周小玲，舒 燕，程剛毅，曾發(fā)姣，曾 奧，周映華，高書(shū)鋒，王升平

（1.湖南省微生物研究院，湖南 長(zhǎng)沙 410009；2.湖南省農(nóng)用微生物應(yīng)用工程技術(shù)研究中心，飼用微生態(tài)制劑湖南省工程實(shí)驗(yàn)室，湖南 長(zhǎng)沙 410009）

產(chǎn)蛋初期由于生殖系統(tǒng)發(fā)生急劇變化，例如卵巢卵泡快速生長(zhǎng)、輸卵管迅速變粗變長(zhǎng)以及重量迅速增加，強(qiáng)烈的生理應(yīng)激和機(jī)體消耗使蛋雞極易出現(xiàn)產(chǎn)蛋率、免疫力、抗病力下降等問(wèn)題，嚴(yán)重影響蛋雞生產(chǎn)經(jīng)濟(jì)效益。產(chǎn)蛋初期正值育成期到產(chǎn)蛋期的過(guò)渡階段，飼養(yǎng)管理 不當(dāng)將影響整個(gè)產(chǎn)蛋期的產(chǎn)蛋水平和雞體健康。中草藥不僅具有營(yíng)養(yǎng)價(jià)值，還有藥用價(jià)值，能顯著調(diào)節(jié)動(dòng)物的生長(zhǎng)發(fā)育和免疫機(jī)能，因此中草藥配方組成的添加劑在蛋雞生產(chǎn)領(lǐng)域的應(yīng)用前景廣闊。

中醫(yī)認(rèn)為“腎主生殖”，腎中精氣決定著生殖機(jī)能，為生殖繁衍之本。五子衍宗方是補(bǔ)腎生精的經(jīng)典名方，由菟絲子、枸杞子、覆盆子、五味子、車前子5 味中藥組成。藥理研究表明，五子衍宗方藥性平和，具有添精補(bǔ)腎、益氣助陽(yáng)、調(diào)氣血、促進(jìn)卵子發(fā)育成熟等功效[1-3]，對(duì)機(jī)體生殖系統(tǒng)、免疫系統(tǒng)等都有明顯的改善和調(diào)節(jié)作用，能很好地解決初產(chǎn)蛋雞生理應(yīng)激的問(wèn)題。目前，有五子衍宗方用于人、大鼠和小鼠的研究，偶有用于犬、豬和兔子的報(bào)道[4-5]，但少有五子衍宗方用于蛋雞的報(bào)道?；诖耍撗芯恳粤_曼蛋雞為試驗(yàn)對(duì)象，在產(chǎn)蛋初期的基礎(chǔ)日糧中添加不同水平的五子衍宗方散劑，考察不同處理對(duì)羅曼蛋雞生產(chǎn)性能和血清生化指標(biāo)的影響，為提高蛋雞養(yǎng)殖水平提供參考。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

挑選432 只體重相近、身體健康的130 日齡羅曼蛋雞進(jìn)行試驗(yàn)，適應(yīng)期14 d，試驗(yàn)期從144 日齡開(kāi)始?；A(chǔ)日糧為玉米–豆粕型飼糧，組成及營(yíng)養(yǎng)成分見(jiàn)表1。供試的五子衍宗方散劑為混合粉劑，由枸杞子、菟絲子、覆盆子、五味子和車前子5 種中藥構(gòu)成，各藥材質(zhì)量比例為4 ∶4 ∶2 ∶1 ∶1。每味中藥先進(jìn)行相應(yīng)的炮制，具體炮制方法見(jiàn)表2。按上述比例進(jìn)行混合后，經(jīng)粉碎處理，密封備用。該研究所用中藥材均購(gòu)自湖南省老百姓大藥房。

表1 基礎(chǔ)日糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平（風(fēng)干基礎(chǔ)）

表2 五子衍宗方主要組成、含量及炮制方法

1.2 試驗(yàn)設(shè)計(jì)

試驗(yàn)在瀏陽(yáng)市生旺種養(yǎng)專業(yè)合作社蛋雞場(chǎng)進(jìn)行，采用單因素隨機(jī)分組設(shè)計(jì)，將432 只雞隨機(jī)分為6 組，每組6 個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)12 只雞。6 組處理分別為基礎(chǔ)日糧中添加0（CK）、0.5%（Ⅰ組）、1.0%（Ⅱ組）、1.5%（Ⅲ組）、2.0%（Ⅳ組）、2.5%（Ⅴ組）的五子衍宗方散劑，試驗(yàn)為期68 d。

采用三層全階梯式籠養(yǎng)，早晚進(jìn)行人工照明補(bǔ)光，光照時(shí)間為16 h。雞舍專人看管，每天8：00、17：00 各飼喂1 次，安裝乳頭式飲水器供試驗(yàn)雞自由飲水，飼養(yǎng)員定期對(duì)欄舍進(jìn)行衛(wèi)生清潔，每天10：00 和16：00 撿蛋2 次，并對(duì)各組進(jìn)行標(biāo)記，其他飼料管理按常規(guī)進(jìn)行。

1.3 測(cè)定指標(biāo)與方法

1.3.1 生產(chǎn)性能 試驗(yàn)期間，每天以重復(fù)為單位，記錄各組蛋雞采食量、總蛋數(shù)、總蛋重、雞只數(shù)等，以組為單位計(jì)算統(tǒng)計(jì)平均日采食量、料蛋比、產(chǎn)蛋率、平均蛋重。

1.3.2 血清生化指標(biāo) 試驗(yàn)結(jié)束后，每重復(fù)隨機(jī)選取體重相近的試驗(yàn)雞 6 只，禁食12 h，清晨空腹前頸靜脈采血，室溫放置30 min 后，在離心機(jī)（Eppendorf 5424R）中以3 500 r/min 的轉(zhuǎn)速離心10 min，收集血清，所得血清樣品－80℃保存?zhèn)溆?。采用全自?dòng)生化分析儀（美國(guó)IDEXX Catalyst One?）測(cè)定血清中總蛋白（TP）、白蛋白（ALB）、球蛋白（GLO）、尿素氮（UREA）、肌酐（CR）、尿酸（UA）的含量。用微板法測(cè)定血清中谷丙轉(zhuǎn)氨酶（ALT）、谷草轉(zhuǎn)氨酶（AST）、堿性磷酸酶（ALP）、乳酸脫氫酶（LDH）、總膽汁酸（TBA）、總膽紅素（T-BIL）、直接膽紅素（D-BIL）、間接膽紅素（I-BIL）的含量。采用GPO-PAP 比色法測(cè)定血清中甘油三酯（TG）含量，采用COD-PAP 比色法測(cè)定血清中總膽固醇（TC）含量，采用雙試劑直接比色法測(cè)定高密度脂蛋白膽固醇（HDL-C）和低密度脂蛋白膽固醇（LDL-C）含量。

1.4 數(shù)據(jù)處理

試驗(yàn)數(shù)據(jù)采用SPSS25.0 軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，采用One-Way ANOVA 進(jìn)行方差分析，LSD 進(jìn)行多重比較，以P＜0.05 作為差異顯著性判斷標(biāo)準(zhǔn)，試驗(yàn)結(jié)果以“平均值±標(biāo)準(zhǔn)差”表示。

2 結(jié)果與分析

2.1 五子衍宗方散劑對(duì)產(chǎn)蛋初期羅曼蛋雞生產(chǎn)性能的影響

由表3 可知，與CK 相比，添加五子衍宗方散劑的試驗(yàn)組平均日采食量無(wú)顯著性影響（P＞0.05）；Ⅰ組、Ⅱ組的料蛋比顯著降低（P＜0.05）；Ⅰ組、Ⅱ組、Ⅲ組的全期產(chǎn)蛋率顯著提高（P＜0.05）；Ⅲ組的平均蛋重顯著性降低（P＜0.05）。

表3 不同水平五子衍宗方散劑對(duì)產(chǎn)蛋初期羅曼蛋雞生產(chǎn)性能的影響

2.2 五子衍宗方散劑對(duì)產(chǎn)蛋初期羅曼蛋雞血清生化指標(biāo)的影響

由表4 可知，與CK 相比，各試驗(yàn)組的血清中總蛋白、白蛋白、球蛋白均無(wú)顯著差異（P＞0.05）；除I 組外，其余各試驗(yàn)組血清中尿素氮均顯著上升（P＜0.05）；Ⅰ組血清中肌酐顯著降低（P＜0.05），Ⅲ～Ⅴ組血清中肌酐顯著升高（P＜0.05）；Ⅰ組血清中尿酸顯著降低（P＜0.05）。

表4 不同水平五子衍宗方散劑對(duì)產(chǎn)蛋初期羅曼蛋雞血清生化指標(biāo)的影響

與CK 相比，各試驗(yàn)組血清中谷丙轉(zhuǎn)氨酶、總膽紅素、直接膽紅素、間接膽紅素均無(wú)顯著性差異（P＞0.05）；Ⅴ組血清中谷草轉(zhuǎn)氨酶顯著升高（P＜0.05）；除Ⅰ組外，各試驗(yàn)組血清中堿性磷酸酶顯著高于CK（P＜0.05）；Ⅴ組血清中乳酸脫氫酶含量顯著提升（P＜0.05），Ⅰ組血清中總膽汁酸含量顯著下降，Ⅴ組血清中總膽汁酸含量顯著升高（P＜0.05）。

2.3 五子衍宗方散劑對(duì)產(chǎn)蛋初期羅曼蛋雞血脂代謝的影響

由表5 可知，與CK 相比，Ⅰ～Ⅴ組蛋雞血清中總膽固醇和甘油三酯含量顯著降低（P＜0.05）；Ⅰ～Ⅴ組蛋雞血清中高密度脂蛋白膽固醇呈升高趨勢(shì)，但是差異不顯著（P＞0.05）；Ⅰ～Ⅲ組蛋雞血清中低密度脂蛋白膽固醇顯著降低（P＜0.05）。

表5 不同水平五子衍宗方散劑對(duì)產(chǎn)蛋初期羅曼蛋雞血脂代謝的影響

3 討 論

3.1 五子衍宗方散劑對(duì)產(chǎn)蛋初期羅曼蛋雞生產(chǎn)性能的影響

五子衍宗方散劑中枸杞子主要成分為枸杞多糖、甜菜堿等，具有保護(hù)生殖系統(tǒng)、調(diào)節(jié)免疫等作用；菟絲子主要含金絲桃苷、槲皮素、山奈酚等，具有補(bǔ)肝腎、保護(hù)生殖系統(tǒng)等功效；覆盆子主要含鞣花酸、山奈酚等化合物，具有調(diào)節(jié)生殖系統(tǒng)、抗衰老等功效；五味子主要成分為五味子醇甲等，能夠補(bǔ)腎固澀、益氣生精；車前子主要含有京尼平苷酸、毛蕊花糖苷等，有清熱、利尿通淋等功效[6]。研究表明，五子衍宗方兼具益腎、添精之功效，對(duì)生殖系統(tǒng)功能有明顯的改善作用[7]。李靜等[8]研究發(fā)現(xiàn)，五子衍宗方能增加卵巢功能受損秀麗線蟲(chóng)的產(chǎn)卵量，明顯改善其生殖能力。紀(jì)利娜等[9]發(fā)現(xiàn)，加味五子衍宗丸有利于促進(jìn)卵泡發(fā)育，提高卵子質(zhì)量，增加獲卵數(shù)量。而產(chǎn)蛋，從人的角度來(lái)說(shuō)，相當(dāng)于妊娠，與腎主生殖的理論相吻合。張海燕等[10]研究表明，在蛋雞玉米–豆粕型日糧中添加50 mg/kg 枸杞多糖可提高雞蛋平均蛋重，顯著降低料蛋比。研究表明，飼糧中添加甜菜堿后，能改善蛋雞生產(chǎn)性能[11-12]。馬明等[13]研究發(fā)現(xiàn)，在基礎(chǔ)日糧中添加4%的五味子多糖可顯著增加海藍(lán)灰蛋雞的產(chǎn)蛋率，提高其產(chǎn)蛋性能。該試驗(yàn)結(jié)果與前人的研究一致，在基礎(chǔ)日糧中添加0.5%、1.0%的五子衍宗方散劑能夠顯著降低產(chǎn)蛋初期羅曼蛋雞料蛋比，分別比CK 降低了3.13%、4.69%；在基礎(chǔ)日糧中添加0.5%、1.0%、1.5%的五子衍宗方散劑能夠顯著提高產(chǎn)蛋初期羅曼蛋雞全期產(chǎn)蛋率，分別比CK 提高了5.36%、6.73%、2.62%。

3.2 五子衍宗方散劑對(duì)產(chǎn)蛋初期羅曼蛋雞血清生化指標(biāo)的影響

血清生化指標(biāo)可間接反映畜禽生理功能，如血清ALB 可作為營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的載體，對(duì)調(diào)節(jié)血液滲透壓有重要作用。血清中的GLO 能與外來(lái)特異性抗原發(fā)生免疫反應(yīng)，其含量可反映機(jī)體免疫功能[14]。該試驗(yàn)中，基礎(chǔ)日糧中添加不同水平的五子衍宗方散劑對(duì)試驗(yàn)蛋雞血清中TP、ALB 和GLO 含量無(wú)顯著影響。佘祿明等[15]研究表明，飼料中添加枸杞多糖對(duì)血清TP、ALB、ALT、AST 均無(wú)明顯影響。張雙喜等[16]研究表明，加味五子衍宗丸可顯著提高血清ALB 水平，降低血清GLO，使肝功能恢復(fù)，提高生存率。與該試驗(yàn)結(jié)果不一致的原因，可能是加味五子衍宗丸中加入了更多中藥材，如丹參、赤芍、虎杖、大黃、澤瀉等。

UREA 是衡量動(dòng)物機(jī)體內(nèi)氨基酸平衡和蛋白質(zhì)代謝的重要指標(biāo)，其含量可反映機(jī)體對(duì)蛋白質(zhì)和氨基酸的吸收利用狀況[17]。UREA 和CR 水平可反映腎小球的濾過(guò)功能，當(dāng)腎臟受損時(shí)，血清UREA 和CR 濃度升高[18]。UA 是禽類蛋白質(zhì)與核酸代謝的終產(chǎn)物，UA 產(chǎn)生過(guò)多或排泄異常會(huì)導(dǎo)致血液中UA過(guò)高，長(zhǎng)期高水平UA 會(huì)引起尿酸性腎病、痛風(fēng)等。UA 含量降低，表明機(jī)體蛋白質(zhì)合成增強(qiáng)，蛋白質(zhì)利用率提高[19-20]。趙宏等[21]研究表明，車前子水煎液可減輕痛風(fēng)性腎病大鼠腎臟充血和水腫癥狀，顯著降低大鼠血中UA、UREA 和CR 含量。畢晶晶等[22]研究表明，枸杞子水煎液能顯著降低小鼠血清中尿素含量。鄭傳癡等[23]研究表明，菟絲子主要藥效成分金絲桃苷能夠明顯降低運(yùn)動(dòng)性疲勞小鼠的UREA水平，加快機(jī)體UREA 的清除。曾金祥等[24]研究表明，車前子中毛蕊花糖苷能降低急性高尿酸血癥小鼠體內(nèi)UA 和CR 水平，改善小鼠腎功能。Zhao等[25]研究發(fā)現(xiàn)，車前子高劑量組大鼠血清CR、UA均有明顯降低，表明車前子在降UA 的同時(shí)可以保護(hù)腎臟。該試驗(yàn)結(jié)果表明，添加0.5%的五子衍宗方散劑對(duì)試驗(yàn)蛋雞血清中UREA 無(wú)顯著影響，但能顯著降低蛋雞血清中的CR、UA 含量，而日糧中添加1.5%～2.5%的五子衍宗方散劑會(huì)提高蛋雞血清中的UREA、CR 含量。與前人的研究結(jié)果基本一致，該試驗(yàn)結(jié)果表明，在基礎(chǔ)日糧中添加低劑量（0.5%）的五子衍宗方散劑能提高產(chǎn)蛋初期羅曼蛋雞對(duì)飼料蛋白及氨基酸的利用率，促進(jìn)蛋雞體內(nèi)蛋白質(zhì)的合成作用，使蛋雞生產(chǎn)性能發(fā)揮得更充分。

膽汁酸的生成和代謝與肝臟密切相關(guān)，健康動(dòng)物血清中TBA 含量極微，當(dāng)肝細(xì)胞被損害或者肝內(nèi)外阻塞時(shí)，TBA 含量就會(huì)升高。試驗(yàn)中，在基礎(chǔ)日糧中添加0.5%的五子衍宗方散劑能夠顯著降低蛋雞血清中的TBA 含量，但是添加2.5%的五子衍宗方能夠顯著升高血清中TBA 含量。這表明添加0.5%的五子衍宗方散劑能很好地保護(hù)肝臟，而添加2.5%的五子衍宗方會(huì)對(duì)蛋雞肝臟造成損害。膽紅素具有抗氧化劑的功能，適量膽紅素對(duì)腦、心、肝等組織和器官有良好的保護(hù)作用[26]。血清中膽紅素含量升高表明肝臟細(xì)胞受損和膽道排泄異常。試驗(yàn)中，在基礎(chǔ)日糧中添加五子衍宗方散劑對(duì)試驗(yàn)蛋雞血清中T-BIL、D-BIL、I-BIL 含量均無(wú)顯著影響。

ALT 和AST 是肝損傷的標(biāo)志物，當(dāng)肝細(xì)胞受損時(shí)，ALT和AST滲透入血，血液中2種轉(zhuǎn)氨酶升高[27]。黃威峰等[28]研究表明，五子衍宗方提取浸膏、五子衍宗方黃酮提取物均可以降低環(huán)磷酰胺誘導(dǎo)肝損傷小鼠模型血清中ALT 和AST 的含量，并拮抗環(huán)磷酰胺造成的小鼠肝細(xì)胞損傷。王成等[29]研究表明，金絲桃苷可降低高血壓大鼠的UREA、ALT 和AST含量。田偉等[30]研究表明，鞣花酸干預(yù)5 周后能夠顯著降低肝硬化模型組小鼠血清ALT、AST、ALB水平。該研究結(jié)果表明，在基礎(chǔ)日糧中添加五子衍宗方散劑均可降低蛋雞血清中ALT 含量，添加0.5%五子衍宗方散劑的試驗(yàn)組AST 水平最低，但差異不顯著，與此前研究結(jié)果一致，但是在基礎(chǔ)日糧中添加2.5%的五子衍宗方會(huì)顯著提高蛋雞血清中AST含量。ALP 存在于機(jī)體多個(gè)組織中，以骨骼和肝臟中活性較高，血清ALP 活性升高預(yù)示著肝臟異常[31]。該試驗(yàn)中，除0.5%五子衍宗方散劑添加組外，其余各試驗(yàn)組血清中ALP 均顯著高于CK，說(shuō)明添加1.0%～2.5%的五子衍宗方散劑都會(huì)引起肝臟損傷。LDH 是體內(nèi)重要的能量代謝酶，其釋放量與細(xì)胞受損程度呈正相關(guān)，該試驗(yàn)中，在基礎(chǔ)日糧中添加0.5%的五子衍宗方能夠降低血清中LDH 含量，但是添加2.5%的五子衍宗方能夠顯著提高血清中LDH 含量。這表明添加0.5%的五子衍宗方散劑對(duì)蛋雞肝臟具有保護(hù)作用，而添加1.0%～2.5%的五子衍宗方散劑會(huì)對(duì)蛋雞肝臟造成損傷。

3.3 五子衍宗方散劑對(duì)產(chǎn)蛋初期羅曼蛋雞血脂代謝的影響

血清中的TC、TG、HDL-C 和LDL-C 的含量與機(jī)體內(nèi)的脂肪代謝有密切關(guān)系[32]。在一定范圍內(nèi)，血清TG 和TC 含量越低，說(shuō)明機(jī)體對(duì)脂肪的利用率越高[33]。TC 過(guò)高會(huì)導(dǎo)致血管變窄，引起心血管閉塞和高血壓。HDL-C 可以促進(jìn)膽固醇逆向轉(zhuǎn)運(yùn)來(lái)實(shí)現(xiàn)抗動(dòng)脈粥樣硬化，而LDL-C 會(huì)促進(jìn)脂肪在血液中沉積，導(dǎo)致血管壁損傷[34]。劉茜[12]研究發(fā)現(xiàn)，飼料中添加甜菜堿能夠提高蛋雞血清HDL-C 含量，降低TG 含量，改善蛋雞脂質(zhì)代謝以及抗氧化的功能。劉馳等[35]研究表明，金絲桃苷能通過(guò)降低LDL-C 水平，抑制動(dòng)脈粥樣硬化脂質(zhì)沉積和斑塊形成。劉素標(biāo)等[36]研究了車前子提取物對(duì)高脂血癥大鼠脂質(zhì)代謝的影響，結(jié)果表明車前子提取物能降低高脂血癥大鼠血清中TG、TC 和LDL-C 的含量，但對(duì)HDL-C 無(wú)明顯影響。謝明亮等[37]研究發(fā)現(xiàn)，五味子提取物能顯著降低高脂血癥模型小鼠血清的TC、TG、LDL-C水平，顯著提高HDL-C 含量，表明五味子提取物具有較強(qiáng)的降血脂作用。該試驗(yàn)中，在基礎(chǔ)日糧中添加0.5%～1.5%的五子衍宗方散劑均能顯著降低產(chǎn)蛋初期羅曼蛋雞血清中TC 和TG 含量，表明添加0.5%～1.5%五子衍宗方散劑可清除產(chǎn)蛋初期羅曼蛋雞血清中多余的膽固醇，降低了蛋雞體內(nèi)膽固醇沉積量，改善產(chǎn)蛋初期羅曼蛋雞的脂代謝能力；添加0.5%～1.5%的五子衍宗方散劑能夠顯著降低蛋雞血清中LDL-C 含量，同時(shí)添加不同劑量五子衍宗方散劑有提高蛋雞血清中HDL-C 的趨勢(shì)，不過(guò)差異不顯著，表明基礎(chǔ)日糧中添加五子衍宗方散劑能夠調(diào)節(jié)蛋雞脂質(zhì)代謝，其調(diào)脂功能可能與五子衍宗方散劑中的甜菜堿、金絲桃苷等成分有關(guān)。

綜上所述，在基礎(chǔ)日糧中添加0.5%的五子衍宗方散劑能改善產(chǎn)蛋初期羅曼蛋雞生產(chǎn)性能，改善血清生化指標(biāo)和血脂代謝，而添加1.0%～2.5%的五子衍宗方散劑會(huì)給蛋雞帶來(lái)不利影響，建議產(chǎn)蛋初期羅曼蛋雞日糧中五子衍宗方散劑添加量為0.5%。