劉志強

（蕪湖市灣沚區(qū)鄉(xiāng)村振興促進中心 241100）

隨著養(yǎng)殖業(yè)的發(fā)展與逐步成熟，動物檢疫工作的重要性日益突出，為保證養(yǎng)殖戶能夠回收前期投資，擴大養(yǎng)殖規(guī)模與增加畜禽類產品經濟收益，必須按照衛(wèi)生防疫規(guī)則進行科學檢疫，讓地方衛(wèi)生機構根據國家法律規(guī)定，定期使用專業(yè)技術設備進行動物流行病學調查，采集多種樣品進行化驗與血清檢測分析，實現規(guī)范化樣品采集，避免出現病原菌外泄、病毒感染風險被忽視等問題，保證衛(wèi)生防疫機構在短時間內獲得具備代表性的檢測樣本，克服人為因素與環(huán)境因素干擾。

1 動物檢疫工作的重要性與核心內容

動物檢疫工作是現代禽畜類養(yǎng)殖產業(yè)實踐中的重要內容，可起到及時發(fā)現惡性傳染病與致病菌、降低動物感染率的特殊作用，現階段我國針對畜牧養(yǎng)殖業(yè)的衛(wèi)生檢疫制度較為完善，檢測方式主要以小規(guī)模樣品檢測與個體隔離取樣檢測為主，檢疫標準較為明確，必須同時對多份樣品進行病毒學、血清學、化學檢測，保證樣本檢測結果的多元性與合理性。我國每年都會發(fā)生影響范圍較大的動物疫情，口蹄疫、禽流感等疫病會導致大量畜禽死亡或停止生長，嚴重影響了養(yǎng)殖產業(yè)正常發(fā)展，衛(wèi)生防疫人員應配合畜禽類產品經營企業(yè)，組織開展有計劃、有明確目標的檢疫活動，快速發(fā)現生物入侵與病毒感染傳播路徑，規(guī)范養(yǎng)殖業(yè)經營方式，在保證畜禽養(yǎng)殖業(yè)發(fā)展的同時，維護生態(tài)環(huán)境穩(wěn)定，避免致病菌在自然環(huán)境中傳播繁殖。

2 動物檢疫工作中樣品采集的基本原則分析

2.1 控制采樣時間

在組織開展檢疫工作之前，必須根據養(yǎng)殖場規(guī)模、經營方式、采樣頻率等因素，選擇較為合理的采樣時間點，調整兩次采樣活動的間隔期，避免出現采樣密度過大、樣品代表性較低等問題。衛(wèi)生防疫人員應在組織采樣活動之前，提前處理好受到病菌感染、出現患病癥狀的死亡動物或瀕死動物，在動物死亡后4～5 h 以內，組織抽血采樣與動物組織切割采樣等工作，多數患病畜禽會在死亡后傳播病菌，尸體會腐敗，導致采樣難度提升，因此養(yǎng)殖人員可使用小型冷凍隔離設備對畜禽動物進行冷藏處理，避免病毒通過尸體傳播，衛(wèi)生防疫人員還可對靠近死亡動物的其他動物進行檢疫采樣，避免病毒通過身體接觸傳播。針對未死亡的患病畜禽，必須在患病癥狀加劇之前，及時進行檢疫樣品采集，控制采集時間與頻率，例如在流行病多發(fā)的夏秋季節(jié)，畜禽在患病后容易快速死亡，存留在臟器與血管中的病毒會在發(fā)病后消失或經過新陳代謝排出體外，一旦錯開急性期與發(fā)熱期，則會導致采樣效果下降，樣品可信度不足，動物組織中含有的病毒量會減少，難以通過專業(yè)醫(yī)學設備檢測發(fā)現，導致病毒檢疫工作無法達成目標。

2.2 典型性原則

在組織動物檢疫活動時，衛(wèi)生人員應保證采集到的樣品具備典型性與代表性，采集范圍涵蓋整個流行病傳播范圍與飼養(yǎng)場全部動物，必須首先選擇具備一定典型性的患病動物，如處于急性發(fā)熱期或初步感染疾病、未出現明顯癥狀的動物，這一階段動物體內病毒大量繁殖，逐步進入動物的內臟器官與血管血液系統(tǒng)中，采樣難度下降，病理學識別精確度提升。衛(wèi)生人員應和養(yǎng)殖人員聯系，提出明確要求，找出未經藥物治療、患病較早的動物，并停止向患病動物與未患病動物投喂帶有抗生素或化學制劑的飼料，避免外來化學物質進入動物體內，導致采集樣品中的各項物質數值發(fā)生變化。可選擇采集帶有較多病原體、癥狀最明顯的動物的樣品，在組織檢疫采樣活動之前，應根據外部癥狀與流行病學調查，對疫病的基本類型、傳播途徑、危害性進行系統(tǒng)性評估，做出較為合理的初步診斷，并根據醫(yī)學原理，在病原體容易感染或形成病灶的身體部位進行高密度取樣檢測，以此保證樣品采集效率與代表性達到標準，例如針對通過細菌感染產生的流行疾病，可組織小規(guī)模的患病動物血液抽樣檢測、乳汁與體內膿汁檢測，精確測定患病動物身體滲出液的化學性質，獲取典型的病原菌樣本。衛(wèi)生人員應嚴格遵循無菌標準，在帶有負壓密封屬性的實驗室中采集樣本，使用工具切除患病組織與出現病變較為明顯的部位組織，保證采集到的病料中帶有相對數量較多的微生物與細菌，還可同步提取病變部位周邊健康器官的動物組織樣本，進行對比檢測，評估二者檢測結果的差異，可針對患病動物的腎臟、肝臟、脾臟等內臟器官與淋巴結、心臟、動脈組織等部位進行采樣。

2.3 安全性原則

衛(wèi)生人員應秉承安全性原則，參與檢疫活動之前，清洗身體并穿上密封防護服，在進出疫區(qū)時接受消毒噴淋處理，以維護養(yǎng)殖人員與專家的健康，做好衛(wèi)生防護工作，避免部分人畜共患傳染病通過接觸人體傳播。針對部分烈性傳染病，如布魯氏菌病、沙門氏菌病等，可在無法解剖患病動物時，利用真空負壓設備，采集動物靜脈中的血樣，將其制作為血清樣品，送往實驗室進行檢測。在采樣過程中，應控制動物樣本數量，同步采集超過5 個患病動物的組織樣本，滿足實驗用量與科學備份要求，還要對盛裝各類樣品的容器與采樣設備進行消毒殺菌處理，及時消除潛在污染源與殘留的細菌，避免病毒通過未消毒器具感染人類與其他動物。在樣品保存運送過程中，應將經過密封的容器進行冷凍保存，存放在小型冷凍機中，針對病毒學樣本，可使用甘油與PBS 溶液進行保存，將動物組織樣本經過切片后，放入防腐制劑中，在冷凍室中-50℃的環(huán)境中保存，避免進行多次凍融循環(huán)導致病毒擴散。衛(wèi)生人員可使用無菌試管與真空加壓設備制作出負壓環(huán)境，將血液樣本、空氣樣品放入其中，在遠距離運輸的情況下，可在血液樣本中添加青霉素，使之發(fā)揮防腐作用，實現平穩(wěn)化運輸[1]。

3 現代化動物檢疫工作中常用檢疫技術類型

3.1 病原學檢測技術

病原學檢測技術是現代化動物檢疫中常用的檢測手段，其基本應用方式為衛(wèi)生人員精確判定樣品中含有病菌的基本屬性，精確區(qū)分病毒與常見病菌，根據病原學原理，分析樣本中細菌、病毒的繁殖鏈與迭代速度，對多種病理學樣本進行隔離檢測，提升惡性傳染病的檢測效率。例如針對常見的寄生蟲病，可通過樣品提純與添加同類型病菌的方式，進行檢查與培育實驗，發(fā)現樣本中含有的蟲卵與幼蟲，延長檢測周期，以評估寄生蟲成蟲的生物屬性與繁殖規(guī)律，精確判定寄生蟲的種類與感染方式，了解其性狀[2]。衛(wèi)生人員應發(fā)揮檢疫工具如顯微鏡、精密化篩查設備等裝置的優(yōu)勢，統(tǒng)計樣本中病原體密度與分布范圍，給予傳染性較強的病原體以生化實驗檢測，運用新型PCR 技術，對不存在活性致病菌的樣本進行溯源檢測，突出檢測活動科學、合理的基本特點。國內常用動物檢疫技術基本特點如表1所示。

表1 國內常用動物檢疫技術的特性與優(yōu)點

3.2 病理學檢測技術

病理學檢疫技術可被概括為檢疫人員基于醫(yī)學原理，對患病動物體征與習性進行精確判斷，向養(yǎng)殖人員詢問相關情況，如畜禽在生長過程中出現的染病癥狀，包括停止飲水、倒臥不動等，并檢查死亡動物的體內器官與神經、血液系統(tǒng)，進行小規(guī)模采樣，評估動物死亡前新陳代謝速度與腸道病菌繁殖量。衛(wèi)生檢疫人員應按照要求，在無菌室內組織死亡動物尸體剖檢活動，保證樣本采集組織的完整性，將動物體內含有大量病菌、具備典型性的器官切割一部分，進行組織學、醫(yī)學檢測，使用專業(yè)科學儀器，將其放入培養(yǎng)皿中，進行持續(xù)性觀測檢驗，發(fā)現動物疫病的性質與種類，保證檢疫精確度。例如針對萎縮性胃炎、急性腸胃炎等病癥，可重點檢查臟器與腸胃的病變情況，發(fā)現可能存在的病菌感染與穿孔、腐爛現象，及時發(fā)現惡性傳染病并停止解剖。還可觀測死亡動物表皮毛細血管中是否含有瘀血或有毒汗液，評估動物死亡前皮膚顏色與營養(yǎng)狀況，采集死亡動物曾經排泄的糞便與尿液，并進行較為細致的口腔、腸道、鼻腔、頸部、腹腔的檢查，找到動物體內腫瘤與腦組織、腸組織病變，對采集的動物組織樣本使用著色劑進行染色處理。在檢疫方法不能確診或動物出現死亡時，應及時利用病理學方法進行檢查[3]。如支氣管敗血巴氏桿菌是引起豬萎縮性鼻炎的病原之一，在該病檢疫中，應充分利用病理組織進行檢疫，有效彌補傳統(tǒng)檢疫技術的不足，有效確診，明確動物病變性質。

3.3 臨床隔離檢疫與免疫學檢疫

臨床檢疫包含常見的聽診、觸診等，可判別患病動物健康情況，發(fā)現較為明顯的患病癥狀，如心臟跳動速度加快、腹腔擴張、瞳孔放大等，根據流行病學防疫原理，及時將出現明顯癥狀的動物送往醫(yī)學實驗室進行長期隔離觀測。群體性隔離檢疫的持續(xù)時間不定，長期約為30 d 左右，針對無癥狀動物的短期隔離檢疫可持續(xù)約10 d[4]。在隔離檢疫過程中，應避免為隔離動物喂食帶有化學物質或高劑量抗生素藥物的食物或水，以免影響檢疫采樣結果判定精確性。免疫學檢疫是新出現的現代化檢疫技術，是基于病理學原理構建的，可針對新出現的烈性傳染病進行精確檢測，由于部分畜禽類傳染病病毒分離難度較大，采集窗口期較短，可采用這一技術，通過初步采集患病動物的血液樣本，將其加工為血清樣本，使用免疫學試劑，檢測血樣的血型、病毒含量、繁殖速度等信息，在短時間內判定患病動物的病情與血液感染情況。免疫學血清檢測技術具備檢測時間較短、可靠性較高等優(yōu)點。

4 動物檢疫技術改進措施分析

衛(wèi)生檢疫人員可采用個體檢疫方法，針對養(yǎng)殖場中單一患有病癥、出現明顯患病情況的動物，進行系統(tǒng)性的個體檢查，組織病毒基因學檢測與生物學觀察等活動，判斷動物所患疾病的癥狀與傳播方式，還可與其他健康動物在特殊場所中進行集中飼養(yǎng)，定期評估共同飼養(yǎng)動物是否患上同類型疾病，以此發(fā)現疾病的傳播方式與傳播速度，提升檢疫效果?？芍攸c觀察動物的精神狀況、生活習性等外在情況，分析動物心臟跳動速度、脈搏波動頻率是否合理，一旦確診烈性傳染病或其他病癥，則立刻將作為單一樣品的動物進行隔離或撲殺處理，同步采集動物內臟樣品進行檢測。在輸送樣品過程中，可采用整體濃度超過10%福爾馬林液（市售甲醛溶液1 份加蒸餾水9 份）或95%濃度的酒精等物質保存病理組織學樣品，固定液體積應為病料的10 倍。如用10%福爾馬林固定組織，經24 h 必須更換一次新鮮溶液；神經系統(tǒng)組織需使用10%福爾馬林[5]。

5 結語

在現代動物檢疫工作中，衛(wèi)生防疫人員應根據實際情況，調整樣本采集方式與樣本量，組織小規(guī)模個體檢疫與間隔時間較長的分段式檢疫，將有幾率患上畜禽類流行病的動物隔離在封閉空間中，定時定點采集檢疫樣本，將其送往本地實驗室進行檢測，基于病理學原則進行深入分析，結合動物習性與外部癥狀，組織活體解剖或尸體解剖，及時發(fā)現畜禽感染的惡性傳染病，在負壓密封實驗室中完成檢測，保證檢測環(huán)境中不存在雜質與其他干擾因素。