◎ 范美霞，申 健，高英莉

（菏澤市食品藥品檢驗(yàn)檢測(cè)研究院，山東 菏澤 274000）

隨著人類文明的進(jìn)步和社會(huì)的發(fā)展，水污染逐漸加劇。近年，隨著經(jīng)濟(jì)的快速發(fā)展，污水排放量大大增加，如食品生產(chǎn)廢水、煤礦廢水、造紙廢水等。據(jù)相關(guān)資料統(tǒng)計(jì)，2022 年，中國污水排放總量約為616.62 億m3。其中，農(nóng)副食品生產(chǎn)排放的廢水占據(jù)較大比例，對(duì)整個(gè)社會(huì)造成了嚴(yán)重危害。一方面，食品生產(chǎn)中的廢水及有機(jī)物質(zhì)會(huì)排入自然界，影響水質(zhì)，進(jìn)而影響植物的光合作用；另一方面，食品廠排放的廢水中含有添加劑、色素等有害物質(zhì)，會(huì)通過食物鏈進(jìn)入人體，威脅人體健康。因此，對(duì)食品廠的廢水處理加以研究，尤為重要。相關(guān)研究表明，在食品廠污染的水源中，存在多種病原類微生物，這些微生物有些是致病菌，會(huì)對(duì)人體健康造成嚴(yán)重的威脅[1]。

大量的有機(jī)物質(zhì)存在于各種水體，尤其在污染水體中含量更高，這樣就為各種微生物的生長提供了天然的營養(yǎng)。因此，污染水成為微生物生長的肥沃土壤。此外，人類、動(dòng)物的排泄物污染也是微生物的一個(gè)主要來源。水體中的致病性微生物大部分不是來自水體內(nèi)部，多是受到外界環(huán)境污染而產(chǎn)生的，特別是在受到排泄物污染之后，就會(huì)產(chǎn)生致病微生物。一般來說，水中常見的致病性細(xì)菌有志賀氏菌、沙門氏菌等。然而，在對(duì)水的指標(biāo)控制中，尤其在衛(wèi)生指標(biāo)上，要想逐一檢測(cè)水體中各種可能存在的致病微生物，執(zhí)行起來比較困難。因此，在實(shí)際工作中一般采用比較有代表性的菌群來對(duì)其進(jìn)行檢測(cè)、控制及分析，以觀察水體是否受到污染[2]、是否存在腸道病原微生物，以評(píng)價(jià)水質(zhì)，從而保障水體的衛(wèi)生安全。

當(dāng)前，國際上在檢測(cè)水質(zhì)受糞便污染程度時(shí)，一般會(huì)通過檢測(cè)其大腸桿菌數(shù)量，判斷水體的污染程度。我國水質(zhì)控制也采用國際上的做法，以大腸菌群作為指示菌，國標(biāo)GB 5749—2022 《生活飲用水衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)》明確規(guī)定，在生活飲用水中不應(yīng)檢出大腸桿菌[3]。

除此之外，在部分情況下，水體是否受到糞便等污染物污染，也可以用另外一個(gè)指標(biāo)來衡量，即水體中的細(xì)菌總數(shù)。一般來說，取合適的水樣在營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基上培養(yǎng)，48 h 后觀察計(jì)數(shù)，此結(jié)果稱為細(xì)菌總數(shù)。目前，世界各國對(duì)于控制飲用水的衛(wèi)生質(zhì)量，既可以采用大腸菌群等指標(biāo)衡量，也可以采用細(xì)菌總數(shù)這個(gè)指標(biāo)[4]來控制水體質(zhì)量。國標(biāo)GB 5749—2022《生活飲用水衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)》規(guī)定，生活飲用水的細(xì)菌總數(shù)不得檢出，菌落總數(shù)不超過100 CFU·mL-1或者100 MPN·mL-1[3]。

目前，我國現(xiàn)行的生活飲用水衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)（GB 5749—2022）明確規(guī)定了水中細(xì)菌總數(shù)和大腸菌群的限量指標(biāo)，并將其作為水體是否受到微生物污染的指標(biāo)?；诖耍狙芯繉?duì)某食品廠排放的污水進(jìn)行了為期1 個(gè)月的微生物跟蹤檢測(cè)，了解其污染程度，從而探究廢水污染的現(xiàn)狀，以期為污水處理和廢水再利用提供參考。

1 材料與方法

1.1 材料

分別取某食品廠的原水和排出的污水為水樣，采取每周三取樣1 次的檢測(cè)方式，連續(xù)跟蹤檢測(cè)1 個(gè)月。

1.2 方法

1.2.1 細(xì)菌檢測(cè)方法

①細(xì)菌總數(shù)的測(cè)定按照相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行[4-5]，先進(jìn)行營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基的制備，然后將刻度吸管、培養(yǎng)皿、試管以及培養(yǎng)基等置于121 ℃、大標(biāo)準(zhǔn)氣壓下，滅菌30 min。實(shí)驗(yàn)前，用消毒劑或者臭氧消毒潔凈區(qū)，消毒結(jié)束0.5 h 以上方可進(jìn)入潔凈區(qū)。②操作過程：將水樣分別制成1 ∶10、1 ∶100、1 ∶1 000 3 個(gè)梯度，將3個(gè)梯度水樣分別取樣1 mL，移至無菌的平皿中，每個(gè)梯度均做2 個(gè)平行樣。待營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基冷卻至50 ℃時(shí)，在平皿中傾注約20 mL 水樣，輕微晃動(dòng)，使樣品和培養(yǎng)基充分混勻，待培養(yǎng)基冷卻凝固后，將培養(yǎng)皿置于恒溫培養(yǎng)箱中，并將其溫度設(shè)置為37 ℃，倒置培養(yǎng)，24 h 后觀察生長情況，進(jìn)行平皿菌落計(jì)數(shù)。③計(jì)算結(jié)果時(shí)，要乘以稀釋倍數(shù)，得出最終結(jié)果。

1.2.2 大腸菌群檢測(cè)方法

在國家標(biāo)準(zhǔn)中，糞便污染的程度是用大腸菌群來衡量的。一般來說，需氧及兼性厭氧革蘭氏陰性無芽孢桿菌在37 ℃條件下生長，其能使乳糖進(jìn)行發(fā)酵，產(chǎn)酸產(chǎn)氣發(fā)生在24 h 以內(nèi)，此類菌群稱為總大腸菌群。水樣中總大腸菌群數(shù)含量的高低，不僅可以反映糞便污染水的情況，而且可以間接說明水體中是否存在腸道致病菌[6]。

水中的大腸菌群檢驗(yàn)一般采取多管發(fā)酵法和濾膜法來進(jìn)行，本實(shí)驗(yàn)采用多管發(fā)酵法，檢驗(yàn)步驟分為初發(fā)酵試驗(yàn)、平板分離和復(fù)發(fā)酵試驗(yàn)，主要操作過程如下。①將樣品制成3 個(gè)稀釋梯度，每個(gè)梯度各取1 mL，采用乳糖蛋白胨培養(yǎng)液對(duì)水樣進(jìn)行培養(yǎng)，培養(yǎng)條件為37 ℃、24 h，觀察有無產(chǎn)酸產(chǎn)氣情況，有產(chǎn)酸產(chǎn)氣出現(xiàn)的管為陽性。②將其培養(yǎng)物接種在伊紅美藍(lán)培養(yǎng)基上，觀察菌落特征，并進(jìn)行革蘭氏染色和顯微鏡鑒別。③將可疑菌落接種于乳糖蛋白胨培養(yǎng)液，進(jìn)行復(fù)發(fā)酵試驗(yàn)，并檢索MPN 表計(jì)算大腸菌群總數(shù)[7]。

2 結(jié)果與分析

2.1 細(xì)菌檢測(cè)結(jié)果

由表1 可知，在1 個(gè)月的追蹤檢測(cè)中，原水中細(xì)菌總數(shù)約為26 CFU·mL-1，廢水中細(xì)菌總數(shù)約為19 550 CFU/100 mL，與普通的原水相比，廢水的細(xì)菌污染水平高出3 個(gè)數(shù)量級(jí)，說明該食品廠排放的污水污染程度比較嚴(yán)重。因此，在下一步的污水排放中，要采取相關(guān)措施，以降低廢水的污染程度[8]。

表1 細(xì)菌檢測(cè)結(jié)果表

2.2 大腸菌群檢測(cè)結(jié)果

由表2 可知，原水的大腸菌群數(shù)約為0 MPN/100 mL，廢水約為3 MPN/100 mL。廢水和原水相比，污染程度大大提高，這說明廢水嚴(yán)重受到了糞便的污染。在下一步的污水排放整改中，要采取措施對(duì)廢水進(jìn)行處理，減少污水對(duì)環(huán)境和人類的危害[9]。

表2 大腸菌群檢測(cè)結(jié)果表

3 結(jié)語

本次實(shí)驗(yàn)主要對(duì)某食品廠排放的廢水進(jìn)行了1 個(gè)月的調(diào)查跟蹤研究，通過相關(guān)的檢測(cè)分析發(fā)現(xiàn)，細(xì)菌總數(shù)平均達(dá)195 500 CFU/100 mL，總大腸菌群約為3 MPN/100 mL，充分說明該廠排放的污水已經(jīng)嚴(yán)重受到微生物的污染，一旦廢水流到地下水當(dāng)中，被人類飲用后，就會(huì)嚴(yán)重威脅人們的健康和生命安全。因此，企業(yè)必須重視廢水的排放與處理。當(dāng)然，本研究也存在一定不足。本次調(diào)查僅檢測(cè)了細(xì)菌總數(shù)和大腸菌群，未對(duì)其中的致病菌進(jìn)行調(diào)查研究。未來，筆者將對(duì)該廠廢水的致病菌進(jìn)行跟蹤檢驗(yàn)，以期出具新的研究報(bào)告。此外，在下一步的調(diào)查研究中，筆者將針對(duì)廢水中有關(guān)的理化指標(biāo)，如pH、電導(dǎo)率、TOC、COD 以及重金屬等進(jìn)行追蹤檢測(cè)，以綜合分析廢水的污染情況，從而更好地指導(dǎo)廢水的處理和再利用工作。

目前，防止廢水微生物污染的方法有很多，如反滲透法、吸附法及超濾膜法等[10-15]。每種方法都有其各自的優(yōu)勢(shì)與劣勢(shì)，不同方法適用于不同的處理過程。未來，隨著科學(xué)技術(shù)的飛速發(fā)展和研究技術(shù)的不斷提高，人們對(duì)廢水的認(rèn)識(shí)會(huì)越來越深入，研究起來也會(huì)更加得心應(yīng)手，相信在不久的將來，廢水處理和再利用工作將會(huì)得到大幅提升。