陳思奇，朱永久，吳興兵，楊德國(guó)，李曉莉

1.中國(guó)水產(chǎn)科學(xué)研究院長(zhǎng)江水產(chǎn)研究所/農(nóng)業(yè)農(nóng)村部淡水生物多樣性保護(hù)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，湖北 武漢 430223

2.長(zhǎng)江大學(xué) 生命科學(xué)學(xué)院，湖北 荊州 434020

大鰭鳠 (Mystusmacropterus) 屬于硬骨魚(yú)綱、鯰形目、鲿科、鳠屬，俗稱(chēng)石扁頭、石胡子、江鼠等，其自然分布于長(zhǎng)江和珠江流域，是鳠屬中生長(zhǎng)迅速、個(gè)體較大的一種。其肉質(zhì)細(xì)嫩、味道鮮美、營(yíng)養(yǎng)豐富、蛋白質(zhì)含量高，具有較高的食用和經(jīng)濟(jì)價(jià)值，市場(chǎng)售價(jià)可達(dá)100～120 元·kg-1[1]。長(zhǎng)江實(shí)施十年禁漁前，受水利工程建設(shè)、過(guò)度捕撈以及生態(tài)環(huán)境污染等影響，大鰭鳠野生資源嚴(yán)重枯竭，其捕撈死亡系數(shù)偏高、捕撈個(gè)體偏低齡、體型較小[2-3]。隨著長(zhǎng)江“十年禁漁”的實(shí)施，市場(chǎng)上更難以見(jiàn)到大鰭鳠的身影。

大鰭鳠適溫范圍廣、適應(yīng)環(huán)境能力強(qiáng)，其對(duì)水質(zhì)要求不高，生長(zhǎng)速度較快，是一種亟待開(kāi)發(fā)的優(yōu)質(zhì)養(yǎng)殖品種[3-4]。自20 世紀(jì)90 年代便已開(kāi)展大鰭鳠人工繁殖技術(shù)探索[5-6]。近年來(lái)，通過(guò)受精工藝的優(yōu)化，其平均受精率達(dá)到55%，平均孵化率達(dá)到21.3%。然而，由于苗種培育技術(shù)尚不成熟，早期發(fā)育過(guò)程中的苗種成活率仍較低 (約14%)[6-7]，導(dǎo)致目前大鰭鳠人工養(yǎng)殖苗種規(guī)模及數(shù)量無(wú)法滿(mǎn)足市場(chǎng)需求，限制了其產(chǎn)業(yè)化發(fā)展[7]。

魚(yú)類(lèi)早期生活史作為個(gè)體發(fā)生和系統(tǒng)發(fā)育中的重要組成部分，是開(kāi)展魚(yú)類(lèi)自然資源繁殖保護(hù)和養(yǎng)殖業(yè)苗種培育的基礎(chǔ)[8]。掌握魚(yú)類(lèi)早期發(fā)育的特點(diǎn)，對(duì)于提高苗種成活率、優(yōu)化仔稚魚(yú)的生長(zhǎng)條件、擴(kuò)大種群資源具有重要意義[9]。本研究在全人工繁殖條件下，對(duì)大鰭鳠胚胎發(fā)育及仔稚魚(yú)生長(zhǎng)過(guò)程進(jìn)行了觀察和分析，旨在探究人工繁育條件下大鰭鳠的胚胎發(fā)育及仔稚魚(yú)生長(zhǎng)規(guī)律，為其苗種培育和人工繁殖提供基礎(chǔ)數(shù)據(jù)和技術(shù)支撐。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)材料

實(shí)驗(yàn)用大鰭鳠親魚(yú)來(lái)自中國(guó)水產(chǎn)科學(xué)研究院長(zhǎng)江水產(chǎn)研究所特有魚(yú)類(lèi)繁育基地，為人工繁殖子一代培育而成，均為4 齡以上。催產(chǎn)用雄魚(yú)親本尾細(xì)長(zhǎng)、腹扁平、生殖孔凸起，其須和尾柄較同體長(zhǎng)的雌魚(yú)長(zhǎng)[10]，體質(zhì)量 (409.16±87.09) g；雌魚(yú)親本腹部柔軟膨大，輕壓腹部后端可見(jiàn)生殖孔有卵粒流出，體質(zhì)量 (310.51±100.63) g。親魚(yú)活動(dòng)敏捷，體質(zhì)健壯、外表光滑無(wú)傷，無(wú)病害，生長(zhǎng)發(fā)育情況良好。

1.2 方法

1.2.1 催產(chǎn)受精

采用二次注射法用催產(chǎn)劑 (HCG、LHRH-A 和DOM 混合藥物) 對(duì)雌魚(yú)進(jìn)行腹腔注射誘導(dǎo)催熟產(chǎn)卵，及時(shí)檢查卵子成熟情況，待卵子成熟后便開(kāi)始進(jìn)行人工授精。將卵子擠入事先準(zhǔn)備好的干凈且干燥的盆中并稱(chēng)質(zhì)量，避免魚(yú)卵與水接觸。為減少卵子發(fā)育程度差異對(duì)受精的影響，觀察并參照Chatakondi 和Torrans[11]的方法對(duì)卵子活力進(jìn)行評(píng)估，卵液pH>7.4 即可以判斷卵子質(zhì)量合格。受精前12 h 對(duì)雄魚(yú)進(jìn)行一次注射催熟，催熟藥物及劑量同雌魚(yú)一致。雄魚(yú)精液收集采用殺魚(yú)取精的方法。取出精巢后用濾紙吸干精巢表面組織液和血液，稱(chēng)質(zhì)量，在干凈的小燒杯中剪碎，用紗布過(guò)濾。按照體積比1∶10 將采集的精液加入精子稀釋液[12]后保存?zhèn)溆?。按照精卵體積 (mL) 質(zhì)量 (g) 比1∶20 將精子與卵子混合[13]，輕輕攪拌10 s，然后加入激活液再攪拌2 min 使卵受精。倒出多余的激活液和卵巢液后再用清水沖洗受精卵1～2 遍，完成受精。

1.2.2 孵化

受精卵在直徑300 cm、高110 cm、水深100 cm的孵化桶中進(jìn)行掛網(wǎng)孵化。掛網(wǎng)用聚乙烯網(wǎng)片為30 目，規(guī)格為60 cm×40 cm。將受精卵均勻的撒在網(wǎng)片上，晾干10 min，待受精卵充分粘貼在網(wǎng)片上后，掛入孵化桶中流水孵化。孵化水質(zhì)：pH(8.4±0.1)，溶解氧質(zhì)量濃度 (7.5±0.3) mg·L-1，日換水率為50%，平均水溫為 26.2 ℃。

1.2.3 仔稚魚(yú)培育

仔魚(yú)出膜后及時(shí)收集，為方便觀察及投喂，將苗種收集至底部鏤空的孵化框中，將孵化框置于孵化桶中繼續(xù)培育，孵化框規(guī)格為長(zhǎng)50 cm×寬50 cm×高10 cm，底部孔徑為60 目。仔魚(yú)上浮可攝食后，投喂豐年蟲(chóng)，投喂時(shí)間為09:00 和17:00。培育過(guò)程中及時(shí)吸出殘餌和糞便。每日統(tǒng)計(jì)仔稚魚(yú)死亡尾數(shù)并記錄。

1.2.4 早期發(fā)育觀察及分析

以同批發(fā)育正常的受精卵為觀測(cè)對(duì)象，每次隨機(jī)選取50 粒受精卵使用體視顯微鏡 (Olympus SZX 16) 對(duì)其胚胎發(fā)育各時(shí)期形態(tài)特征進(jìn)行觀察和拍照。并通過(guò)Olympus 軟件測(cè)量卵徑。大鰭鳠受精卵開(kāi)始發(fā)育初始2 h 內(nèi)，連續(xù)觀察，隨后每2 h觀察1 次。并在大鰭鳠胚胎發(fā)育的心臟跳動(dòng)期及肌肉效應(yīng)期進(jìn)行錄像。胚胎發(fā)育各個(gè)階段的劃分以50%以上樣本進(jìn)入該階段來(lái)確定[14]。

以同批發(fā)育正常的仔稚魚(yú)為觀測(cè)對(duì)象，仔稚魚(yú)階段每天觀察1 次，每次隨機(jī)取樣10 尾，用MS-222 (100 mg·L-1) 麻醉后，進(jìn)行生長(zhǎng)發(fā)育觀察和測(cè)定。采用體視顯微鏡配套的Olympus 軟件測(cè)量仔、稚魚(yú)全長(zhǎng)。體質(zhì)量用分析天平測(cè)定 (精度為0.1 mg)。

1.2.5 數(shù)據(jù)分析

胚胎發(fā)育的總積溫為所有發(fā)育階段的積溫相加[15-16]。

各發(fā)育階段積溫計(jì)算公式為：積溫 (h·℃)=該發(fā)育階段的持續(xù)時(shí)間 (h)×該發(fā)育階段的平均水溫 (℃)。

參照鐘全福等[17]的方法計(jì)算全長(zhǎng)特定生長(zhǎng)率(RSGR,L) 和體質(zhì)量特定生長(zhǎng)率 (RSGR,m)：

式中：t1、t2代表相鄰的日齡；L1、L2代表t1、t2日齡時(shí)的全長(zhǎng)；m1、m2代表t1、t2日齡時(shí)的體質(zhì)量。

采用Excel 2010、SPSS 16.0 軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行整理并統(tǒng)計(jì)作圖，所有統(tǒng)計(jì)值以“平均值±標(biāo)準(zhǔn)差()”表示。

2 結(jié)果

2.1 胚胎發(fā)育

根據(jù)胚胎發(fā)育過(guò)程中的外部形態(tài)變化將大鰭鳠的胚胎發(fā)育分為受精卵、胚盤(pán)形成、卵裂、囊胚、原腸、神經(jīng)胚、器官分化和出膜共8 個(gè)階段。平均水溫為26.2 ℃條件下，整個(gè)胚胎階段發(fā)育耗時(shí)79 h，所需積溫為2 065.26 h·℃，其中器官形成階段耗時(shí)最長(zhǎng)，為32.25 h，積溫為841.73 h·℃，各發(fā)育階段耗時(shí)和積溫詳見(jiàn)表1。

表1 大鰭鳠胚胎發(fā)育時(shí)序Table 1 Process of embryonic development of M.macropterus

2.1.1 受精卵

大鰭鳠受精卵呈橢圓球形，黃褐色不透明，成熟卵卵徑為 (2.72±0.2) mm，遇水后吸水膨脹，卵周隙擴(kuò)大，卵徑為 (3.46±0.30) mm，卵黃直徑為(3.13±0.12) mm，卵膜透明，弱黏性 (圖1-a)。

圖1 大鰭鳠胚胎發(fā)育各時(shí)期注：a.受精卵；b.胚盤(pán)期；c.2 細(xì)胞期；d.4 細(xì)胞期；e.8 細(xì)胞期；f.16 細(xì)胞期；g.32 細(xì)胞期；h.多細(xì)胞期；i.囊胚早期；j.囊胚中期；k.囊胚晚期；l.原腸早期；m.原腸中期；n.原腸晚期；o.神經(jīng)胚期；p.胚孔封閉期；q.體節(jié)出現(xiàn)期；r.原腎出現(xiàn)期；s.耳囊形成期；t.尾芽分離期；u.肌肉效應(yīng)期；v.心臟跳動(dòng)期；w.眼囊形成期；x.耳石出現(xiàn)期；y.第二對(duì)須原基出現(xiàn)期；z.胸鰭原基出現(xiàn)期；aa.眼色素出現(xiàn)期；ab.出膜仔魚(yú)；標(biāo)尺=500 μm。Fig.1 Embryonic development of M.macropterusNote: a.Fertilized egg; b.Blastodisc stage; c.2-cell stage; d.4-cell stage; e.8-cell stage; f.16-cell stage; g.32-cell stage; h.Multicellular stage; i.Early blastula stage; j.Middle blastula stage; k.Late blastula stage; l.Early gastrula stage; m.Middle gastrula stage; n.Late gastrula stage; o.Neurula stage;p.Blastopore closed stage; q.Appearance of myomere; r.Proto-renal stage; s.Appearance of otic capsule; t.Tail bud separation period;u.Muscular effect stage; v.Heart pulsation; w.Optic capsule stage; x.Otolith formation stage; y.The second pair of whisker primordia;z.Thoracic fin primordium; aa.Occupation of ocular pigment; ab.Hatching stage; Bar=500 μm.

2.1.2 胚盤(pán)期

受精后2 h，植物極和動(dòng)物極分化，原生質(zhì)流向動(dòng)物極，胚盤(pán)隆起 (圖1-b)。

2.1.3 卵裂期

受精后3.35 h 胚盤(pán)中央向下凹陷，形成兩個(gè)相近的半圓形細(xì)胞 (圖1-c)。隨后出現(xiàn)與2 細(xì)胞期相互垂直的分裂面，此時(shí)形成大小均等的4 個(gè)細(xì)胞(圖1-d)。在經(jīng)歷第三次細(xì)胞分裂后形成8 個(gè)細(xì)胞(圖1-e)，之后兩次分裂分別形成16 和32 個(gè)近似球狀的細(xì)胞 (圖1-f—1-g)。在此之后，進(jìn)入多細(xì)胞期，細(xì)胞分裂不再同步進(jìn)行，形成的細(xì)胞大小不一，細(xì)胞界限清楚，細(xì)胞堆疊形如桑椹 (圖1-h)。

2.1.4 囊胚期

受精后6.5 h 進(jìn)入囊胚早期，細(xì)胞之間的界限模糊，形成高囊胚 (圖1-i)。隨后囊胚高度開(kāi)始下降，進(jìn)入囊胚中期，胚層逐漸向下方擴(kuò)展變薄(圖1-j)。至囊胚晚期時(shí)囊胚高度降至最低，之后逐漸變平無(wú)凸起 (圖1-k)。

2.1.5 原腸期

受精后19.15 h 進(jìn)入原腸早期，在此期間囊胚邊緣細(xì)胞增多，胚層沿卵黃向下延伸至包裹卵黃1/3 左右，在卵黃周邊出現(xiàn)明顯的波紋狀滾動(dòng)，形成的胚環(huán)不甚明顯 (圖1-l)。原腸中期胚體下包至卵黃1/2 處，形成微微隆起的胚盾雛形 (圖1-m)。原腸晚期時(shí)胚體繼續(xù)下包到卵黃2/3 至3/4 處，開(kāi)始出現(xiàn)胚胎雛形，原腸晚期歷時(shí)1.9 h (圖1-n)。

2.1.6 神經(jīng)胚期

受精后26.2 h，神經(jīng)板和表皮層形成，并且神經(jīng)板的中央線(xiàn)向下凹陷，逐漸形成細(xì)胞索，卵黃栓較大凸起在外 (圖1-o)。隨后外胚層細(xì)胞逐漸包裹卵黃，胚孔封閉，神經(jīng)胚期結(jié)束 (圖1-p)。

2.1.7 器官形成期

器官形成期持續(xù)時(shí)間為32.25 h，胚孔封閉后分化形成的頭部區(qū)域隆起膨大，胚體出現(xiàn)較為明顯的肌節(jié)，肌節(jié)較為透明 (圖1-q)。頭部胚軸兩側(cè)出現(xiàn)橢圓形原腎，同時(shí)，第三腦泡下方出現(xiàn)透明區(qū)為圍心腔原基 (圖1-r)。頭部進(jìn)一步分化，在胚體約1/5～1/4 處出現(xiàn)一對(duì)橢圓形耳囊 (圖1-s)。胚體繼續(xù)伸長(zhǎng)，尾芽從卵黃囊上方伸出，尾芽分離 (圖1-t)。胚體中部出現(xiàn)不規(guī)律收縮，隨后逐步加強(qiáng)開(kāi)始左右扭動(dòng)，扭動(dòng)頻率8～12 次·min-1(圖1-u)，心臟跳動(dòng)加快，頻率大于40 次·min-1(圖1-v)。在腦兩側(cè)出現(xiàn)與體軸平行的圓形泡狀結(jié)構(gòu)，即眼的雛形 (圖1-w)，隨后耳石形成，形似黑色的圓點(diǎn)，左右聽(tīng)囊內(nèi)各一對(duì)(圖1-x)。在分化形成的第一對(duì)須原基的下方出現(xiàn)呈橢圓形向前方突出的第二對(duì)須原基 (圖1-y)。位于耳囊后下方，與卵黃接合處出現(xiàn)胸鰭原基(圖1-z)。眼部亦出現(xiàn)黑色素 (圖1-aa)，胚體在膜內(nèi)不停扭動(dòng)，直至出膜，多數(shù)胚胎通過(guò)尾部劇烈擺動(dòng)出膜，然后頭部出膜 (圖1-ab)。

2.2 大鰭鳠仔稚魚(yú)發(fā)育的特征

根據(jù)大鰭鳠仔稚魚(yú)卵黃囊消失、仔魚(yú)開(kāi)口與攝食、鰭條變化等外部形態(tài)變化特征和器官分化過(guò)程，將仔稚魚(yú)分為前期仔魚(yú)、晚期仔魚(yú)和稚魚(yú)期3 個(gè)階段 (圖2)。

圖2 大鰭鳠仔稚魚(yú)發(fā)育注：a.出膜1 d；b.出膜2 d；c.出膜3 d；d.出膜4 d；e.出膜5 d；f.出膜6 d；g.出膜7d；h.出膜8 d；i.出膜9 d；j.出膜10 d；k.出膜 11 d；l.出膜12 d；m.出膜13 d；n.出膜14 d；o.出膜16 d；p.出膜17 d；q.出膜18 d；r.出膜19 d；s.出膜20 d；t.出膜21 d；標(biāo)尺=1 mm。Fig.2 Development of M.macropterus larva and juvenileNote: a.1 d post hatching; b.2 d post hatching; c.3 d post hatching; d.4 d post hatching; e.5 d post hatching; f.6 d post hatching; g.7 d post hatching;h.8 d post hatching; i.9 d post hatching; j.10 d post hatching; k.11 d post hatching; l.12 d post hatching; m.13 d post hatching; n.14 d post hatching;o.16 d post hatching; P.17 d post hatching; q.18 d post hatching; r.19 d post hatching; s.20 d post hatching; t.21 d post hatching; Bar=1 mm.

前期仔魚(yú)又稱(chēng)為卵黃囊期仔魚(yú)，在這個(gè)階段，仔魚(yú)卵黃囊大部分被吸收并開(kāi)始攝入外部營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)。

初孵仔魚(yú)全長(zhǎng)為 (7.31±0.52) mm，此時(shí)大鰭鳠已經(jīng)完全出膜，頭部伏于卵黃囊上，卵黃囊近似橢圓形，嗅窩內(nèi)凹，眼球突出，耳囊清晰，耳石2 粒，第一對(duì)頜須有扁平的基部，鈍的圓形尖端，尖端向下延伸；腹部鰭?cǎi)拚?，連為一體，有肛凹雛形；頭部靠圍心腔和后腸部位被吸收為空泡；軀體透明，頭、軀干、尾部都能觀察到明顯的血液(圖2-a)。2 d 后仔魚(yú)頭部出現(xiàn)黑色素，下頜須原基伸長(zhǎng)分化出頜須，頜須共2 對(duì)，位于下巴處 (圖2-b)。3 d 后仔魚(yú)卵黃囊逐漸縮小，眼囊內(nèi)充滿(mǎn)黑色素。仔魚(yú)軀體透明，可以清楚看到紅色血液，除頭部外，在仔魚(yú)的背部和軀體兩側(cè)表面都有黑色素團(tuán)出現(xiàn)，鰓板發(fā)育，口開(kāi)始張開(kāi)，左右兩側(cè)兩對(duì)觸須伸長(zhǎng)變細(xì)。卵黃囊逐漸減小，大量的油性卵黃分解物出現(xiàn)在腸道中，尾鰭?cǎi)蕹霈F(xiàn)雛形骨質(zhì)鰭條 (圖2-c)。4 d 后仔魚(yú)全長(zhǎng)為 (10.85±1.76) mm，后腦部黑色加深，嘴部開(kāi)口增大。連續(xù)而直的消化管開(kāi)始分化，腹部長(zhǎng)條狀奇鰭?cǎi)拗虚g部分出現(xiàn)凹陷，呈半圓形，中間出現(xiàn)鰭條雛形，初具臀鰭雛形，進(jìn)入尾、臀鰭分化期 (圖2-d)。5 d 后仔魚(yú)全長(zhǎng)為 (11.58±0.22) mm，背部的鰭?cǎi)拚郫B分化為背鰭和脂肪鰭，背鰭出現(xiàn)鰭條，可短時(shí)平游，臀鰭出現(xiàn)鰭條雛形，背部脂肪鰭很長(zhǎng)仍然與尾鰭相連，尾鰭鰭條增多。出現(xiàn)第三對(duì)頜須，這三對(duì)頜須，一對(duì)在嘴角，另兩對(duì)在下巴上(圖2-e)。6 d 后仔魚(yú)全長(zhǎng)為 (11.93±1.19) mm，腹鰭?cǎi)蕹醅F(xiàn)，黑色素遍布整個(gè)軀干，同時(shí)在尾部出現(xiàn)黑色素；卵黃囊繼續(xù)縮小，即將進(jìn)入晚期仔魚(yú)階段(圖2-f)。

晚期仔魚(yú)階段仔魚(yú)卵黃囊完全消失，混合營(yíng)養(yǎng)期結(jié)束，獨(dú)立攝食，進(jìn)入外源性營(yíng)養(yǎng)階段，體型與成魚(yú)之間存在一定差異，器官分化仍未完成。

7 d 后仔魚(yú)全長(zhǎng)為 (12.96±1.80) mm，腹鰭?cǎi)抻砷L(zhǎng)條狀變成半圓形，尾鰭、脂鰭和臀鰭間相連的鰭?cǎi)揠S著各鰭的分化已變得很窄但仍然連接在一起，胸鰭出現(xiàn)4 條鰭條。少量開(kāi)口攝食豐年蟲(chóng) (圖2-g)。8 d后仔魚(yú)全長(zhǎng)為 (13.74±3.45) mm，相連的奇鰭?cǎi)揲_(kāi)始分化，在沒(méi)有鰭條處分離形成不相連的兩部分，各鰭條明顯變長(zhǎng)，脂肪鰭縮小但仍和尾鰭連在一起，臀鰭向下伸長(zhǎng)和尾鰭分離，肌體黑色素團(tuán)變大顏色加深。上頜須長(zhǎng)于下頜須，兩對(duì)下頜須長(zhǎng)度相近。仔魚(yú)80%開(kāi)口 (圖2-h)。孵化后9 d 大多數(shù)仔魚(yú)個(gè)體的卵黃囊完全消失，肛門(mén)處有排泄物排出，可以獨(dú)立覓食，進(jìn)入外源性營(yíng)養(yǎng)階段。腹鰭?cǎi)蕹霈F(xiàn)鰭條分化，背部脂肪鰭開(kāi)始出現(xiàn)黑色素團(tuán) (圖2-i)；孵化后10 d 腹鰭形成5 條鰭條，胸鰭伸長(zhǎng)鰭條增多 (圖2-j)。

稚魚(yú)期：在此期間器官分化完成，魚(yú)體在其外部特征上逐漸與成魚(yú)相似。

出膜11～14 d，稚魚(yú)全長(zhǎng)14～19 mm 左右。尾鰭中部?jī)?nèi)凹，開(kāi)始分化成上下兩葉，所有鰭條都出現(xiàn)黑色素團(tuán)，出現(xiàn)第四對(duì)頜須。皮膚顏色加深，尾鰭下葉較上葉短而寬。背鰭至尾鰭間背部前段的奇鰭?cǎi)尴В溆嗖糠忠仓皇Ｏ乱槐《臎](méi)有骨質(zhì)支撐的脂肪鰭，其上覆蓋著與體色一致的色素團(tuán)。肛前奇鰭?cǎi)抟讶肯В滚挆l為8 條。至此大鰭鳠仔魚(yú)的各鰭基本分化完畢即外部器官分化基本完成。出膜16～21 d 的稚魚(yú)全長(zhǎng)為22～24 mm，側(cè)線(xiàn)形成，背鰭分化形成一枚骨質(zhì)鰭條，背鰭條為7 條，尾鰭條為16～18 條，臀鰭條為10～14 條。各器官都已分化完善，鰭?cǎi)尥耆В婶~(yú)期分化結(jié)束。完成稚魚(yú)期分化的幼魚(yú)體型接近成魚(yú)，前部略圓，尾部側(cè)扁，背部黑色，腹部白色，游泳能力、捕食能力提高，消化系統(tǒng)發(fā)育完全 (圖2-k—2-t)。

2.3 仔稚魚(yú)的生長(zhǎng)模型

統(tǒng)計(jì)出膜后30 d 大鰭鳠仔稚魚(yú)生長(zhǎng)情況(表2)，對(duì)魚(yú)體的全長(zhǎng)與日齡進(jìn)行回歸分析，建立生長(zhǎng)模型為：y=-0.000 5x3+0.017 1x2+0.659 6x+7.649 (R2=0.992 5)。全長(zhǎng)隨日齡的變化曲線(xiàn)如圖3-a所示。對(duì)體質(zhì)量與日齡進(jìn)行回歸分析，建立生長(zhǎng)模型為：y=3×10-6x3+0.000 2x2-0.000 5x+0.013 6(R2=0.984 3)。體質(zhì)量隨日齡的變化曲線(xiàn)如圖3-b 所示；采用曲線(xiàn)回歸分析體質(zhì)量與全長(zhǎng)的關(guān)系，結(jié)果如圖3-c 所示，其冪指數(shù)函數(shù)方程為：y=5×10-5x2.4137(R2=0.948 7)。

圖3 大鰭鳠早期生長(zhǎng)曲線(xiàn)Fig.3 Early growth curve of M.macropterus

表2 大鰭鳠不同日齡仔、稚魚(yú)生長(zhǎng)變化情況Table 2 Growth variation of larval and juvenile M.macropterus at different time

3 討論

3.1 大鰭鳠與其他鯰形目魚(yú)類(lèi)胚胎發(fā)育比較

大鰭鳠受精卵呈橢圓球形，黃褐色、不透明、弱黏性，與其他鯰形目魚(yú)類(lèi)受精卵有一定的相似性和差異性 (表3)。其成熟卵卵徑為 (2.72±0.2) mm，在鲿科魚(yú)類(lèi)中卵徑較大，吸水后卵徑為 (3.46±0.30) mm，較吸水前增大約27.21%，高于瓦氏黃顙魚(yú) (Pelteobagrusvachelli) (22.16%)、烏蘇里鮠 (Pseudobagrusussuriensis) (25%)，而低于南方大口鯰(Silurussoldatovimeridionalis) (46.24%) 和鯰(S.asotus)，這是因?yàn)轸~(yú)類(lèi)卵徑大小因物種不同而存在差異[14]。在以往的研究中，獲取的大鰭鳠受精卵卵徑吸水后介于3.5～3.8 mm[28]，略大于本研究，這可能與其環(huán)境變化及產(chǎn)卵時(shí)間不同有關(guān)[14]。

表3 大鰭鳠與其他鯰形目魚(yú)類(lèi)胚胎發(fā)育比較Table 3 Comparison of embryonic developmental characteristics between M.macropterus and other Siluriformes fish

總體來(lái)看，大鰭鳠的胚胎發(fā)育各時(shí)期與其他鯰形目魚(yú)類(lèi)相差不大，但其胚胎發(fā)育也有自身的特點(diǎn)，與一般鯰形目魚(yú)類(lèi)原腸期歷時(shí)長(zhǎng)于囊胚期不同，大鰭鳠囊胚期經(jīng)歷時(shí)間是原腸期的1.8 倍，這可能是由于大鰭鳠卵徑較大、細(xì)胞下包困難所致，這在扁吻魚(yú) (Aspiorhynchuslaticeps)[14]、尖裸鯉(Oxygymnocyprisstewartii)[15]、斑重唇魚(yú) (Diptycus maculates)[29]等的胚胎發(fā)育中也有發(fā)現(xiàn)。大鰭鳠早期發(fā)育過(guò)程中的器官形成較快，主要反映在未出膜前就已分化的胸鰭、尾部鰭?cǎi)蕖㈩M須及各器官的雛形，這與其胚胎卵徑大、卵黃豐富、營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)充足，能夠滿(mǎn)足器官分化和胚胎生長(zhǎng)所需有關(guān)，同時(shí)也是與其懷卵量小、保證出膜仔魚(yú)有更高成活率的一種適應(yīng)[30-31]。

據(jù)報(bào)道，魚(yú)類(lèi)胚胎發(fā)育的快慢與水溫密切相關(guān)[32-33]，大鰭鳠胚胎在26 ℃的條件下，從受精到出膜的時(shí)長(zhǎng)為79 h，是26.5～31.5 ℃下野生大鰭鳠胚胎發(fā)育的1.55 倍[28]。同時(shí)胚胎發(fā)育還與卵子大小有關(guān)，卵徑大的胚胎發(fā)育較慢[34]；在相近溫度下，大鰭鳠受精卵卵徑和孵化出膜所需積溫(2 065.26 h·℃) 均大于黃顙魚(yú) (Pelteobagrusfulvidraco) (積溫1 645.3～1 921 h·℃)和烏蘇里鮠 (積溫1 285.27 h·℃)，而發(fā)育時(shí)長(zhǎng)是黃顙魚(yú)胚胎發(fā)育的1.2 倍以上，是烏蘇里鮠的1.5 倍以上，這可能與物種本身發(fā)育特點(diǎn)有關(guān)，也可能與其棲息環(huán)境和繁殖條件有關(guān)[35]。大鰭鳠的尾發(fā)生較早，仔魚(yú)通過(guò)尾部破膜而出，這與大部分鯰形目魚(yú)類(lèi)一致。

3.2 大鰭鳠仔稚魚(yú)發(fā)育

不同魚(yú)類(lèi)的生長(zhǎng)特性不同，各發(fā)育階段的具體時(shí)間也有差異[34]。參照已有的分期方法[34,36]，本文以大鰭鳠的生活習(xí)性為主，兼顧其形態(tài)變化，將其胚后發(fā)育分為前期仔魚(yú)期、晚期仔魚(yú)期和稚魚(yú)期。

剛出膜仔魚(yú)全長(zhǎng)平均在7.31 mm 左右，大于黃顙魚(yú)[18]、鯰[25]和革胡子鯰 (Clariasgariepinus)[27]等鯰形目魚(yú)類(lèi)，但小于部分鯉形目魚(yú)類(lèi)[37]。較大的出膜仔魚(yú)，有利于建立外源攝食，對(duì)提高成活率有極大幫助[38]。

大鰭鳠初孵仔魚(yú)卵黃囊較大，使其常側(cè)臥水底或吸附在孵化桶中，且能夠適應(yīng)較為惡劣的生活環(huán)境如食物短缺[16]、敵害侵?jǐn)_[37]等，也可為仔魚(yú)的生長(zhǎng)發(fā)育和新陳代謝提供能量，保證仔魚(yú)更大的成活率[39]。隨著卵黃囊消失，大鰭鳠開(kāi)始主動(dòng)攝食水體中的食物，進(jìn)入混合營(yíng)養(yǎng)期。大鰭鳠卵黃囊完全消失歷時(shí)9 d，較鯰[25](40 h)、黃顙魚(yú)[20]和革胡子鯰[27](4～5 d)歷時(shí)更長(zhǎng)；不同物種卵黃囊留存時(shí)間差異較大[14]，較長(zhǎng)的卵黃囊留存時(shí)間使得大鰭鳠由內(nèi)源性營(yíng)養(yǎng)轉(zhuǎn)向外源性營(yíng)養(yǎng)的時(shí)間得以延長(zhǎng)，有利于提高仔魚(yú)的成活率，也是其對(duì)生存環(huán)境適應(yīng)性的一種表現(xiàn)[40]。大鰭鳠出膜11～14 d，各鰭基本分化完成，魚(yú)鰭的分化時(shí)間較鯰[25]長(zhǎng)，與黃顙魚(yú)[18]、蘭州鯰 (S.lanzhouensis)[41]魚(yú)鰭分化時(shí)間無(wú)明顯差異，均首先出現(xiàn)胸鰭，后各鰭先后出現(xiàn)并開(kāi)始分化，但各鰭的發(fā)育順序與蘭州鯰略有不同，這是因?yàn)轸~(yú)鰭的形成和發(fā)育順序是隨著魚(yú)類(lèi)的進(jìn)化和環(huán)境的變遷逐漸變化，以適應(yīng)其生存[41]。大鰭鳠在孵化出膜前已完成了部分器官的分化，22 d 后進(jìn)入幼魚(yú)期，與蘭州鯰的胚后發(fā)育相似[42]，革胡子鯰的胚后發(fā)育速率相對(duì)較快，出膜15 d 的體型已與成體十分相似[27]，而黃顙魚(yú)胚后發(fā)育較慢，出膜25 d 后進(jìn)入幼魚(yú)期[18]，這一差異可能是水溫、營(yíng)養(yǎng)等環(huán)境條件的不同所致[43]。

大鰭鳠在早期仔魚(yú)階段就具有明顯的聚集性、避光及多在夜間攝食的習(xí)性，這與其視覺(jué)不發(fā)達(dá)、感觸器官發(fā)生較早相適應(yīng)。進(jìn)入稚魚(yú)期后，其攝食強(qiáng)度增大，肌肉和各鰭條發(fā)育趨于完善，游泳能力逐漸加強(qiáng)，生活習(xí)性逐漸接近成魚(yú)[44]，喜棲息于角落陰暗處，環(huán)境變化時(shí)迅速躲藏至陰暗處。這一習(xí)性變化與其他鯰形目魚(yú)類(lèi)[42,45]、巖原鯉 (Procyprisrabaudi)[46]、黃斑籃子魚(yú) (Siganusoramin)[47]等相似。

3.3 大鰭鳠仔稚魚(yú)的生長(zhǎng)特性

隨著日齡的增長(zhǎng)，大鰭鳠整體上呈現(xiàn)先快后慢的生長(zhǎng)趨勢(shì)，其特點(diǎn)是全長(zhǎng)先增長(zhǎng)，體質(zhì)量增加滯后。仔魚(yú)期歷時(shí)10 d，其中在仔魚(yú)前期，SGRL為9.79%，顯著高于仔魚(yú)后期和稚魚(yú)期，7 d 后仔魚(yú)開(kāi)始從外界攝食，全長(zhǎng)和體質(zhì)量增長(zhǎng)速度減慢，9 d后體質(zhì)量開(kāi)始明顯增加。表明在仔魚(yú)前期，魚(yú)體尚未開(kāi)口攝食，卵黃作為內(nèi)源營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)主要用于仔魚(yú)各器官的進(jìn)一步發(fā)育，而不能提供多余的能量使其體質(zhì)量大幅增加。隨著消化系統(tǒng)發(fā)育的完善，仔魚(yú)攝食能力增強(qiáng)，攝取的充足營(yíng)養(yǎng)開(kāi)始用于自身體質(zhì)量的增加。同時(shí)多余的營(yíng)養(yǎng)轉(zhuǎn)化為能量使得仔魚(yú)的捕食和游泳能力均大幅提高，這在扁吻魚(yú)[14]、牙鲆 (Paralichthysolivacens)[48]、四川華鳊 (Sinibramataeniatus)[49]等的研究中也有類(lèi)似發(fā)現(xiàn)。另外，大鰭鳠仔稚魚(yú)體質(zhì)量與全長(zhǎng)的相關(guān)回歸方程的b值 (2.241 37) 低于3，表明在人工養(yǎng)殖條件下大鰭鳠仔稚魚(yú)生長(zhǎng)屬于異速生長(zhǎng)類(lèi)型[50]。