余慧，陳磊，杜然，姚紅梅，羅金燕

(上海市農(nóng)業(yè)技術(shù)推廣服務中心，上海 201103)

新德里番茄曲葉病毒(TomatoleafcurlNewDelhivirus，ToLCNDV)是一種對茄科、葫蘆科、豆科和錦葵科作物造成嚴重威脅的病毒，1995年首次在印度北部的番茄上發(fā)現(xiàn)[1]。隨后在亞洲、歐洲和非洲的多個國家均有報道，對黃瓜、甜瓜、西瓜、葫蘆、絲瓜、苦瓜、冬瓜、筍瓜、辣椒和土豆等多種作物造成嚴重危害[2-5]。ToLCNDV發(fā)生蔓延速度快，寄主范圍廣，歐洲和地中海植物保護組織(European and Mediterranean Plant Protection Organization，EPPO)于2017年將其列為檢疫病原體警戒名單。2010年，ToLCNDV首次在我國臺灣的甜瓜上報道發(fā)生[2]。ToLCNDV的傳入受到農(nóng)業(yè)農(nóng)村部和全國農(nóng)業(yè)技術(shù)推廣服務中心的高度重視，于2023年3月23日在全國范圍內(nèi)組織開展新德里番茄曲葉病毒專項調(diào)查工作。在查找國內(nèi)外相關(guān)文獻資料的基礎上，本文綜述了ToLCNDV的發(fā)生分布與危害、分子特征、寄主范圍與危害癥狀、傳播方式和復合侵染，并提出了相應的阻截防控建議，以期為我國植物檢疫部門開展該病毒的阻截防控提供參考。

1 發(fā)生分布與危害

1.1 發(fā)生分布

1995年，Padidam等[1]從印度新德里一個試驗田的番茄卷曲葉片中提取了總DNA，測定了印度番茄曲葉病毒的完整核苷酸序列，將ToLCV-India 病毒與其他雙生病毒的序列及生物學特征比較顯示，ToLCV-India是一種獨特的病毒。1998年在研究番茄雙生病毒的基因組時將印度番茄曲葉病毒(ToLCV-India)稱為新德里番茄曲葉病毒(TomatoleafcurlNewDelhivirus，ToLCNDV)。隨后，新德里番茄曲葉病毒在巴基斯坦、泰國和印度尼西亞等亞洲國家的多種植物上發(fā)生[6-8]。2012年之后，該病毒在伊朗和地中海盆地的中東地區(qū)發(fā)生[9]，隨后迅速蔓延至歐洲。2015年后傳入突尼斯等非洲國家[10]。此外，新德里番茄曲葉病毒還在亞洲的馬來西亞、斯里蘭卡和孟加拉國，歐洲的西班牙、意大利、希臘、法國和愛沙尼亞以及非洲的塞舌爾和摩洛哥等國家均有發(fā)生危害的報道[11-19]。

1.2 危害

ToLCNDV是一種極具破壞性的病毒。在印度，該病毒對番茄造成毀滅性損失[11，20]。除番茄外，ToLCNDV還可危害多種作物，如ToLCNDV在丁迪古地區(qū)佛手瓜上的發(fā)病率為50.3%～100%，產(chǎn)量損失約69.9%[21]；造成泰米爾納德邦地區(qū)佛手瓜產(chǎn)量損失高達60%以上[22]；對馬鈴薯的侵染率可達100%，造成嚴重的產(chǎn)量損失[23]；在茄子上的發(fā)病率約為60%～65%[24]；該病毒也是絲瓜黃化花葉病的主要原因，造成的產(chǎn)量損失高達100%[25]。在歐洲ToLCNDV對葫蘆科作物造成嚴重威脅，據(jù)報道，西班牙超過20%的西葫蘆和甜瓜、意大利南部坎帕尼亞地區(qū)80%～100%的南瓜受到ToLCNDV的危害[26-28]。

2 分類與分子特征

新德里番茄曲葉病毒(TomatoleafcurlNewDelhivirus，ToLCNDV)屬雙生病毒科(Geminiviridae)菜豆金色花葉病毒屬(Begomovirus)。ToLCNDV是一種單鏈DNA(ssDNA)病毒，是由2.5～2.7 kb的兩個圓形ssDNA(DNA-A和DNA-B)組分組成的雙生病毒[1]。DNA-A的病毒粒子感知鏈編碼外殼蛋白和前外殼蛋白，而互補鏈編碼病毒復制和轉(zhuǎn)錄以及抑制宿主防御所需的蛋白質(zhì)，DNA-A包括復制、基因表達控制和衣殼化所需的所有功能；DNA-B編碼的ORF與病毒在寄主植物細胞內(nèi)和細胞間運動有關(guān)，DNA-B包括參與細胞內(nèi)和細胞間病毒運動的基因。DNA-A組分能夠在寄主植物內(nèi)自主復制，但是寄主植物的感染和癥狀發(fā)展需要DNA-A和DNA-B編碼的轉(zhuǎn)錄物，兩者在病毒系統(tǒng)傳播和癥狀表達中都至關(guān)重要[1，29]。

3 寄主與癥狀

3.1 寄主范圍

ToLCNDV最早在印度番茄上被發(fā)現(xiàn)，隨后，茄科和葫蘆科等多種植物作為ToLCNDV的寄主被報道。近年來在多種栽培作物、花卉、觀賞植物、雜草及野生植物中檢測到該病毒。

據(jù)報道，ToLCNDV可危害茄科、葫蘆科、豆科、錦葵科、番木瓜科、傘形科和菊科的多種栽培植物。已報道的ToLCNDV栽培寄主包括茄科的番茄、辣椒、煙草、茄子和馬鈴薯[11，30]，葫蘆科的黃瓜、甜瓜、西瓜、瓠瓜、葫蘆[11]、絲瓜[31]、苦瓜[32]、西葫蘆[13]、冬瓜[33]、南瓜[34]和佛手瓜[35]，番木瓜科的番木瓜[11]，錦葵科的棉花、洋麻和秋葵[36]，菊科的生菜，豆科的綠豆、大豆和蠶豆[11，37]，傘形科的胡蘿卜和芹菜[11]，大戟科的蓖麻[38]以及唇形科的羅勒[39]等。

ToLCNDV的寄主植物還包括一些花卉和觀賞植物。如菊科的菊花、大麗花和萬壽菊，爵床科的鳥尾花，夾竹桃科的長春花和白花牛角瓜，木犀科的毛茉莉，罌粟科的罌粟，大戟科的守宮木和茄科的夜來香等[40-42]。

ToLCNDV還可侵染一些雜草和野生植物。目前報道的ToLCNDV雜草和野生植物寄主有：藜屬、藿香、鱧腸、銀膠菊、苦苣菜、竹葉菜、田旋花、水牛瓜、瓠瓜、噴瓜、大戟、珠子草、齒果酸模、龍葵和曼陀羅等[20，43-45]。

3.2 危害癥狀

ToLCNDV感染寄主植物的典型癥狀包括葉片卷曲、葉脈增厚、皺褶、葉緣紫色、葉面積減少、節(jié)間縮短和嚴重發(fā)育遲緩等。寄主植物不同癥狀表現(xiàn)略有差異。據(jù)報道，ToLCNDV危害番茄主要引起葉片黃化斑駁、向上或向下卷曲皺縮、幼葉嚴重卷曲、葉脈腫脹、葉緣變紫、葉片變小、節(jié)間縮短、果皮粗糙、開裂，植株矮小嚴重發(fā)育不良[10，20]；侵染馬鈴薯可造成葉片皺縮、卷葉和發(fā)育遲緩，并伴有明顯的花葉和斑駁[46]；感染后的佛手瓜植株表現(xiàn)為葉片黃化花葉、卷曲皺縮，果實畸形[21]；西葫蘆癥狀是黃化花葉、嚴重卷葉、幼葉葉脈膨大、節(jié)間縮短、果皮粗糙和果實小[14]；胡蘿卜感染該病毒從葉緣開始出現(xiàn)黃化花葉癥狀，逐漸加重，直到整個葉片變黃，危害嚴重時葉片縮小并伴有輕度卷曲[47]；ToLCNDV還可造成菊花葉片斑駁和向下卷葉，花數(shù)減少[42]。

4 傳播方式

4.1 煙粉虱自然傳播

粉虱是唯一已知的以循環(huán)持續(xù)方式傳播雙生病毒的媒介[48-49]，ToLCNDV以煙粉虱通過循環(huán)持久的方式自然傳播[2]。煙粉虱感染病毒后，病毒在其體內(nèi)不再繁殖，但會保持毒性，即使在暫時沒有寄主植物的情況下，該病毒仍可以維持，并在其整個生命周期中傳播病毒[50]。

4.2 機械摩擦傳播

ToLCNDV通過機械接種近距離傳播的特性已被多次證實。如：在印度引起馬鈴薯黃化花葉和畸形癥狀的 ToLCNDV 菌株的汁液通過機械傳播到煙草和馬鈴薯植株[46]；Chang等[2]報道一種能引起臺灣甜瓜花葉、卷葉和皺縮的ToLCNDV菌株也能機械傳播到煙草和一些葫蘆科作物；Sayed等[51-53]通過試驗表明，引起印度絲瓜黃化花葉的ToLCNDV分離株可通過汁液傳播到冬瓜、絲瓜、黃瓜和本氏煙上，且汁液摩擦接種可顯著提高傳播率；2015年López等[53]通過實驗證明，ToLCNDV西班牙分離株很容易通過金剛砂摩擦接種傳播到甜瓜和黃瓜等黃瓜屬作物上；Ruiz等[54]報道了在實驗室條件下ToLCNDV寄主植物可通過機械接種感染該病毒。

4.3 帶毒種子傳播

盡管雙生病毒的種子傳播特性是一個反復出現(xiàn)的爭論[55-57]，但ToLCNDV通過種子傳播的特性已經(jīng)被多次證實。2018年在印度泰米爾納德邦的佛手瓜中發(fā)現(xiàn)了ToLCNDV的種子傳播，首次報道了ToLCNDV的種子傳播性質(zhì)[21]；2020年在意大利的西葫蘆中也報道了ToLCNDV的種子傳播[58]；Sivalingam等[47]發(fā)現(xiàn)染病果實的種子發(fā)育出的幼苗受ToLCNDV危害，再次證明了ToLCNDV的種子傳播性質(zhì)。

5 與其他病毒復合侵染

菜豆金色花葉病毒屬病毒與其他病毒復合侵染現(xiàn)象較為普遍[59-60]。ToLCND作為菜豆金色花葉病毒屬病毒也存在與其他病毒復合侵染的現(xiàn)象，并在多種作物中發(fā)現(xiàn)該現(xiàn)象。如：在辣椒上發(fā)現(xiàn)ToLCNDV與拉合爾辣椒卷葉病(PepperleafcurlLahorevirus，PepLCLV)和辣椒卷葉病毒(Chilileafcurlvirus，ChLCV)相互作用，可誘導辣椒出現(xiàn)卷葉癥狀，且病毒DNA積累量更高[61-62]。在棉花上，Zaidi等[63]田間觀察到ToLCNDV與古吉拉特番茄曲葉病毒(TomatoleafcurlGujaratvirus，ToLCGuV)的混合侵染現(xiàn)象。Jyothsna等[4，64]通過實驗證明了ToLCNDV與ToLCGuV可混合侵染，且ToLCGuV的DNA-A可以反式復制ToLCNDV的DNA-B。Kumari等[65]發(fā)現(xiàn)，ToLCNDV與番茄蘭契卷葉病毒(TomatoleafcurlRanchivirus，ToLCRnV)存在混合侵染現(xiàn)象。Singh等[66]發(fā)現(xiàn)，ToLCNDV與巴豆黃脈花葉病毒(Crotonyellowveinmosaicvirus，CYVMV)復合侵染巴豆。Sharma等[67]在苦瓜中描述了ToLCNDV與小西葫蘆黃化花葉病毒(Zucchiniyellowmosaicvirus，ZYMV)的復合侵染現(xiàn)象。通常ToLCNDV與這些病毒的混合侵染大多是協(xié)同效應，即與這些病毒的混合感染會產(chǎn)生增強的癥狀[20]。

6 阻截防控建議

6.1 開展風險分析，加強風險管理

2017年，歐洲和地中海植物保護組織(EPPO)將ToLCNDV列為檢疫病原體警戒名單。ToLCNDV寄主廣泛，危害嚴重，傳播途徑多樣，傳播擴散風險高，一旦發(fā)生，可使用的防控措施有限。目前該病毒僅在我國臺灣有小面積報道發(fā)生。因此，建議植物檢疫機構(gòu)組織開展該病毒的風險評估，明確其可能的傳入途徑、適生范圍、適生程度和危害情況等，并根據(jù)風險評估結(jié)果提出相應的檢疫監(jiān)管措施。

6.2 加強檢疫監(jiān)管，防止疫情傳入擴散

ToLCNDV可通過種子種苗遠距離傳播，選用無毒種子種苗是防控ToLCNDV最有效的手段之一。因此，對外應嚴格檢疫審批，嚴防該病毒的傳入。建議農(nóng)業(yè)植物檢疫機構(gòu)加強對來自疫情發(fā)生國家和地區(qū)引進種子的審批管理，嚴格開展隔離試種期間的疫情監(jiān)測工作；海關(guān)加強對該病毒的檢測力度，發(fā)現(xiàn)疫情及時銷毀。對內(nèi)應加強檢疫監(jiān)管，嚴防其傳播擴散。建議農(nóng)業(yè)植物檢疫機構(gòu)加強對ToLCNDV寄主植物的檢疫監(jiān)管，嚴格開展產(chǎn)地檢疫和調(diào)運檢疫，嚴防帶毒種子流入市場。加強疫情監(jiān)測力度，發(fā)現(xiàn)疫情及時處理，避免ToLCNDV的傳播擴散和大面積爆發(fā)。

6.3 開展技術(shù)攻關(guān)，加強監(jiān)測預警

ToLCNDV作為一種寄主廣泛、傳播途徑多樣和危害性強的新傳入病毒，國內(nèi)缺乏對其生物學、發(fā)生危害特征、檢測、監(jiān)測和防控等相關(guān)技術(shù)的研究。因此，建議有關(guān)部門加強技術(shù)攻關(guān)與儲備，建立該病毒的監(jiān)測防控技術(shù)體系，以達到有效預警、及時發(fā)現(xiàn)、防止擴散和盡早根除的目的。

6.4 控制粉虱，降低自然傳播風險

ToLCNDV通過煙粉虱自然傳播，使用殺蟲劑、捕食性天敵、反光覆蓋膜和紫外線吸收片等物理屏障來控制粉虱[68]，減少由粉虱造成的ToLCNDV的傳播，從而降低ToLCNDV的發(fā)生和危害。

6.5 加強田間管理，降低田間發(fā)病率

ToLCNDV通過摩擦接觸傳播，農(nóng)事操作時注意隔離消毒，操作人員應佩戴一次性用品，操作工具及時消毒，防止摩擦接觸造成疫情的傳播擴散；通過合理的栽培措施，降低發(fā)病率，如早播、無作物期和無病毒移植等；加強田間管理，減少菌源，如及時清除染疫植物和田間雜草，減少菌源，降低田間發(fā)病率。

6.6 加強抗病育種，選育抗病品種

選用抗病品種是防控病毒病最有效的方法。目前已在部分葫蘆科作物和茄科作物上報道了ToLCNDV抗性品種和抗性基因。Islam等[25，69]篩選出了兩個抗ToLCNDV的絲瓜栽培品種，且每個品種都有一個控制ToLCNDV抗性的顯性基因；在甜瓜、南瓜和黃瓜等葫蘆科作物中也篩選到了抗ToLCNDV品種[26，54，70-71]；在孟加拉國的栽培番茄中篩選出抗ToLCNDV品種，并在幾個番茄品種中發(fā)現(xiàn)了與ToLCNDV抗性緊密相關(guān)的分子標記[72-73]。ToLCNDV抗病品種和抗性基因的篩選研究相對較少，更缺乏商品化的抗病品種，因此，應加強抗病性研究，選育出可商品化的抗病品種。