腐爛病菌的毒力,發(fā)現(xiàn)吡唑醚菌酯對(duì)楊樹腐爛病菌的孢子萌發(fā)和菌絲生長抑制性最強(qiáng)。此外,多菌靈、戊唑醇和腈菌唑?qū)顦涓癄€病病菌菌絲生長也有顯著的抑制作用[22],但是由于不同地區(qū)楊樹腐爛病病原種類不同,以及同一種病原的不同株系之間的毒力也存在差異,因此針對(duì)當(dāng)?shù)夭≡M(jìn)行高效藥劑的篩選將為病害的有效防控和“減藥”措施提供重要的基礎(chǔ)。

作者前期從內(nèi)蒙古呼和浩特市的‘新疆楊’上分離得到Cryptosphaeriapullmanensis和C.chrysosperma病原菌[23]。2021年,在青海省西寧市發(fā)現(xiàn)多棵新疆楊表現(xiàn)出典型的腐爛病癥狀,為了明確引起青海省西寧市‘新疆楊’楊樹腐爛病病原種類,以及楊樹腐爛病菌對(duì)當(dāng)?shù)夭煌麡錁浞N的侵染能力,并篩選有效防控藥劑,本研究對(duì)采自青海省西寧市的楊樹腐爛病菌進(jìn)行分離和鑒定,以分離自青海省西寧市和內(nèi)蒙古呼和浩特市的楊樹腐爛病病原菌為供試菌株,測(cè)定其對(duì)5種當(dāng)?shù)刂髟怨麡涞那秩灸芰?以及對(duì)不同化學(xué)藥劑的敏感性,擬為兩地楊樹腐爛病的防控提供參考。

1 材料和方法

1.1 供試材料

供試病原菌菌株:CryptosphaeriapullmanensisYSFL1、CytosporachrysospermaYSFL3、C.chrysospermaYSFL4-2分離自內(nèi)蒙古呼和浩特市的‘新疆楊’,由內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)園藝作物病害病原生物學(xué)及病害綜合防控研究室保存[23]。

枝條樣品采集:2021年在青海省西寧市青海大學(xué)校園內(nèi)的‘新疆楊’上發(fā)現(xiàn)多棵樹表現(xiàn)腐爛病的癥狀,發(fā)病的楊樹表現(xiàn)為干腐型,發(fā)病部位樹皮龜裂,容易脫落,病斑有明顯的黑褐色邊緣,樹皮表面布滿黑色分生孢子器,病部皮層變暗褐色糟爛,易與木質(zhì)部剝離,甚至腐爛達(dá)木質(zhì)部。隨機(jī)選取有癥狀的5棵楊樹進(jìn)行取樣,取樣時(shí),沿病斑周圍切至木質(zhì)部取出整個(gè)病斑,將所采集的標(biāo)本裝入塑料袋且貼好標(biāo)簽,帶回內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)園藝作物病害病原生物學(xué)及病害綜合防控研究室冰箱4 ℃保存。室內(nèi)接種用的楊樹枝條、大紫李(P.salicina)、串枝紅杏(P.armeniacacv. Chuanzhihong)、海棠、金紅蘋果和中華枸杞(L.chinense)1～2年生枝條均采集自內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)校園。

供試藥劑:楊樹腐爛病菌敏感性測(cè)定藥劑購買于當(dāng)?shù)厥袌?chǎng),藥劑名稱、藥劑有效成分、藥劑類型以及生產(chǎn)公司信息見表1。

表1 6種供試藥劑的成分、劑型及其來源

1.2 青海新疆楊樹腐爛病病原菌分離純化和致病性測(cè)定

無菌操作箱內(nèi),選取樣品病健交界處切成5 mm×5 mm小塊,體積分?jǐn)?shù)為1%的NaClO消毒3 min,體積分?jǐn)?shù)為75%的酒精消毒2 min,無菌水清洗3次,置于孟加拉紅培養(yǎng)基中,25 ℃培養(yǎng)3 d,挑取菌落邊緣菌絲轉(zhuǎn)接于新的馬鈴薯葡萄糖瓊脂(PDA)培養(yǎng)基中,28 ℃培養(yǎng)并多次純化,直至得到單一菌株,純化后菌株用于下一步研究。

利用枝條接種法檢驗(yàn)致病性,將采集到的楊樹枝條截成約10 cm長,依次用體積分?jǐn)?shù)為1%的NaClO浸泡5 min,體積分?jǐn)?shù)為75%的酒精浸泡3 min,無菌水沖洗3次,風(fēng)干后用石蠟封住枝條兩端。用直徑4 mm的實(shí)心打孔器燙傷樹皮,在燙傷點(diǎn)接種已在PDA培養(yǎng)基上培養(yǎng)5 d、直徑6 mm的分離菌,用浸濕的無菌脫脂棉裹住接種位點(diǎn)后,用保鮮膜包扎,每個(gè)處理重復(fù)6個(gè)枝條。以只接種PDA培養(yǎng)基的枝條作為陰性對(duì)照。處理枝條置于鋪有雙層紗布的塑料盤中,保鮮膜封口保濕。一周后去掉保鮮膜,保持水分,觀察枝條發(fā)病情況。

1.3 青海新疆楊樹腐爛病致病菌的鑒定

形態(tài)學(xué)觀察:將分離到的致病菌接種于馬鈴薯葡萄糖瓊脂平板培養(yǎng)基上,28 ℃黑暗培養(yǎng),定期觀察并記錄菌落形態(tài)特征,并在顯微鏡下觀察孢子及分生孢子器的形態(tài)、大小等。

分子鑒定:收集致病菌菌絲,用真菌DNA提取試劑盒(生工生物工程(上海)股份有限公司,B518229)提取DNA。以提取的真菌DNA為模板,利用通用引物ITS1(5’TCCGTAGGTGAACCTGCGG3’)/ITS4(5’TCCTCCGCTTATTGATATGC3’)、Bt2a(5’GGTAACCAAATCGGTGCTGCTTTC3’)/Bt2b(5’ACCCTCAGTGTAGTGACCCTTGGC3’)分別擴(kuò)增致病菌的內(nèi)轉(zhuǎn)錄間隔區(qū)(ITS)和β微管蛋白序列(TUB2)。PCR反應(yīng)體系均為:2×M5Hipper超光速M(fèi)ix 10 μL、ddH2O 7 μL、DNA模板1 μL,上下游引物各1 μL;ITS的PCR程序:95 ℃ 3 min,94 ℃ 25 s,55 ℃ 30 s,72 ℃ 40 s,35個(gè)循環(huán);72 ℃ 10 min。TUB2序列在PCR反應(yīng)的退火溫度為61 ℃,其余同ITS序列。PCR擴(kuò)增產(chǎn)物經(jīng)體積分?jǐn)?shù)為1.2%的瓊脂糖電泳檢測(cè),用普通瓊脂糖凝膠DNA回收試劑盒(天根生化科技(北京)有限公司)純化、回收后,送至上海生工生物工程股份有限公司進(jìn)行測(cè)序。測(cè)序結(jié)果在美國國家生物技術(shù)信息中心(NCBI)上進(jìn)行BLAST同源序列比對(duì),采用MEGA11.0軟件的Clustal W對(duì)表2中的菌株序列進(jìn)行比對(duì)分析,按照ITS-TUB2的順序進(jìn)行首尾相連,用鄰接法(NJ)構(gòu)建系統(tǒng)發(fā)育進(jìn)化樹(校正值設(shè)定為1 000)。

表2 用于核酸一致性分析和系統(tǒng)進(jìn)化樹構(gòu)建所用參考序列

1.4 6株楊樹腐爛病病原菌對(duì)5種果樹的致病性測(cè)定

上述分離鑒定出的致病菌C.chrysospermaQHYSFL6、C.chrysospermaQHYSFL7、C.chrysospermaQHYSFL8和分離自內(nèi)蒙古呼和浩特的CryptosphaeriapullmanensisYSFL1、C.chrysospermaYSFL3、C.chrysospermaYSFL4-2,共6株病原真菌轉(zhuǎn)入PDA平板中28 ℃培養(yǎng)5 d,參照1.2方法分別接種大紫李、串枝紅杏、海棠、金紅蘋果和中華枸杞枝條,觀察并記錄發(fā)病情況。

1.5 6株腐爛病菌的藥劑敏感性測(cè)定

利用室內(nèi)菌絲生長速率法評(píng)價(jià)腐爛病菌C.chrysospermaQHYSFL6、C.chrysospermaQHYSFL7、C.chrysospermaQHYSFL8、CryptosphaeriapullmanensisYSFL1、C.chrysospermaYSFL3、C.chrysospermaYSFL4-2對(duì)市場(chǎng)上常用6種藥劑的敏感性。利用無菌水將供試藥劑稀釋至一定質(zhì)量濃度,按照不同比例加入到冷卻至50 ℃左右的馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基中,混合均勻后倒入直徑9 cm的培養(yǎng)皿中,獲得一系列有效質(zhì)量濃度的培養(yǎng)平板,每個(gè)質(zhì)量濃度重復(fù)3次。在含藥培養(yǎng)基中央接種供試病原菌菌餅(6 mm),以不加藥劑的馬鈴薯葡萄糖瓊脂平板為空白對(duì)照,25 ℃黑暗培養(yǎng)。待對(duì)照菌落菌絲基本長滿整皿后,利用十字交叉法垂直方向量取菌落直徑,采用下列公式計(jì)算菌絲生長的抑制率。

菌絲生長抑制率=[(對(duì)照菌落直徑-處理菌落直徑)/(對(duì)照菌落直徑-0.6)]×100%。

利用Excel 2020統(tǒng)計(jì)軟件整理藥劑敏感性數(shù)據(jù),橫坐標(biāo)是處理質(zhì)量濃度的對(duì)數(shù)值,縱坐標(biāo)是抑制率值,以求出毒力回歸方程(y=ax+b),計(jì)算相關(guān)系數(shù)(R),然后利用回歸方程計(jì)算6種供試藥劑對(duì)楊樹腐爛病菌絲生長的抑制中濃度(EC50),比較不同殺菌劑對(duì)病菌的抑制作用。

2 結(jié)果與分析

2.1 青海省楊樹腐爛病病原菌分離及致病性測(cè)定結(jié)果

對(duì)從青海省新疆楊采集到的樣品進(jìn)行分離、純化,共得到9株形態(tài)差異的菌株,命名為QHYSFL1～QHYSFL9。對(duì)分離、純化得到的9個(gè)菌株進(jìn)行致病性檢測(cè)。其中,接種菌株QHYSFL6、QHYSFL7、QHYSFL8的楊樹枝條在接種14 d后,從接種點(diǎn)開始發(fā)軟,接著橫向褐色病斑擴(kuò)展繞枝條一周,樹皮皺縮,且出現(xiàn)大量黑色分生孢子器,為典型的楊樹腐爛病癥狀(圖1)。

圖1 致病菌在楊樹枝條上的危害癥狀

2.2 青海省楊樹腐爛病病原菌鑒定

形態(tài)學(xué)觀察:菌株QHYSFL6、QHYSFL7、QHYSFL8在馬鈴薯葡萄糖瓊脂(PDA)培養(yǎng)基上培養(yǎng)3～5 d后,菌落顏色呈白色,放射狀分布,邊緣整齊。培養(yǎng)8 d,菌絲長滿培養(yǎng)基,黃灰色、黃白色至深褐色,培養(yǎng)基背面呈黃灰色及黃白色。培養(yǎng)20 d后,菌落均隨機(jī)長出黑色且呈現(xiàn)球狀孢子體的分生孢子器,可觀察到黃色孢子角產(chǎn)生。顯微鏡觀察QHYSFL6、QHYSFL7、QHYSFL8的分生孢子,為無色,單孢,香蕉型,孢子長為3.0～5.5 μm,菌絲直徑為1.1～5.0 μm(圖2)。從菌落特點(diǎn)和產(chǎn)孢子的形態(tài)特征,初步認(rèn)定QHYSFL6、QHYSFL7、QHYSFL8為殼囊孢屬[17,24]。

a、b、c分別為QHYSFL6、QHYSFL7、QHYSFL8;1、2、3依次為菌株皿內(nèi)培養(yǎng)8、12 d形態(tài)以及孢子形態(tài)。圖2 QHYSFL6、QHYSFL7、QHYSFL8的皿內(nèi)形態(tài)和分生孢子

分子鑒定結(jié)果:采用通用引物ITS(ITS1/ITS4)和TUB2(Bt2a/Bt2b)從菌株QHYSFL6、QHYSFL7、QHYSFL8分別獲得了長度為579、579、591 bp的ITS基因片段和496、497、508 bp的TUB2基因片段。將上述基因序列在NCBI的BLASTn程序進(jìn)行同源序列比對(duì),選取序列利用MEGA11.0對(duì)ITS-TUB2拼接序列構(gòu)建系統(tǒng)發(fā)育進(jìn)化樹(圖3),結(jié)果表明,QHYSFL6、QHYSFL7、QHYSFL8與C.chrysosperma聚在一支上,形態(tài)學(xué)結(jié)合分子序列可知QHYSFL6、QHYSFL7、QHYSFL8為C.chrysosperma。

圖3 基于ITS-β微管蛋白多基因序列的系統(tǒng)發(fā)育進(jìn)化樹

2.3 6株楊樹腐爛病菌對(duì)5種果樹枝條的侵染能力

寄主范圍測(cè)定結(jié)果顯示,供試的6株楊樹腐爛病病原菌均能侵染大紫李、串枝紅杏,但是不能侵染金紅蘋果、海棠和中華枸杞枝條(圖4)。CryptosphaeriapullmanensisYSFL1和C.chrysosperma(QHYSFL6、QHYSFL7、QHYSFL8、YSFL3、YSFL4-2)均可引起大紫李和串枝紅杏枝條上典型的腐爛病癥狀,接種21 d后,從接種部位開始凹陷,剝開后韌皮部和木質(zhì)部變?yōu)樽厣?有酒糟味;而接種的金紅蘋果、海棠和中華枸杞枝條在接種60 d均未發(fā)病。此外,雖然6株供試病原菌均能侵染大紫李和串枝紅杏,但是其致病能力均有差異(表3)。接種培養(yǎng)21 d,CryptosphaeriapullmanensisYSFL1發(fā)病率在20%～40%,病斑直徑為4 mm以下,其余5株菌的發(fā)病率為60%～100%,病斑平均直徑為6.00～11.50 mm。

a～e依次為大紫李、串枝紅杏、金紅蘋果、海棠、中華枸杞枝條;1～7依次為CK、QHYSFL6、QHYSFL7、QHYSFL8、YSFL1、YSFL3、YSFL4-2。圖4 6種楊樹腐爛病菌對(duì)5種果樹枝條的致病性測(cè)定結(jié)果

表3 6株楊樹腐爛病菌接種大紫李和串枝紅杏枝條21 d的致病結(jié)果

2.4 6株楊樹腐爛病菌對(duì)6種藥劑的敏感性比較

利用菌絲生長速率法構(gòu)建6株楊樹腐爛病病菌對(duì)不同藥劑的敏感性回歸方程,并計(jì)算其相關(guān)系數(shù)及EC50(表4)。楊樹腐爛病病菌回歸方程相關(guān)系數(shù)在0.667 5～1.000 0之間,6株楊樹腐爛病菌對(duì)6種藥劑敏感性的EC50在1.126 5×10-5～1.310 0×10-1mg/L之間,其中C.chrysosperma5個(gè)菌株的EC50在1.126 5×10-5～1.310 0×10-1mg/L之間,Cryptosphaeriapullmanensis的EC50在1.230 0×10-5～2.570 0×10-3mg/L之間。苯醚甲環(huán)唑處理6株菌的EC50在1.134 8×10-5～6.440 0×10-4mg/L之間,對(duì)病原菌抑制效果最好。不同菌株對(duì)不同藥劑的敏感性不同,腈菌唑處理的EC50在1.126 5×10-5～1.310 0×10-1mg/L之間,C.chrysospermaYSFL3菌株敏感性最強(qiáng),C.chrysospermaQHYSFL8菌株敏感性最弱;吡唑醚菌酯處理的EC50在9.000 0×10-4～6.140 0×10-2mg/L之間,C.chrysospermaQHYSFL7菌株敏感性最強(qiáng),C.chrysospermaQHYSFL6菌株敏感性最弱;戊唑醇處理的EC50在5.160 0×10-4～2.300 0×10-2mg/L之間,C.chrysospermaQHYSFL6菌株敏感性最強(qiáng),C.chrysospermaQHYSFL8菌株敏感性最弱;咪鮮胺處理的EC50值在5.946 2×10-5～6.390 0×10-3mg/L之間,CryptosphaeriapullmanensisYSFL1菌株對(duì)咪鮮胺的敏感性最強(qiáng),C.chrysospermaQHYSFL6的敏感性最弱。

表4 6株楊樹腐爛病菌對(duì)6種藥劑敏感性測(cè)定結(jié)果

3 討論

本研究利用形態(tài)學(xué)結(jié)合分子序列鑒定,確定青海西寧市新疆楊樹腐爛病病原菌菌株QHYSFL6、QHYSFL7、QHYSFL8均為C.chrysosperma。利用ITS和TUB2多基因序列構(gòu)建進(jìn)化樹,QHYSFL6、QHYSFL7、QHYSFL8與C.chrysosperma聚到一支。QHYSFL6、QHYSFL7、QHYSFL8都能形成分生孢子器,且分生孢子長為3.0～5.5 μm,形態(tài)學(xué)結(jié)合分子序列結(jié)果鑒定為C.chrysosperma。

前期研究表明,C.chrysosperma、C.translucens、C.fugax、C.kantschavelii、Cryptosphaeriapullmanensis、C.multicontinentalis、C.salicacearum、C.paratranslucens、C.davidiana等腐爛病病原菌在國內(nèi)楊樹上均可造成侵染,金黃殼囊孢屬(C.chrysosperma)是侵染新疆楊的主要病原菌[8]。除此之外,Cryptosphaeriapullmanensis、C.salicacearum、C.paratranslucens、C.tritici、V.nivea在新疆楊上也有報(bào)道[14,18]。美洲及伊朗白楊(P.tomentosa)和黑楊(P.nigra)、內(nèi)蒙古呼和浩特新疆楊、新疆箭桿楊(P.nigravar.thevestina)和胡楊(P.euphratica)上均發(fā)現(xiàn)楊樹腐爛病病原菌Cryptosphaeriapullmanensis[14,18,25-26]。陜西、甘肅、新疆、內(nèi)蒙古呼和浩特、加格達(dá)奇和烏蘭浩特等地區(qū)的新疆楊上都發(fā)現(xiàn)了C.chrysosperma(有性型V.sordida)[9,14,27-28]。青海湟中縣青楊(P.cathayana)、小葉楊(P.simonii),箭桿楊(P.nigravar.thevestina)和北京楊(P.×beijingensis)的楊樹病原菌均為C.chrysosperma[29]。本研究是首次從青海省的新疆楊樹上發(fā)現(xiàn)了病原菌C.chrysosperma,該結(jié)果對(duì)青海地區(qū)的楊樹腐爛病病原種類提供更多信息,為之后開展本土楊樹腐爛病防治研究奠定基礎(chǔ)。

已報(bào)道的C.chrysosperma寄主分為8個(gè)屬,分別為山楂屬(Crataegus)、栗屬(Castanea)、楊樹屬、槐屬(Styphnolobium)、桑樹屬(Morus)、柳屬、榆樹屬、胡桃屬[14,30-31]。Cryptosphaeriapullmanensis寄主有松屬(Pinus)、柳屬、葡萄(Vitisvinifera)、楊樹屬、沙棗(Elaeagnusangustifolia)[25-26,32]。本研究發(fā)現(xiàn),C.chrysosperma與Cryptosphaeriapullmanensis也可侵染大紫李和串枝紅杏,而不能侵染金紅蘋果、海棠和中華枸杞。楊樹作為果樹園的防護(hù)林被廣泛種植,本研究結(jié)合前期研究結(jié)果顯示,楊樹不易與仁果類的金紅蘋果、海棠以及枸杞發(fā)生腐爛病的交叉侵染,因此可以作為蘋果、海棠和枸杞園的防風(fēng)樹種;而已報(bào)道的山楂、沙棗、胡桃和本研究發(fā)現(xiàn)的大紫李、串枝紅杏等核果類果樹均易與楊樹發(fā)生交叉感染,促進(jìn)楊樹腐爛病菌侵染,因此,楊樹不易作為核果類果園的防風(fēng)林樹種。

C.chrysosperma和Cryptosphaeriapullmanensis皆為楊樹腐爛病的病原菌,本研究中利用CryptosphaeriapullmanensisYSFL1與5種C.chrysosperma接種不同果樹枝條,結(jié)果顯示,Cryptosphaeriapullmanensis的發(fā)病率和病斑直徑均小于供試病原菌C.chrysosperma,Cryptosphaeriapullmanensis相對(duì)C.chrysosperma侵染力更弱,進(jìn)一步解釋了楊樹腐爛病的主要病原菌是金黃殼囊孢屬(C.chrysosperma)[8]。QHYSFL6、QHYSFL7、QHYSFL8、YSFL3、YSFL4-2是C.chrysosperma同種菌的不同株系,均可侵染大紫李和串枝紅杏,但是致病能力均有差異。因此,生產(chǎn)實(shí)踐中要結(jié)合楊樹腐爛病的不同菌和同種菌不同株系進(jìn)行研究,為病害的精確防治提供思路。

本文利用C.chrysosperma的不同株系和兩種菌(C.chrysosperma、Cryptosphaeriapullmanensis)進(jìn)行藥劑試驗(yàn),結(jié)果顯示,不同藥劑對(duì)供試菌株的毒性存在差異,同時(shí),同種菌不同株系對(duì)藥劑的敏感性不同。因此,在楊樹腐爛病防控中要針對(duì)當(dāng)?shù)氐牟≡N類篩選高效藥劑。供試的6種藥劑對(duì)楊樹腐爛病菌均具有一定的抑制作用,其中,苯醚甲環(huán)唑?qū)?種供試病原菌的抑制效果最好,EC50值為1.134 8×10-5～6.440 0×10-4mg/L,可用苯醚甲環(huán)唑作為兩地楊樹腐爛病防控的首選藥劑。

4 結(jié)論

本研究鑒定出青海省西寧市新疆楊腐爛病致病菌為C.chrysosperma;通過寄主范圍檢測(cè)發(fā)現(xiàn)大紫李和串枝紅杏是Cryptosphaeriapullmanensis與C.chrysosperma的寄主,用楊樹作為核果類果樹防風(fēng)林時(shí)容易發(fā)生楊樹腐爛病的交叉感染;苯醚甲環(huán)唑、吡唑醚菌酯、多菌靈、腈菌唑、咪鮮胺和戊唑醇均對(duì)楊樹腐爛病菌有著較好的抑制作用,但是同種菌不同株系和不同菌對(duì)藥劑敏感性不同,因此在防控中應(yīng)根據(jù)當(dāng)?shù)夭≡N類選取高效藥劑或復(fù)配藥劑。該研究結(jié)果為楊樹腐爛病的防控提供基礎(chǔ)。