聶文軍 杜君 王敏 劉方旭
DOI: 10.3969/j.issn.1003-1650.2024.04.032
隨著社會(huì)經(jīng)濟(jì)的發(fā)展,人們生活水平的提高,人們對(duì)藥物殘留、細(xì)菌耐藥性、環(huán)境污染以及食品安全等問題越來越關(guān)注。畜禽產(chǎn)品安全人們也受到高度關(guān)注,飼料禁抗、藥物限抗、替抗已經(jīng)成為需要解決的新問題。2019年,我國已進(jìn)入限抗、禁抗的畜牧業(yè)健康發(fā)展新時(shí)代。中藥因?yàn)槠浔旧韮?yōu)點(diǎn)在禁抗、替抗的時(shí)代背景下,受到人們?cè)絹碓疥P(guān)注。中藥在我國有著悠久的歷史,有著獨(dú)特的理論體系,它不但可以治療疾病,而且可以用于預(yù)防疾病,并且具有康復(fù)保健的作用。中藥不同的類型具有不同的作用,比如說它可以清熱瀉火,可以發(fā)散風(fēng)寒,可以清熱解毒,可以祛風(fēng)散寒,可以補(bǔ)氣補(bǔ)血,可以活血止痛等等。有的中藥還有增進(jìn)食欲、促進(jìn)生長、提高生產(chǎn)性能的作用。本試驗(yàn)重點(diǎn)研究中藥對(duì)林下雞生長性能及腸黏膜免疫球蛋白A(sIgA)的影響。試驗(yàn)將2000只1日齡的皖南三黃雞,隨機(jī)分成2組,每組設(shè)立5個(gè)重復(fù)小組,每個(gè)重復(fù)小組各200只;Ⅰ組為試驗(yàn)組,飼料中添加中藥,Ⅱ組為對(duì)照組,不添加任何藥物。試驗(yàn)用時(shí)40周,試驗(yàn)結(jié)束后采集腸道,評(píng)估中藥對(duì)雞生長性能及腸道免疫水平、腸道形態(tài)的影響。結(jié)果顯示,試驗(yàn)組雞死淘率顯著低于對(duì)照組;試驗(yàn)組的平均日增重顯著高于對(duì)照組,料肉比低于對(duì)照組;試驗(yàn)組十二指腸腸黏膜免疫球蛋白A含量顯著高于對(duì)照組。其次,腸組織經(jīng)過HE染色分析:試驗(yàn)組的十二指腸形態(tài)較對(duì)照組相對(duì)完整,無明顯炎性浸潤。綜上,研究表明日糧中添加中藥可降低雞死淘率,提高雞生長性能和腸道免疫功能。
一、 實(shí)驗(yàn)材料與方法
1、實(shí)驗(yàn)藥物
中藥組使用藥物:益陽康、腸亦舒、硒芪素、呼亦舒、球利康、威加康,由南京農(nóng)業(yè)大學(xué)中獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室研發(fā),南京歐貝威生物技術(shù)有限公司提供。益陽康:黨參白術(shù)粗提物,用于改善動(dòng)物代謝,提高動(dòng)物活力和抗病力,促進(jìn)發(fā)病動(dòng)物恢復(fù)健康;用法用量:混飲,500g兌水1000kg;混飼,500g拌料500kg。腸亦舒:蒲公英粗提物,用于保護(hù)腸黏膜、改善腸道功能和促進(jìn)營養(yǎng)消化吸收;用法用量:混飲,500g兌水1000kg;混飼,500g拌料500kg。硒芪素;黃芪粗提物,用于提高動(dòng)物機(jī)體免疫力和抗感染能力,抗氧化自由基,提升免疫效果,延長疫苗保護(hù)時(shí)間;用法用量:混飲,500g兌水1000kg;混飼,500g拌料500kg。呼亦舒:甘草粗提物,用于保護(hù)呼吸道黏膜、清除呼吸道痰液、改善肺的凈化和呼吸功能。用法用量:混飲,500g兌水1000kg;混飼,500g拌料500kg。威加康:黃芪、人參葉等粗提物,用于提高動(dòng)物免疫力,改善營養(yǎng)吸收,提高抗應(yīng)激能力和促生長;混飼,500g拌料1000kg。
2、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物及分組
試驗(yàn)采用1日齡皖南三黃雞2000只,由南京市浦口區(qū)檸凰家庭農(nóng)場(chǎng)提供,0~6周齡在育雛室內(nèi)統(tǒng)一育雛,7~40周齡實(shí)施放牧散養(yǎng),密度為1000只/hm2。飼料采購自滁州正大有限公司,根據(jù)HY/T 33—2004 《肉仔雞飼養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)》設(shè)計(jì)營養(yǎng)水平、飼料搭配和喂料量。
2000只雞隨機(jī)平均分成2組,每組設(shè)立5個(gè)重復(fù)組,每個(gè)重復(fù)組200只。中藥組在飼料中添加中藥,所有中藥均嚴(yán)格按照說明書規(guī)定的劑量與方法進(jìn)行使用,對(duì)照組不添加任何藥物。兩組雞均參照《優(yōu)質(zhì)林下雞養(yǎng)殖技術(shù)》進(jìn)行飼養(yǎng)管理、營養(yǎng)水平、飼料搭配及免疫程序。研究過程中,所有實(shí)驗(yàn)雞白天在林間固定試驗(yàn)區(qū)域內(nèi)自由活動(dòng),晚上集中歸巢,并且喂養(yǎng)的飼料來源于同一廠家,飼料量均相同。
3、檢測(cè)指標(biāo)與方法
①比較兩組雞的死淘率。即通過飼養(yǎng)40周后兩組雞中死亡與淘汰的只數(shù),統(tǒng)計(jì)出死淘率。
②比較兩組雞的生長性能。飼養(yǎng)后每周末從每個(gè)重復(fù)單元中隨機(jī)選擇20只雞進(jìn)行稱重,并且每天記錄各重復(fù)單元的存欄數(shù)量、飼料消耗量,計(jì)算出平均日增重與料肉比。
③比較兩組雞腸黏膜免疫球蛋白A(sIgA)水平。分別從對(duì)照組與中藥組雞群中隨機(jī)抽取5只作為實(shí)驗(yàn)對(duì)象,對(duì)其嚴(yán)格禁食8h后實(shí)施頸動(dòng)脈放血致死,待雞死后解剖,取出小腸段,實(shí)施縱向切開,分別將雞十二指腸、空腸以及回腸上的黏膜刮取下來,腸黏膜跟生理鹽水按照質(zhì)量體積比1:1進(jìn)行稀釋,再將二者充分混合,置于離心機(jī)上離心處理15分鐘,離心完畢后將上清液分離出來測(cè)量sIgA的含量,測(cè)量方法選用雙抗夾心法,所有操作均嚴(yán)格按照儀器與試劑盒的說明書開展。
④觀察并對(duì)比兩組雞的腸道形態(tài)。測(cè)定方法如下:將小腸取出后,在沒有擠壓的情況下取相同位置的十二指腸(即肌胃與十二指腸后端3cm左右連接處)、空腸(十二指腸跟空腸連接處后10cm處)、回腸各2cm,應(yīng)用生理鹽水對(duì)其輕輕沖洗后,再放入多聚甲醛溶液中置于常溫下進(jìn)行保存,在固定處理超過24h后再將其從固定液中取出,將目標(biāo)部位的組織修剪平整,實(shí)施梯度乙醇脫水后浸蠟處理,浸好蠟的組織包埋并制作成切片,分別實(shí)施蘇木精染色與伊紅染色,染色完畢后封片,通過顯微鏡進(jìn)行觀察并采圖。
⑤檢測(cè)并對(duì)比兩組雞的免疫抗體情況。雞群均嚴(yán)格按照免疫程序同時(shí)同人同劑量進(jìn)行免疫,從第5周開始,隨機(jī)分別從中藥組和對(duì)照組中采集10只雞的血樣進(jìn)行禽流感H5、新城疫免疫抗體的檢測(cè),并對(duì)兩組結(jié)果進(jìn)行對(duì)比。
4、統(tǒng)計(jì)學(xué)方法
在本實(shí)驗(yàn)中,兩組雞數(shù)據(jù)的比較分析借助SPSS21.0數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)軟件,雞的數(shù)量用n進(jìn)行表示,觀察指標(biāo)中涉及計(jì)數(shù)的資料以百分?jǐn)?shù)進(jìn)行表示,涉及計(jì)量的資料用均數(shù)(±)進(jìn)行表示,分別用x2與t實(shí)施檢驗(yàn),當(dāng)P值低于0.05時(shí),提示差異明顯。
二、 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
1、 死淘率
對(duì)照組1000只,死淘85只,死淘率為8.50%,中藥組1000只,死淘42只,死淘率為4.20%。結(jié)果說明中藥可以降低雞群的死淘率,且組間差異具備統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。
2、 生長性能
對(duì)照組的平均日增重為13.70g,方差為0.24g,中藥組的平均日增重為15.19g,方差為0.21g;對(duì)照組的料肉比為5.17,方差為0.31,中藥組的料肉比為4.83,方差為0.24,且組間差異具備統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。中藥組相比對(duì)照組,可以提高雞群日增重,促進(jìn)飼料轉(zhuǎn)化率。
3、 腸道sIgA水平
采集雞的小腸段、空腸段、回腸段,檢測(cè)腸黏膜免疫球蛋白A含量,對(duì)照組各腸段的腸黏膜免疫球蛋白含量分別為:3.09 ng/ml、5.36 ng/ml、4.92 ng/ml,共13.37 ng/ml;中藥組分別為: 4.68ng/ml、7.12 ng/ml、8.06 ng/ml,共19.86 ng/ml。中藥組的腸黏膜免疫球蛋白A水平顯著高于對(duì)照組,且組間差異具備統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),試驗(yàn)證明中藥可以提高雞腸道黏膜免疫功能,抵抗病原微生物的侵害。
4、腸道形態(tài)
對(duì)照組:十二指腸明顯炎性浸潤,腸道上皮絨毛嚴(yán)重萎縮;中藥組:十二指腸腸道相對(duì)完整,炎性浸潤不明顯。結(jié)果表明:中藥組可以顯著控制腸道炎癥,保護(hù)腸道絨毛完整性。
5、免疫效果
對(duì)照組:禽流感H5N1 Re-11株的平均抗體效價(jià)分別為log2的5.3、6.2、7.4、8.2、9.5、9.8、8.4、7.2;新城疫的平均抗體效價(jià)分別為log2的4.5、5.6、7.2、9.2、10.3、9.8、9.5、8.9;中藥組:禽流感H5N1 Re-11株的平均抗體效價(jià)分別為log2的5.3、6.3、7.8、9.2、10.3、10.5、10.8、10.3;新城疫的平均抗體效價(jià)分別為log2的4.5、5.7、7.8、9.8、10.8、10.7、10.5、10.6。結(jié)果表明中藥組的禽流感、新城疫平均抗體效價(jià)比對(duì)照組高,并且抗體持續(xù)時(shí)間更長,說明中藥能夠提高雞體的免疫反應(yīng)。
三、 討論
1、中藥對(duì)雞的疾病防控和生長發(fā)育的作用
雞是一個(gè)有機(jī)整體,各個(gè)組織器官在結(jié)構(gòu)上相互關(guān)聯(lián)不可分割,功能互相協(xié)調(diào),某一部分發(fā)生疾病,就會(huì)影響雞只的健康。在當(dāng)今限抗、禁抗的大環(huán)境下,養(yǎng)殖業(yè)者都積極尋找替代品來防控動(dòng)物疾病,中藥常被作為替代品的首選。腸道作為畜禽消化飼料、吸收營養(yǎng)、抵抗病原微生物的重要場(chǎng)所,腸道的健康對(duì)保持畜禽健康生長具有重要意義。腸道形態(tài)、腸黏膜免疫水平是評(píng)價(jià)腸道健康及功能的重要指標(biāo)。腸黏膜分泌的主要免疫球蛋白-sIgA,對(duì)腸黏膜上皮的保護(hù)與穩(wěn)態(tài)調(diào)節(jié)起著重要的作用。大量研究證明:中藥具有提高畜禽免疫力,防控腸道疾病和促進(jìn)動(dòng)物生長等功效,因此,在飼料中添加中藥,觀察中藥對(duì)雞死淘率、生長性能、腸道健康等影響,可以為中藥代替抗生素用于疫病防控、促進(jìn)生長等方面提供一定的研究依據(jù)。歸納起來,中藥對(duì)雞的疾病防控和發(fā)育生長主要發(fā)揮以下作用:①增強(qiáng)免疫力。中藥中含有很多活性成分,比如多糖類、苷類等,可以有效增強(qiáng)特異性和非特異性免疫。中藥黃芪、杜仲等可以促進(jìn)淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化,提高細(xì)胞免疫功能。地黃、天冬等有促進(jìn)抗體產(chǎn)生的功效,也有利于增強(qiáng)體液免疫功能。②抗病毒抗菌,防治疾病。中藥抗菌成分,它們不僅能夠有效抑制有害菌的繁殖,還可以直接殺菌,阻止病毒侵害細(xì)胞。金銀花、穿心蓮、靈芝、連翹、人參等可以有效減少疾病發(fā)生、應(yīng)激現(xiàn)象和死亡數(shù)。③提高產(chǎn)蛋性能。很多中藥是可以提高產(chǎn)蛋率,改善蛋殼質(zhì)量(薄殼、沙殼、軟殼、破殼、光滑度),改善蛋黃的著色和雞蛋風(fēng)味。葉黃素、紅辣椒粉、松針粉、金盞花粉等都是效果不錯(cuò)的天然著色劑。④調(diào)節(jié)飼料的適口性,提供營養(yǎng)成分。中藥自帶特殊味道,正常都會(huì)和飼料混拌使用,這樣不僅可以調(diào)節(jié)飼料的味道,還可以改善雞對(duì)飼料的適口性,比如茴香、芥子、馬錢子等。同時(shí)中藥一般含有蛋白質(zhì)、脂肪、淀粉、維生素等營養(yǎng)成分和微量元素,不過總體含量較低,還需要額外加入。比如陳皮含有維生素D,當(dāng)歸含有維生素E、小茴香含有維生素A。⑤促進(jìn)生長。中藥中有機(jī)酸能夠調(diào)節(jié)腸道pH值,抑制有害菌的繁殖,提高酶的活性,促進(jìn)雞的新陳代謝,從而提高營養(yǎng)素的利用率,促進(jìn)消化吸收,提高采食量。蒲公英、山楂、金銀花、丹參等都可以促進(jìn)消化吸收。
2、中藥對(duì)林下雞死淘率的影響
死淘率是指雞在飼養(yǎng)過程中因疾病、自然災(zāi)害等原因?qū)е滤劳龌虮惶蕴谋壤?。死淘率的影響因素包括遺傳、環(huán)境、營養(yǎng)和管理等因素。為了降低雞的死淘率,可以采取一系列的措施,例如:選用優(yōu)良的品種、提供良好的飼養(yǎng)環(huán)境、制定科學(xué)的飼養(yǎng)管理計(jì)劃等。在上文研究中發(fā)現(xiàn)中藥組的死淘率4.20%低于對(duì)照組的死淘率8.50%,由此可見在飼料中添加中藥具有降低死淘率的功能。這可能是因?yàn)樵陲暳现屑尤脒m量的中藥,可以促進(jìn)雛雞的生長發(fā)育,提高其免疫力和抗病能力,從而降低死淘率。
3、中藥對(duì)林下雞生長性能的影響
雞生長性能是評(píng)價(jià)養(yǎng)殖水平與質(zhì)量的重要指標(biāo),雞的生長性能受到多種因素的影響,包括遺傳、環(huán)境、營養(yǎng)和管理等因素,這些因素相互作用,共同決定了雞的生長性能和經(jīng)濟(jì)效益。因此,在養(yǎng)殖過程中,需要綜合考慮這些因素,采取科學(xué)合理的飼養(yǎng)管理措施,以提高雞的生長性能和經(jīng)濟(jì)效益。一般來說,生長速度越快,雞的產(chǎn)蛋量和質(zhì)量也會(huì)相應(yīng)提高。本次根據(jù)雞的生長、發(fā)病等特點(diǎn),采用中藥全程用于林下草雞的養(yǎng)殖,全程不使用抗生素,取得了較好效果。通過上文的研究發(fā)現(xiàn):添加中藥喂養(yǎng)的雞平均日增重(15.19±0.21)g高于對(duì)照組(13.70±0.24)g、添加中藥喂養(yǎng)的雞平均料肉比(5.17±0.31)高于對(duì)照組(4.83±0.24)。這主要是,益陽康、腸亦舒、硒芪素、呼亦舒、球利康、威加康等獸藥的主要成分為中藥,以黃芪、松針粉等為例,這些中藥具有促進(jìn)其生長發(fā)育的作用,這可能跟這些用藥成分中含有的營養(yǎng)物質(zhì)與生物活性物質(zhì)有關(guān),例如:黃酮類、皂苷類、多糖類等,能夠維持動(dòng)物體內(nèi)的平衡狀態(tài),加速新陳代謝,促進(jìn)營養(yǎng)物質(zhì)的消化與利用,加速血液的循環(huán)。
4、中藥對(duì)林下雞腸道sIgA水平的影響
腸道黏膜是雞消化系統(tǒng)的重要組成部分,其內(nèi)表面分布著許多絨毛和皺褶,能夠不斷分泌黏液,保護(hù)腸道免受外界環(huán)境的侵害。同時(shí),腸道黏膜還能夠吸收水分和電解質(zhì),參與雞的排泄和調(diào)節(jié)體溫等生理過程。腸黏膜免疫球蛋白A(IgA)是在黏膜免疫中具有重要作用的抗體,在胃腸道免疫中扮演關(guān)鍵角色。它的重鏈?zhǔn)铅羴喰?,有兩種亞類IgA1和IgA2,以分泌型IgA(sIgA)二聚體形式存在。在黏膜分泌物中,sIgA是最主要的免疫球蛋白,而在血液中存在較少。sIgA的分泌性組分可以保護(hù)免疫球蛋白免受蛋白水解酶的降解,因此,sIgA可以存在于嚴(yán)酷的胃腸道環(huán)境中,并抑制微生物在身體分泌物內(nèi)繁殖。此外,sIgA也能抑制其他免疫球蛋白的炎癥效應(yīng)。在上文研究中,發(fā)現(xiàn)中藥組的雞小腸黏膜sIgA水平(4.68±1.02)ng/ml、空腸sIgA水平(5.36±2.52)ng/ml、回腸道sIgA水平(4.92±2.84)ng/ml高于對(duì)照組(3.09±1.15)ng/ml、(7.12±2.09)ng/ml、(8.06±3.15)ng/ml,且P<0.05,這可能是由于中藥中含有多種多糖類物質(zhì),這些物質(zhì)可以刺激腸道黏膜上的免疫細(xì)胞,從而誘導(dǎo)產(chǎn)生大量免疫球蛋白,黏膜免疫功能得到增強(qiáng)。同時(shí),試驗(yàn)組的十二指腸形態(tài)也較對(duì)照組相對(duì)完整,炎性浸潤較少,說明中藥有利于保持雞腸道絨毛完整性,且減少炎癥發(fā)生。
5、中藥對(duì)林下雞腸道形態(tài)的影響
雞的腸道形態(tài)會(huì)因品種、日齡等因素而產(chǎn)生差異,其結(jié)構(gòu)包括多個(gè)部分,如口腔、食管、胃、小腸、盲腸和直腸等。這些部分共同協(xié)作,以保證雞對(duì)營養(yǎng)物質(zhì)的充分消化和吸收。在雞的飼養(yǎng)過程中,保持腸道黏膜的完整性和正常功能對(duì)于維護(hù)雞的健康具有重要意義。如果腸道黏膜受到損傷或功能受到影響,就會(huì)導(dǎo)致消化不良、腹瀉等問題,甚至可能引發(fā)嚴(yán)重的感染和疾病。因此,在養(yǎng)殖過程中,要注重維護(hù)雞的腸道健康,定期檢查飼養(yǎng)環(huán)境和水質(zhì)質(zhì)量,避免雞群出現(xiàn)腸道疾病。中醫(yī)組雞的十二指腸腸道較對(duì)照組完整,炎性浸潤明顯比對(duì)照組少,腸道絨毛完整度也較高。其原因是中藥含有的重要成分有助于增強(qiáng)黏膜的免疫功能,從而避免其形態(tài)發(fā)生較大改變。
6、中藥對(duì)免疫效果的影響
禽流感、新城疫等病能引起雞群的發(fā)病,病死率較高,疫苗免疫使雞體產(chǎn)生免疫抗體,是防止該類疫病發(fā)生最有效的辦法。中藥有增強(qiáng)免疫效果的作用,如多糖類免疫增強(qiáng)劑能夠提高弱毒苗、油乳劑滅活苗的免疫效果。試驗(yàn)采用在飼料中增加含有多糖類的黃芪、人參葉等中藥,也增強(qiáng)了免疫效果,免疫效價(jià)更高,免疫保護(hù)時(shí)間更長。
綜上所述,通過上文的研究可知:在雞養(yǎng)殖過程中通過添加中藥于飼料中,可以降低雞的死淘率,雞生長性能、腸道功能也有明顯提高,腸道炎癥可有效減少,提高腸黏膜免疫球蛋白A水平顯著,免疫效價(jià)和免疫持續(xù)時(shí)間更長,試驗(yàn)為復(fù)方中藥添加于雞飼料來替代抗生素的開發(fā)和利用提供一定的理論和應(yīng)用依據(jù),可進(jìn)一步提高雞的養(yǎng)殖水平。
(作者單位:211800江蘇省南京市浦口區(qū)畜牧水產(chǎn)站)