張崇志

（清遠(yuǎn)職業(yè)技術(shù)學(xué)院食品藥品學(xué)院，廣東 清遠(yuǎn) 511510）

蔬菜是人們?nèi)粘ｏ嬍持斜夭豢缮俚氖澄镏?，為減少農(nóng)作物病蟲害，增加產(chǎn)品產(chǎn)量與提高質(zhì)量，越來越多農(nóng)藥被用于農(nóng)作物種植過程。其中，有機(jī)磷農(nóng)藥易降解、成本低,氨基甲酸酯類農(nóng)藥毒性低、藥效高，這兩大類農(nóng)藥更是被普遍應(yīng)用。有機(jī)磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥會抑制人體內(nèi)乙酰膽堿酯酶的活性，且過程不可逆，導(dǎo)致乙酰膽堿在體內(nèi)堆積，危害身體健康，嚴(yán)重時會導(dǎo)致器官衰竭甚至死亡。

雖然國家農(nóng)業(yè)農(nóng)村部持續(xù)開展高危高毒農(nóng)藥淘汰行動，在近幾年取得了一定成效,但國家明令禁止蔬菜中使用的有機(jī)磷和氨基甲酸酯等殺蟲劑殘留還是會被檢出,如毒死蜱、氧樂果、克百威等。因此,有關(guān)政府部門應(yīng)該對生產(chǎn)農(nóng)藥的企業(yè)加強(qiáng)監(jiān)管，并禁止企業(yè)生產(chǎn)已經(jīng)禁用的農(nóng)藥。從農(nóng)藥生產(chǎn)的企業(yè)上，企業(yè)需更好地了解農(nóng)藥禁限用知識，同時也要注意開發(fā)新的農(nóng)藥產(chǎn)品，從而增強(qiáng)企業(yè)競爭力。若是使用法律禁止的農(nóng)藥或是超出農(nóng)藥登記批準(zhǔn)的范圍使用農(nóng)藥,一律以假農(nóng)藥對待,除受到處罰外,情節(jié)特別嚴(yán)重的將由原發(fā)證部門撤銷農(nóng)業(yè)生產(chǎn)經(jīng)營許可證書或者有關(guān)的農(nóng)藥登記證,對犯罪構(gòu)成客觀要件的,將依法追究刑事責(zé)任。

對要流通到市場的蔬菜加強(qiáng)農(nóng)藥殘留的檢測力度,提升基層蔬菜農(nóng)殘檢測能力顯得尤為重要。由于蔬菜具有易腐、流通快的特點(diǎn),成本低、耗時短、操作簡便的快速檢測技術(shù)已成為蔬菜流通中的一個重要檢測手段。目前,基層蔬菜農(nóng)藥殘留快速檢測應(yīng)用最廣泛的是GB/T5009.199-2003《蔬菜中有機(jī)磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥殘留量的快速檢測》酶抑制率法(分光光度法), 該方法利用有機(jī)磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥對乙酰膽堿酯酶(acetylcholinesterase, AChE)的正常功能有抑制作用, 可快速測定蔬菜中有機(jī)磷類和氨基甲酸酯類農(nóng)藥[1-2]。

有機(jī)磷及氨基甲酸酯類殺蟲劑都存在著致癌、致畸、致突變的風(fēng)險。所以,對有機(jī)磷及氨基甲酸酯類殺蟲劑的長期監(jiān)測非常必要[3]。本研究在2023 年3 月對惠眾市場的菜品進(jìn)行了抽樣測試，并分析了該市場菜品中有機(jī)磷農(nóng)藥殘留的狀況。

1 材料與方法

1.1 樣品來源

利用隨機(jī)抽樣的方式，采集惠眾市場上銷售的新鮮蔬菜，該菜市場的蔬菜攤位，由富民農(nóng)批、鎮(zhèn)口市場供應(yīng)。2023 年3 月共抽檢樣品164 批次。

1.2 試劑與儀器

1.2.1 試劑

農(nóng)藥殘留快速檢測試劑，購自深圳市易瑞生物技術(shù)股份有限公司。

1.2.2 儀器

一體式便攜化食品藥品安全快速檢測系統(tǒng)（分光光度計）型號YR-600Plus,購自深圳市易瑞生物技術(shù)有限公司。

1.3 檢測原理

利用某些物質(zhì)影響酶的功能基團(tuán)，使酶活力下降或消失的現(xiàn)象進(jìn)行檢測的方法叫做酶抑制分光光度法。這種方法常用于檢測農(nóng)藥殘留，因為有機(jī)磷以及氨基甲酸酯殺蟲劑殘留會抑制膽堿酯酶的正常功能，而且抑制率和農(nóng)藥濃度成正比。酶催化神經(jīng)傳導(dǎo)代謝的產(chǎn)物(乙酰膽堿)分解與顯色劑發(fā)生反應(yīng)，從而可以生成黃色物質(zhì)，在412nm 處通過使用分光光度計測定吸光度隨時間的變化值。因此，可以通過抑制率判斷樣品中是否含有高劑量的有機(jī)磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥，這是通常情況下的做法。

1.4 檢測方法

酶抑制分光光度法。

1.4.1 樣品前處理

整棵提取的方法：取韭菜、芹菜等適用的樣品，擦掉其肉眼可見的泥土。用電子天平稱取2g（±0.1g）整株的樣品（不用剪碎），用鑷子夾入50ml 離心管或三角瓶里面，應(yīng)注意樣品要深入底部，不要附著在容器壁上面。用移液槍移取10ml 緩沖液至容器里。用手輕輕地振搖容器1～2min，然后放回實驗臺上靜置5min 以上。用濾紙過濾，濾液用作樣品待測液。

整體測定法：選取油菜、菠菜等適用樣品，擦掉樣品肉眼可見的泥土，剪成1cm 左右見方形狀的碎片。稱取2g（±0.1g）剪碎的樣品，用鑷子夾入50ml 離心管或三角瓶里面，應(yīng)注意樣品要深入底部，不要附著在容器壁上面。用移液槍移取10ml 緩沖液加入到容器里面。用手輕輕地振搖容器1～2min，然后放回實驗臺上靜置5min 以上。若提取的溶液雜質(zhì)太多或呈現(xiàn)渾濁狀態(tài)，可以用濾紙過濾后再測試，濾液作為樣品待測液。

1.4.2 對照測試

先用移液槍在比色皿里加入3.0ml 緩沖液，后依次加入100μl 酶試劑和100μl 顯色劑，混勻（用移液槍上下吸3 到9 次左右）。然后放回實驗臺上靜置10min。再用移液槍加入100μl 底物，快速地?fù)u晃使溶液分布均勻。后馬上上機(jī)按“對照”鍵測試[對照測試△A 值必須大于0.1（1min 測試）或0.3（3min 測試）]。

1.4.3 樣品測試

用移液槍吸取3.0ml 樣品待測液加入比色皿里面，然后加入100μl 酶試劑和100μl 顯色劑，混勻（用移液槍上下吸3 到9次左右）。然后放回實驗臺上靜置10min。再用移液槍加入100μl 底物，快速地?fù)u晃使溶液分布均勻。立即上機(jī)按“樣品”鍵測試。

1.4.4 結(jié)果判定

（1）超出農(nóng)藥殘留限量:抑制率不低于50%（建議對陽性樣品進(jìn)行2 次或更多次的重復(fù)檢測）。（2）農(nóng)藥殘留符合標(biāo)準(zhǔn):抑制率不高于50%。

1.5 數(shù)據(jù)處理

利用Microsoft Excel 2019 軟件對實驗的檢測結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計研究分析、繪圖。

2 結(jié)果與分析

2.1 樣品分類

2023 年3 月從惠眾市場9 個蔬菜攤位32 種蔬菜共164 批次，采用酶抑制分光光度法檢測。依據(jù)(SB/T 10029-2012)《新鮮蔬菜分類與代碼》這個標(biāo)準(zhǔn)來分門別類。收集樣品包括綠葉菜類蔬菜、白菜類蔬菜、豆類蔬菜、瓜類蔬菜、蔥蒜類蔬菜、茄果類蔬菜6類，檢測總量中，白菜類蔬菜占了41%，有67 批次，綠葉菜類蔬菜占了24%，有40 批次，這兩類蔬菜的量最多。瓜類蔬菜樣品量最少，僅有4 批次，占檢測總量的3%（圖1）。

圖1 蔬菜分類統(tǒng)計結(jié)果

2.2 樣品農(nóng)藥殘留情況分析

所有蔬菜樣品的檢測結(jié)果用Microsoft Excel 2019 軟件進(jìn)行統(tǒng)計研究分析，圖2 顯示了不同抑制率范圍內(nèi)的蔬菜抑制率的頻次。檢測樣品的抑制率的平均值、極大值分別為10.9%、46.1%。164 批次的檢測樣品有機(jī)磷以及氨基甲酸酯類的農(nóng)藥殘留項目合格，合格率100%。

圖2 樣品分布直方圖及統(tǒng)計描述

2.3 不同種類蔬菜抑制率的平均值

圖3 結(jié)果表明，惠眾市場蔬菜中的有機(jī)磷以及氨基甲酸酯類農(nóng)藥總體水平含量較低。豆角的抑制率平均值最高，為16.90%。黃瓜的抑制率平均值最低，為2.03%。

圖3 不同種類蔬菜的抑制率平均值

3 結(jié)論與討論

對于檢測部門而言，有機(jī)磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥的酶抑制率法具有操作簡單、反應(yīng)迅速、成本低廉等優(yōu)點(diǎn)，適用于對大批量樣品進(jìn)行快速篩查，但需要避免假陽性結(jié)果的出現(xiàn)。易出現(xiàn)假陽性的蔬菜包括蔥、蒜、韭菜、香菜、辣椒等。其原因首先是蔬菜細(xì)胞液中的次生物質(zhì)會對酶的功能有著遏抑作用，導(dǎo)致抑制率值偏高出現(xiàn)假陽性結(jié)果；此外，蔬菜中色素成分呈現(xiàn)較高水平時也會阻擾A（吸光度），導(dǎo)致假陽性的情況出現(xiàn)。如果采用蔬菜整棵浸提的方法，可以有效避免假陽性結(jié)果發(fā)生[4-5]。

對于監(jiān)管部門而言，首先通過制定嚴(yán)格控制農(nóng)藥施用的規(guī)范性和農(nóng)產(chǎn)品檢測全覆蓋等相關(guān)制度，深入貫徹落實好“從農(nóng)田到餐桌”的食品安全；其次加大對違規(guī)違法銷售行為的處罰力度，通過提高違法成本，減少違法銷售農(nóng)產(chǎn)品的行為；建立蔬菜準(zhǔn)入制度，流通到市場前的蔬菜需經(jīng)檢驗合格后方可流入市場銷售?？衫眯畔⒒侄渭訌?qiáng)檢測結(jié)果的公示，如用“蔬菜健康碼”等手段便于消費(fèi)者查看檢測結(jié)果。監(jiān)管部門應(yīng)加大監(jiān)管頻次，發(fā)現(xiàn)陽性或不合格樣品應(yīng)沒收并銷毀處理。

對于消費(fèi)者而言，應(yīng)盡量減少或避免購買市場周邊的小販所銷售的蔬菜，買蔬菜還是選擇來源于大型批發(fā)市場的貨源。原因是：第一，路邊的小販沒有受到市場監(jiān)管；第二，對于小型種植戶來說，大規(guī)模的種植農(nóng)戶在農(nóng)藥的使用方面比較規(guī)范或有專人指導(dǎo)，蔬菜中的農(nóng)藥殘留超標(biāo)情況會相對較少。