張鑫宇 陳剛 譚宇桔 劉艷茹 李云云 姜愛華

[摘要]?目的?觀察不同濃度的嗎啡復(fù)合羅哌卡因?qū)θ橄侔㎝DA-MB-231細(xì)胞增殖、轉(zhuǎn)移侵襲和細(xì)胞周期的影響。方法?人乳腺癌細(xì)胞MDA-MB-231細(xì)胞接種于培養(yǎng)板24h，隨機(jī)分為8組：對照組（C組）、羅哌卡因400μg/ml組（R組）、嗎啡3μg/ml組（LM組）、嗎啡30μg/ml組（MM組）、嗎啡300μg/ml組（HM組）、羅哌卡因400μg/ml組+嗎啡3μg/ml組（R+LM組）、羅哌卡因400μg/ml+嗎啡30μg/ml組（R+MM組）和羅哌卡因400μg/ml+嗎啡300μg/ml組（R+HM組）。處理乳腺癌細(xì)胞MDA-MB-231細(xì)胞24h后，檢測其增殖能力、遷移能力、侵襲能力和細(xì)胞周期。結(jié)果?人乳腺癌細(xì)胞MDA-MB-231細(xì)胞的增殖抑制情況：單獨應(yīng)用嗎啡時，LM組、MM組、HM組均對人乳腺癌細(xì)胞MDA-MB-231細(xì)胞的增殖具有抑制作用（P<0.05），并且抑制率隨著嗎啡濃度的升高而依次增加。單獨應(yīng)用羅哌卡因時對人乳腺癌細(xì)胞MDA-MB-231細(xì)胞的增殖具有抑制作用（P<0.05）。嗎啡與羅哌卡因聯(lián)合應(yīng)用時，高濃度嗎啡組與羅哌卡因具有協(xié)同作用。人乳腺癌細(xì)胞MDA-MB-231細(xì)胞的遷移情況：單獨應(yīng)用嗎啡時，LM組、MM組、HM組均能夠抑制細(xì)胞遷移率（P<0.05），遷移率隨著嗎啡濃度的升高而依次降低。單獨應(yīng)用羅哌卡因能夠抑制細(xì)胞遷移率（P<0.05）。嗎啡與羅哌卡因聯(lián)合應(yīng)用時，低濃度和中濃度嗎啡組與羅哌卡因具有協(xié)同作用（P<0.05）。人乳腺癌細(xì)胞MDA-MB-231細(xì)胞的侵襲情況：單獨應(yīng)用嗎啡時，MM組、HM組均能夠抑制細(xì)胞侵襲能力（P<0.05），并且侵襲能力隨著嗎啡濃度的升高而依次降低，單獨應(yīng)用羅哌卡因時能夠抑制細(xì)胞的侵襲能力（P<0.05）。嗎啡與羅哌卡因聯(lián)合應(yīng)用時，中、高濃度組嗎啡和羅哌卡因具有協(xié)同作用。人乳腺癌細(xì)胞MDA-MB-231細(xì)胞的細(xì)胞周期情況：單獨應(yīng)用高濃度嗎啡，能夠抑制細(xì)胞進(jìn)入G2/M期（P<0.05）。單獨應(yīng)用羅哌卡因，能夠抑制細(xì)胞進(jìn)入G2/M期（P<0.05），低濃度嗎啡與羅哌卡因聯(lián)合應(yīng)用對于將細(xì)胞抑制在G0/G1期和S期具有協(xié)同作用（P<0.05）。結(jié)論?嗎啡復(fù)合羅哌卡因能夠抑制乳腺癌MDA-MB-231細(xì)胞的增殖、遷移和侵襲，具有聯(lián)合作用并呈劑量依賴性。

[關(guān)鍵詞]?嗎啡；羅哌卡因；增殖；遷移；侵襲；細(xì)胞周期；乳腺癌；MDA-MB-231細(xì)胞

[中圖分類號]?R614????[文獻(xiàn)標(biāo)識碼]?A ????[DOI]?10.3969/j.issn.1673-9701.2024.02.015

Effects?of?different?concentrations?of?morphine?in?combination?with?ropivacaine?on?proliferation，?migration，?invasion?and?cell?cycle?in?MDA-MB-231?breast?cancer?cells

ZHANG?Xinyu1，2，?CHEN?Gang2，?TAN?Yuju2，?LIU?Yanru1，?LI?Yunyun1，?JIANG?Aiqhua2

1.the?Second?Clinical?Medical?College?of?Binzhou?Medical?University，?Yantai?264000，?Shandong，?China;?2.Department?of?Anesthesiology?the?Affiliated?Yantai?Yuhuangding?Hospital?of?Qingdao?University?Medical?College，?Yantai?264000，?Shandong，?China

[Abstract]?Objective?To?investigate?the?effects?of?different?concentrations?of?morphine?in?combination?with?ropivacaine?on?proliferation，?migration，?invasion?and?cell?cycle?in?MDA-MB-231?breast?cancer?cells.?Methods?MDA-MB-231?breast?cancer?cells?were?inoculated?on?the?culture?plate?for?24h?and?randomly?divided?into?8?groups：?Control?group?（C），?ropivacaine?400μg/ml?group?（R），?morphine?3μg/ml?group?（LM），?morphine?30μg/ml?group?（MM），?morphine?300μg/ml?group?（HM），?ropivacaine?400μg/ml?group+?morphine?3μg/ml?group?（R+LM），?ropivacaine?400μg/ml+?morphine?30μg/ml?group?（R+MM），?and?ropivacaine?400μg/ml+?morphine?300μg/ml?group?（R+HM）.?After?treaments?of?MDA-MB-231?breast?cancer?cells?for?24h，?these?proliferation，?migration，?invasion?and?cell?cycle?were?evaluated.?Results?When?using?morphine?alone，?the?proliferation?inhibitive?effect?was?positively?correlated?with?the?concentration?of?morphine.?The?proliferation?was?significantly?inhibited?by?morphine?of?LM，?MM，?HM?group?（P<0.05）.?When?using?ropivacaine?alone，?the?proliferation?was?significantly?inhibited?（P<0.05）.?When?using?morphine?combined?with?ropivacaine，?the?high?concentration?morphine?group?has?a?synergistic?effect?with?ropivacaine?group?on?proliferation?inhibition?（P<0.05）.?When?using?morphine?alone?，?the?migration?rate?decreases?sequentially?with?the?increase?of?morphine?concentration.?The?migration?rate?was?significantly?inhibited?by?morphine?of?LM，?MM，?HM?group?（P<0.05）.?When?using?ropivacaine?alone，?the?migration?rate?was?inhibited?（P<0.05）.?When?using?morphine?combined?with?ropivacaine，?the?low?and?medium?concentration?morphine?group?have?a?synergistic?effect?with?ropivacaine?group?on?migration?rate?（P<0.05）.?When?using?morphine?alone，?the?number?of?cell?invasion?was?decreased?with?the?concentration?of?morphine?increasing?（P<0.05）.?The?MM?and?HM?groups?inhibited?cell?invasion?ability.?When?using?ropivacaine?alone，?the?invasiveness?of?cells?was?also?inhibited?（P<0.05）.?When?using?morphine?combined?with?ropivacaine，?the?medium?and?high?concentration?morphine?groups?have?a?synergistic?effect?with?ropivacaine?group?on?inhibiting?cell?invasion?ability?（P<0.05）.?When?using?morphine?alone，?the?cell?cycle?progression?was?inhibited?into?G2/M?Phase?（P<0.05）.?When?using?ropivacaine?alone，?the?cell?cycle?progression?was?inhibited?into?G2/M?phase?（P<0.05）.?The?combination?of?low?concentration?morphine?and?ropivacaine?has?synergistic?effect?on?arresting?at?G0/G1?and?S?phase?（P<0.05）.?Conclusion?Morphine?combined?with?ropivacaine?inhibits?the?Proliferation，?migration?and?invasion?of?MDA-MB-231?breast?cancer?cells?in?a?dose-dependent?manner.

[Key?words]?Morphine;?Ropivacaine;?Proliferation;?Migration;?Invasion;?Cell?cycle;?Breast?cancer;?MDA-MB-231?cells

乳腺癌是當(dāng)今女性發(fā)病率和死亡率第一的惡性腫瘤，大約占女性新發(fā)癌癥總數(shù)的30%以上[1]。乳腺癌的復(fù)發(fā)和轉(zhuǎn)移是乳腺癌患者死亡的主要原因。流行病學(xué)調(diào)查顯示乳腺癌患者的麻醉方式是影響患者的術(shù)后腫瘤復(fù)發(fā)率的因素之一[2]。研究表明，圍手術(shù)期和術(shù)后使用局部麻醉藥，能夠減少術(shù)中全身阿片類藥物的使用并降低阿片類藥物所致的并發(fā)癥[3]。羅哌卡因是一種新型長效酰胺類局部麻醉藥，嗎啡是一種廣泛應(yīng)用的阿片類藥物，臨床上已經(jīng)將嗎啡復(fù)合羅哌卡因廣泛應(yīng)用于乳腺手術(shù)的神經(jīng)阻滯麻醉[4]。乳腺腫瘤包塊切除術(shù)往往需要通過手術(shù)切除獲得的組織進(jìn)行快速病理診斷，因此嗎啡復(fù)合羅哌卡因用于乳腺惡性腫瘤切除術(shù)時的安全性引起了麻醉學(xué)者和乳腺外科學(xué)者的廣泛關(guān)注。目前羅哌卡因能夠抑制乳腺癌細(xì)胞的增殖，嗎啡對乳腺癌組織的影響存在爭議[5-10]。本研究旨在通過離體細(xì)胞實驗觀察不同濃度的嗎啡復(fù)合羅哌卡因?qū)DA-?MB-231細(xì)胞增殖、遷移、侵襲和細(xì)胞周期是否存在影響。

1??材料與方法

1.1??主要試劑與材料

人乳腺癌MDA-MB-231細(xì)胞（購自中國科學(xué)院上海生物化學(xué)與細(xì)胞生物學(xué)研究所），鹽酸嗎啡注射液（購自中國東北制藥沈陽第一分公司），鹽酸羅哌卡因粉劑（購自美國阿拉丁公司），胎牛血清（購自德國PAN公司），DMEM培養(yǎng)基，CCK8，DMSO，15ml，50ml離心管，EP管（均購自中國山東思科捷生物技術(shù)有限公司），Transwell，Matrigel膠（均購自美國康寧公司），細(xì)胞周期試劑盒（購自中國碧云天公司）。

1.2??方法

1.2.1??細(xì)胞培養(yǎng)??細(xì)胞復(fù)蘇成功后接種于培養(yǎng)皿，靜置37℃、5%CO2、95%濕度的培養(yǎng)箱內(nèi)，用含10%胎牛血清的DMEM培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)，隔天換液。觀察細(xì)胞貼壁70%～80%時，用胰蛋白酶消化傳代。

1.2.2??實驗分組??共分為8組，分別用含有不同藥物的DMEM培養(yǎng)基培養(yǎng)。具體分組及每組培養(yǎng)基如下：不加藥物對照組（C組）、羅哌卡因400μg/ml組（R組）、嗎啡3μg/ml組（LM組）、嗎啡30μg/ml組（MM組）、嗎啡300μg/ml組（HM組）、羅哌卡因400μg/ml組+嗎啡3μg/ml組（R+LM組）、羅哌卡因400μg/ml+嗎啡30μg/ml組（R+MM組）和羅哌卡因400μg/ml組+嗎啡300μg/ml組（R+HM組）。

1.2.3??CCK8法測定MDA-MB-231細(xì)胞的增殖活性?取對數(shù)生長期的細(xì)胞，消化，調(diào)整密度至5×104個/ml接種于1塊96孔培養(yǎng)板，每組種6個復(fù)孔，每孔100μl。常規(guī)培養(yǎng)24h后，更換為含不同藥物的培養(yǎng)基200μl，繼續(xù)培養(yǎng)24h后，吸棄原培養(yǎng)液，每孔加入180μlDMEM培養(yǎng)基、20μlCCK8溶液，混勻，培養(yǎng)1h。平板床搖勻細(xì)胞，用酶標(biāo)儀測定450nm時各孔光吸收值（A值）A值大小與細(xì)胞活力成正比。

1.2.4??劃痕實驗檢測細(xì)胞遷移率變化??將MDA-MB-?231細(xì)胞接種于6孔板，調(diào)整濃度為1×106個/ml。每組設(shè)3個復(fù)孔。放入37℃、5%CO2、95%濕度的培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)24h至細(xì)胞貼壁生長90%。用馬克筆在6孔板背后畫橫線，每孔穿過5條線。用20μl槍頭比著直尺垂直于背后直線劃線。按照不同分組處理細(xì)胞，分別在0h和24h取樣拍照。每個樣品取5個視野測量距離。細(xì)胞遷移率=（0h劃痕距離?24h劃痕距離）/0h劃痕距離×95%。

1.2.5??Transwell法測侵襲細(xì)胞數(shù)??MDA-MB-231細(xì)胞撤去血清按不同分組處理培養(yǎng)24h，使用Matrigel膠在Transwell上室鋪膠。胰酶消化MDA-MB-231細(xì)胞、計數(shù)細(xì)胞，使用不完全培養(yǎng)基將細(xì)胞調(diào)整至細(xì)胞密度為1×105個/ml，取200μl細(xì)胞懸液于Transwell上室，下室加入500μl含10%胎牛血清的DMEM完全培養(yǎng)基。將24孔板置于37℃、5%CO2、95%濕度的培養(yǎng)箱培養(yǎng)24h，室溫下4%多聚甲醛固定20min。去除固定液后加入0.1%結(jié)晶紫染液染色10min。用棉簽擦去Matrigel膠和上室內(nèi)的細(xì)胞，拍照計數(shù)穿過濾膜的細(xì)胞數(shù)：隨機(jī)選取5個視野，取平均值并統(tǒng)計細(xì)胞數(shù)。

1.2.6??細(xì)胞周期分析??將MDA-MB-231細(xì)胞消化后按照分組接種于6孔板放入37℃、5%CO2、95%濕度的培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)24h至細(xì)胞貼壁生長90%。按照不同分組對6孔板內(nèi)細(xì)胞進(jìn)行處理，繼續(xù)培養(yǎng)24h。消化細(xì)胞并收集，用PBS溶液洗滌細(xì)胞2次，棄去上清液。加入70%乙醇，?20℃固定過夜。1000r/min離心5min收集細(xì)胞，用1ml?PBS重懸細(xì)胞。每管細(xì)胞樣品中加入0.5ml碘化丙啶染色液，緩慢并充分重懸細(xì)胞沉淀，37℃避光溫浴30min。用流式細(xì)胞儀在激發(fā)波長488nm波長處檢測紅色熒光同時檢測光散射情況，結(jié)果用細(xì)胞周期擬合軟件ModFit分析。

1.3??統(tǒng)計學(xué)方法

采用SPSS?26.0統(tǒng)計學(xué)軟件對數(shù)據(jù)進(jìn)行處理分析，符合正態(tài)分布的計量資料用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（）表示，多組間比較采用單因素方差分析，組間兩兩比較采用LSD-t檢驗，用析因設(shè)計方差分析是否有聯(lián)合作用，以P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2??結(jié)果

2.1??CCK8法測不同分組對MDA-MB-231細(xì)胞增殖的影響

不同分組培養(yǎng)24h后，各處理組均對MDA-MB-?231細(xì)胞增殖具有抑制作用（P<0.05）。低、中濃度嗎啡聯(lián)合羅哌卡因?qū)σ种萍?xì)胞增殖無協(xié)同作用（P<0.05），高濃度嗎啡與羅哌卡因聯(lián)合應(yīng)用具有協(xié)同作用（P<0.05），但是聯(lián)合用藥組增殖抑制作用仍強(qiáng)于各藥單獨應(yīng)用（P<0.05）。見圖1。

2.2??劃痕實驗法測不同分組對MDA-MB-231細(xì)胞遷移的影響

不同分組培養(yǎng)24h后，C組劃痕兩側(cè)細(xì)胞傷口幾乎愈合，LM組、MM組、HM組劃痕兩側(cè)細(xì)胞傷口愈合較慢，R組、R+LM組、R+MM組、R+HM組劃痕兩側(cè)細(xì)胞傷口愈合最慢，見圖2。經(jīng)Image?J處理后計算劃痕愈合率，各處理組的劃痕愈合速度均受到抑制（P<0.05），低、中濃度嗎啡聯(lián)合羅哌卡因應(yīng)用具有協(xié)同作用（P<0.05）。高濃度嗎啡聯(lián)合羅哌卡因?qū)σ种苿澓塾蠠o聯(lián)合作用，但是抑制作用明顯強(qiáng)于各藥單獨應(yīng)用（P<0.05），見圖2。

2.3??Transwell法測不同分組對MDA-MB-231細(xì)胞侵襲的影響

不同分組培養(yǎng)24h后，C組、LM組侵襲細(xì)胞數(shù)最多，MM組、HM組侵襲細(xì)胞數(shù)較多，R組、R+LM組、R+MM組、R+HM組侵襲細(xì)胞數(shù)最少。羅哌卡因和中、高濃度嗎啡單獨應(yīng)用均抑制細(xì)胞侵襲（P<0.05），中、高濃度嗎啡聯(lián)合羅哌卡因?qū)?xì)胞侵襲的抑制有協(xié)同作用（P<0.05）。見圖3。

2.4??細(xì)胞周期分析法測不同分組對MDA-MB-231細(xì)胞周期的影響

不同分組培養(yǎng)24h后，R組、R+LM組、R+MM組、R+HM組細(xì)胞G2/M期細(xì)胞明顯少于C組、LM組、MM組和HM組（P<0.05）。R+LM組將細(xì)胞周期抑制在G0/G1期和S期有協(xié)同作用（P<0.05），見圖4。

3??討論

近年來乳腺癌已成為當(dāng)今女性發(fā)病率和死亡率第一的惡性腫瘤，大約占女性新發(fā)癌癥總數(shù)的30%以上[1]。乳腺癌的復(fù)發(fā)和轉(zhuǎn)移是乳腺癌患者死亡的主要原因。已經(jīng)嚴(yán)重影響婦女的生存周期和生命質(zhì)量。

麻醉藥物聯(lián)合應(yīng)用對腫瘤細(xì)胞生長和轉(zhuǎn)移的影響是麻醉領(lǐng)域的研究熱點。選擇那些既能提供滿意的圍術(shù)期鎮(zhèn)痛又能抑制腫瘤細(xì)胞生長和轉(zhuǎn)移的藥物是擺在麻醉醫(yī)生面前的一項重要課題。當(dāng)前羅哌卡因復(fù)合嗎啡對乳腺癌手術(shù)進(jìn)行前鋸肌神經(jīng)阻滯可以在乳腺癌切除術(shù)中達(dá)到良好鎮(zhèn)痛效果[4]。嗎啡復(fù)合羅哌卡因?qū)θ巳橄侔┘?xì)胞MDA-MB-231細(xì)胞生長和轉(zhuǎn)移的影響國內(nèi)外尚未見報道。該復(fù)合麻醉劑對乳腺癌預(yù)后的影響尚不明確。羅哌卡因可以抑制乳腺癌細(xì)胞的增殖和轉(zhuǎn)移，已經(jīng)得到廣泛報道[11-13]。盡管已經(jīng)進(jìn)行了大量研究，嗎啡對乳腺癌細(xì)胞生長的影響目前仍存在爭議。一些研究認(rèn)為嗎啡可以促進(jìn)乳腺癌細(xì)胞的生長，另一些研究認(rèn)為嗎啡可以通過多種機(jī)制抑制或促進(jìn)腫瘤的生長。Tegeder等[13]研究認(rèn)為高濃度嗎啡可以顯著抑制MCF-7和MDA-MB-231細(xì)胞的生長。Bimonte等[14]研究則認(rèn)為嗎啡促進(jìn)了乳腺癌細(xì)胞的生長。出現(xiàn)不同的結(jié)果的原因可能與實驗中不同的嗎啡劑量相關(guān)。因此本研究旨在探討羅哌卡因復(fù)合不同濃度梯度的嗎啡能夠?qū)θ橄侔┘?xì)胞生長和轉(zhuǎn)移產(chǎn)生何種影響。

既往研究表明，嗎啡在前鋸肌神經(jīng)阻滯中發(fā)揮鎮(zhèn)痛的最佳劑量為4mg[4]?；谫N近臨床為原則，經(jīng)過預(yù)實驗篩選，本實驗選取的嗎啡實驗濃度為3～300μg/ml。羅哌卡因則依據(jù)相關(guān)文獻(xiàn)的常用有效劑量，經(jīng)過預(yù)實驗篩選，選取400μg/ml羅哌卡因進(jìn)實驗[8]。

與對照組比較，加入3μg/ml和30μg/ml、300μg/ml嗎啡處理24h后對乳腺癌細(xì)胞的增殖抑制明顯。并且隨著作用濃度的增加，嗎啡表現(xiàn)出的對細(xì)胞增殖抑制的作用變強(qiáng)。此結(jié)果與Gurwell等[15]的觀點基本一致。CCK8結(jié)果經(jīng)析因設(shè)計方差分析結(jié)果顯示，3μg/ml嗎啡、30μg/ml嗎啡與400μg/ml羅哌卡因聯(lián)合應(yīng)用后無協(xié)同作用，300μg/ml嗎啡聯(lián)合400μg/ml羅哌卡因?qū)υ鲋骋种凭哂袇f(xié)同作用。

根據(jù)不同分組觀察測量遷移距離，對細(xì)胞運動情況進(jìn)行觀察。結(jié)果發(fā)現(xiàn)24h后，對照組與3μg/ml和30μg/ml嗎啡處理組劃痕兩側(cè)細(xì)胞幾乎愈合，而400μg/ml羅哌卡因組與羅哌卡因400μg/ml+嗎啡3μg/ml組、羅哌卡因400μg/ml+嗎啡30μg/ml組和羅哌卡因400μg/ml+嗎啡300μg/ml組的MDA-MB-231細(xì)胞經(jīng)過劃痕后兩側(cè)細(xì)胞仍有距離。400μg/ml羅哌卡因組、300μg/ml嗎啡組和400μg/ml羅哌卡因+3μg/ml嗎啡組劃痕兩側(cè)細(xì)胞“傷口”愈合較慢，400μg/ml羅哌卡因+30μg/ml嗎啡組和400μg/ml羅哌卡因+300μg/ml嗎啡組劃痕兩側(cè)細(xì)胞“傷口”愈合最慢。經(jīng)過析因設(shè)計方差分析結(jié)果顯示3μg/ml嗎啡、30μg/ml嗎啡與400μg/ml羅哌卡因聯(lián)合應(yīng)用后有協(xié)同作用，300μg/ml嗎啡聯(lián)合400μg/ml羅哌卡因?qū)σ种芃DA-MB-231細(xì)胞遷移沒有協(xié)同作用，但是抑制作用明顯強(qiáng)于各藥單獨應(yīng)用。

根據(jù)侵襲細(xì)胞數(shù)，對細(xì)胞侵襲能力進(jìn)行觀察。24h后，與對照組相比，3μg/ml和30μg/ml嗎啡處理組侵襲細(xì)胞數(shù)差異無統(tǒng)計學(xué)意義；400μg/ml羅哌卡因組與羅哌卡因400μg/ml+嗎啡3μg/ml組、羅哌卡因400μg/ml+嗎啡30μg/ml組和羅哌卡因400μg/ml+嗎啡300μg/ml組侵襲細(xì)胞數(shù)明顯減少；400μg/ml羅哌卡因+30μg/ml嗎啡組和400μg/ml羅哌卡因+300μg/ml嗎啡組侵襲細(xì)胞數(shù)最少。經(jīng)過析因設(shè)計方差分析結(jié)果顯示3μg/ml嗎啡與400μg/ml羅哌卡因聯(lián)合應(yīng)用后無協(xié)同作用，30μg/ml、300μg/ml嗎啡聯(lián)合400μg/ml羅哌卡因?qū)σ种芃DA-MB-231細(xì)胞侵襲具有協(xié)同作用。

單獨應(yīng)用嗎啡處理，濃度為3μg/ml和30μg/ml時細(xì)胞周期沒有發(fā)生顯著變化，濃度為300μg/ml時G2期細(xì)胞明顯少于對照組，G0/G1期和S期細(xì)胞明顯多于對照組。單獨應(yīng)用400μg/ml羅哌卡因時G2期細(xì)胞明顯少于對照組，G0/G1期和S期細(xì)胞明顯多于對照組。各濃度嗎啡與400μg/ml羅哌卡因聯(lián)合應(yīng)用時G2期細(xì)胞明顯少于對照組，G0/G1期和S期細(xì)胞明顯多于對照組。經(jīng)過析因設(shè)計方差分析證實，30μg/ml嗎啡與400μg/ml羅哌卡因能夠發(fā)揮協(xié)同作用，將MDA-MB-231細(xì)胞抑制在G1期和S期。

本實驗結(jié)果顯示，嗎啡復(fù)合羅哌卡因應(yīng)用于MDA-MB-231細(xì)胞后，抑制了該細(xì)胞的增殖、遷移和侵襲，并且將細(xì)胞周期抑制在了G0/G1期和S期。為臨床更好地使用嗎啡復(fù)合羅哌卡因作為麻醉劑提供了實驗依據(jù)。綜上所述，嗎啡復(fù)合羅哌卡因具有聯(lián)合作用能明顯抑制乳腺癌MDA-MB-231細(xì)胞的增殖、遷移和侵襲，其機(jī)制可能與抑制細(xì)胞周期有關(guān)，其上下游機(jī)制有待后續(xù)實驗進(jìn)行研究。

利益沖突：所有作者均聲明不存在利益沖突。

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（收稿日期：2023–06–11）

（修回日期：2023–11–24）