■ 趙祥民 李璐璐 張家瑋 張軍霞 趙宏杰 唐德富

（甘肅農業(yè)大學動物科學技術學院，甘肅蘭州 730070）

近年來，許多國家已經(jīng)立法限制甚至禁止在飼料中添加抗生素；美國食品藥品監(jiān)督管理局于2017年1月制定了限制農場動物抗生素使用的新規(guī)定[1]，中國自2020年7月1日起停止生產含有促生長藥物飼料添加劑（中藥除外）的商業(yè)飼料，因此替抗和減抗已經(jīng)成為養(yǎng)殖過程中必須面對的問題。近年來，越來越多的研究表明，植物中的活性物質在促進動物生長發(fā)育的同時還可以提高動物免疫性能，減少氧化應激，保持腸道的完整性，促進有益細菌的生長，并減少腸道感染的負面效果[2]。中草藥作為一種天然藥物，具有毒性小、無殘留等特點，在畜牧業(yè)中使用各種草藥作為天然抗生素的研究正在世界各地進行。當歸作為中國的傳統(tǒng)中藥材，具有補血、活血、止痛、潤腸等功效?，F(xiàn)代藥理學研究表明，當歸作為一種天然藥物不僅安全無毒，而且其有效活性成分具有廣泛的藥理活性，包括抗癌、抗氧化、免疫調節(jié)和神經(jīng)保護等作用[3]。同時體外和體內研究表明，當歸中的活性物質還可以保護心臟、抗心律失常、防止動脈粥樣硬化[4-6]。在現(xiàn)行的中醫(yī)藥典中，當歸因為其廣泛的藥理作用，被應用到80 多個中草藥復方中。當歸的根部為藥用部分，而地上部分的莖葉總是被直接丟棄。由于當歸莖葉產量是根的幾倍，這一過程導致了資源的嚴重浪費。研究表明，當歸莖葉具有與根部相似的生物活性物質[7]，因此具有一定的開發(fā)價值，而目前暫無將當歸莖葉作為飼料添加劑應用的報道。試驗評價了當歸莖葉作為飼料添加劑對肉雞生長性能、屠宰性能、血清生化指標及抗氧化能力的影響。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

試驗所用的當歸莖葉于2021年10月在甘肅省臨夏州康樂縣采摘，在當歸未收獲前，割取地上10～13 cm 處的植株作為原始樣品，平鋪于陽光房內自然陰干，達到水分要求（≤10%）后粉碎備用；試驗地點為甘肅省武威市民勤縣勤峰灘。

1.2 試驗設計與試驗動物

試驗采用單因素完全隨機設計，挑選432 只體重相近[（50±5） g]、健康無病、公母各半的1 日齡科寶505 白羽肉仔雞，隨機分為1 個對照組和5 個處理組，分別為基礎日糧（1 組）、基礎日糧+1%當歸莖葉粉（2組）、基礎日糧+1.5%當歸莖葉粉（3 組）、基礎日糧+2%當歸莖葉粉（4 組）、基礎日糧+2.5%當歸莖葉粉（5 組）和基礎日糧+3%當歸莖葉粉（6 組）。每個處理組6 個重復，每個重復12 只雞?？傇囼炂跒?2 d，分為試驗前期（1～21 d）和試驗后期（22～42 d）。

1.3 試驗日糧

試驗基礎飼糧為玉米-豆粕型粉料，參照美國NRC（1994）肉雞的營養(yǎng)需要配合成粉狀飼料。試驗飼糧配方及營養(yǎng)水平見表1。

表1 試驗飼糧組成及營養(yǎng)水平（風干基礎）

1.4 飼養(yǎng)管理

試驗開始前兩周，對雞舍及試驗用具進行徹底的清洗和消毒，對照明系統(tǒng)和溫度控制系統(tǒng)進行檢查和檢修。試驗開始前3 d，將舍內溫度調整為35 ℃，之后每隔2 d 降低1 ℃，21 d 后舍內溫度維持在24～26 ℃，直至試驗結束。整個試驗期舍內濕度控制在65%左右，保持正常的通風和連續(xù)24 h的照明。飼養(yǎng)管理參照《科寶肉雞飼養(yǎng)管理手冊》，采用三層立體式籠養(yǎng)，試驗雞自由采食和飲水，并在規(guī)定時間按免疫程序免疫。每天早晚打掃消毒，定期清理糞盤，保證雞舍內外的清潔。

1.5 測定指標及方法

1.5.1 生長性能

試驗第1、21、42 天08：00，對所有試驗肉雞空腹稱重，稱重前12 h，禁食，自由飲水。以重復為單位，記錄肉仔雞的重量和余料量。測定其平均采食量（AFI）、平均體增重（AWG）和料重比（F/G）。

平均采食量（g）：試驗期內雞只采食量/雞只數(shù)

平均體增重（g）：（試驗期內雞期末體重-初始體重）/雞只數(shù)

料重比：試驗期內總采食量/試驗期內總體增重

1.5.2 屠宰性能

于試驗第42 天末，以組為單位抽取體重相近的6 只雞，記錄其活重，屠宰后記錄屠體重、全凈膛重、半凈膛重、腿肌重和胸肌重。

屠宰率（%）=屠體重/活重×100

全凈膛率（%）=全凈膛重/活重×100

半凈膛率（%）=半凈膛重/活重×100

胸肌率（%）=胸肌重/全凈膛重×100

腿肌率（%）=腿肌重/全凈膛重×100

1.5.3 血清生化指標

① 樣品采集：于試驗第42天，以組為單位抽取體重相近的6只雞，翅下靜脈采血5 mL，置于10 mL離心管中，在室溫下傾斜放置30 min，4 ℃下 3 000 r/min離心10 min，分離血清，分裝后于-20 ℃保存。

② 測定指標：總蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、總膽固醇(TC)、三酰甘油(TG)、高密度脂蛋白（HDL）、低密度脂蛋白（LDL）、葡萄糖(GLU)、谷草轉氨酶（AST）、谷丙轉氨酶（ALT）。

③ 測定方法：測定指標均使用北京中生北控生物科技有限公司提供試劑盒，具體方法按照說明書步驟進行。

1.5.4 血清抗氧化指標

① 樣品采集：飼養(yǎng)試驗結束后，以組為單位抽取體重相近的6只雞，翅下靜脈采血5 mL，置于10 mL離心管中，在室溫下傾斜放置30 min，4 ℃下3 000 r/min離心10 min，分離血清分裝后于-20 ℃保存。

② 測定指標：超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽過氧化物酶（GSH-Px）、總抗氧化能力（T-AOC）、丙二醛（MDA）。

③ 測定方法：血清抗氧化指標的測定使用北京華英生物科技有限公司供試劑盒，具體方法按照說明書步驟進行。

1.6 數(shù)據(jù)處理

試驗數(shù)據(jù)由Excel 2010 整理后，使用SPSS 20.0（IBM Corporation, USA）軟件中的one-way ANOVA 程序進行方差分析，差異顯著時，采用Duncan’s 法進行多重比較，所有試驗數(shù)據(jù)均以“平均值±標準差”來表示，以P＜0.05 作為差異顯著判斷標準。圖片處理由GraphPad Prism 8完成。

2 結果與分析

2.1 生長性能

由表2 可知，在1～21 日齡，與1 組相比，日糧中添加當歸莖葉粉對肉仔雞平均采食量、平均體增重以及料重比無顯著影響（P＞0.05）；在22～42 日齡和1～42 日齡，與1組相比，3、4、5、6組平均采食量和平均體增重均顯著提高（P＜0.05），其中6組最高。

表2 日糧中添加當歸莖葉粉對肉雞生長性能的影響

2.2 屠宰性能

由表3 可知，1 組屠宰率顯著低于其余各組（P＜0.05）；半凈膛率6 組顯著高于1、2、3、4 組（P＜0.05），5 組則顯著高于1、2 組和3 組（P＜0.05）；5 組和6 組全凈膛率顯著高于1 組（P＜0.05）；6 組胸肌率顯著高于1、2、3 組（P＜0.05），4 組和5 組胸肌率顯著高于1 組和2 組（P＜0.05）；1 組腿肌率顯著低于4、5、6 組（P＜0.05）；5 組和6 組腹脂率顯著低于1、2、3、4 組，4 組顯著低于1組（P＜0.05）。

表3 日糧中添加當歸莖葉粉對肉雞屠宰性能的影響（%）

2.3 血清生化指標

由表4可知，各組間總蛋白、白蛋白和高密度脂蛋白含量均無顯著差異（P＞0.05）。與1組相比，4、5、6組總膽固醇含量和葡萄糖含量顯著降低（P＜0.05）；6組三酰甘油含量顯著降低（P＜0.05），5、6組低密度脂蛋白含量顯著降低（P＜0.05），谷丙轉氨酶含量顯著降低（P＜0.05）；4、5、6組谷草轉氨酶含量顯著降低（P＜0.05）。

表4 日糧中添加當歸莖葉粉對肉雞血清生化指標的影響

2.4 血清抗氧化指標

日糧中添加當歸莖葉粉對肉雞血清中SOD 的水平和MDA 的含量均無顯著影響（P＞0.05）[圖1（A）、（D）]。與1 組相比，4、5、6 組顯著提高了肉雞血清中GSH-Px活性（P＜0.05），6組含量最高[圖1（B）]。與1組相比，其余各組均顯著提高了肉雞的T-AOC（P＜0.05），6組T-AOC最高[圖1（C）]。

圖1 日糧中添加當歸莖葉粉對肉雞血清抗氧化能力的影響

3 討論

3.1 日糧中添加當歸莖葉粉對肉雞生長性能的影響

研究表明，中草藥的非藥用部分中的活性成分也存在一定的藥用價值，如果合理利用也有一定的開發(fā)潛力[8-11]。中草藥在畜禽飼料中常作為飼料添加劑使用，但對其非藥用部分的利用鮮有報道。當歸莖葉具有與根部類似的生物活性物質，其主要含有黃酮類、多糖類、有機酸類和萜類等化合物[7]，這些化合物都能有效改善肉雞的生長性能，但目前暫無當歸莖葉在畜禽生產中應用的報道。Guo 等[12]研究發(fā)現(xiàn)，在鵪鶉的日糧中3%添加黃芪莖葉可提高鵪鶉的采食量和體增重；Abdulsalam 等[13]發(fā)現(xiàn)，在肉仔雞飼糧中添加辣木葉粕可以提高育肥期的生長性能。本試驗中，添加當歸莖葉的處理組對肉雞的生長性能也有顯著的提升作用，且3% ASL效果最好，通過對比當歸、黃芪、辣木三者有效活性成分發(fā)現(xiàn)，三者都富含黃酮類化合物和多糖類化合物[14-15]，而在畜禽生產中，黃酮類化合物和多糖類化合物已被證實對畜禽的生長有促進作用[16-17]；此外，Greene 等[18]發(fā)現(xiàn)，植物飼料添加劑作用溫和，可改善肉雞下丘腦中HSP70 的表達，降低肉雞的核心溫度，從而提高肉雞的采食量和體重。但在本試驗研究結果中，料重比隨著ASL 添加劑量的增加卻沒有顯著變化，造成這一結果的原因可能是當歸莖葉中的纖維含量較高，導致相同采食量的情況下，體增重降低，造成了料重比的升高，也有可能是當歸莖葉中存在一些抗營養(yǎng)因子造成了肉雞體重的下降，從而影響了料重比[19-22]。

3.2 日糧中添加當歸莖葉粉對肉雞屠宰性能的影響

畜禽生長發(fā)育的過程中，體增重的變化可以直觀地反映生產性能的優(yōu)劣，但畜禽的生產性能不僅僅只是體重的增長，而是產肉量的高低，與其相關的指標就是屠宰性能。其中，屠宰率和全凈膛率是衡量畜禽產肉率的重要指標。李苗苗等[23]在鵝飼料中添加辣木莖粉發(fā)現(xiàn)，辣木莖粉提高了鵝的胸肌率和腿肌率，并降低了鵝的腹脂率。本試驗研究中，日糧中添加當歸莖葉粉顯著改善了肉雞的屠宰性能，且以2%、2.5%、3%的添加量的效果較好，與上述報道研究一致。植物生長成熟的過程中，莖葉作為養(yǎng)分運輸?shù)钠鞴僖灿幸欢ǖ臓I養(yǎng)價值，這些營養(yǎng)物質被動物消化吸收，促進動物生長的同時對動物的屠宰性能也有一定的改善作用；而屠宰性能作為動物生產性能的一部分，其表現(xiàn)的好壞可能與影響生產性能的因素相似，經(jīng)與上述研究中的有效成分比對發(fā)現(xiàn)，其與當歸莖葉均含有黃酮類和多糖類物質，雖劃分不同，但可能發(fā)揮了相同的生物學功能[24-25]。但也有學者將中草藥的非藥用部分作為家禽飼料添加劑時發(fā)現(xiàn)其對家禽的屠宰性能沒有顯著影響[26]。導致此結果的原因可能是動物間的個體差異、添加劑量和飼料的加工處理等方面的原因造成的，但具體原因還需進一步探究。

3.3 日糧中添加當歸莖葉粉對肉雞血清生化的影響

動物的新陳代謝是一個持續(xù)變化的動態(tài)過程，由機體的內分泌系統(tǒng)調控，并在相關酶的催化下有序進行，以此來保障動物體內生理和生化指標的正常，當機體出現(xiàn)代謝出現(xiàn)紊亂時，原有的代謝平衡被打破，血清生化指標就會大致反映出機體的損傷情況。研究表明，血清生化指標不僅反映了營養(yǎng)物質的吸收和代謝情況，而且與機體的組織、器官和生理狀態(tài)息息相關[27-28]。動物血清中的總蛋白包括白蛋白和球蛋白，肝臟作為白蛋白合成的主要器官，一定程度上反映了肝臟的健康狀況。本試驗結果表明，日糧中當歸莖葉粉的添加并未對肉雞血清的總蛋白和白蛋白含量有顯著影響，試驗結果證明當歸莖葉粉在作為飼料添加劑使用時并未對肉雞的肝臟產生負面效果。動物體內脂肪的合成和分解也主要在肝臟中進行，三酰甘油和總膽固醇的含量反映了機體的血脂水平，高密度脂蛋白是將機體中的膽固醇和三酰甘油轉運到肝臟中水解，隨后通過腸道排出體外；低密度脂蛋白的轉運方向與高密度脂蛋白不同，它是將三酰甘油和膽固醇經(jīng)肝臟細胞轉運到其他組織細胞中水解。目前已有大量研究證明，中草藥可以調節(jié)機體的脂質代謝，從而預防高血脂引發(fā)的疾病。Hyun 等[29]發(fā)現(xiàn)黃芪根提取物中黃酮類物質顯著降低了患有酒精肝大鼠血清中三酰甘油和膽固醇的水平。還有研究報道稱，枸杞中的多糖類物質顯著改善了小鼠的血脂代謝[30]。中草藥對血脂的改善作用可能是中草藥中富含天然的有機類黃酮化合物，類黃酮可以在消化道中與膽固醇形成不溶性復合物，從而抑制內源性和外源性膽固醇的腸道吸收[31]；此外，多糖類物質對血脂代謝的調節(jié)也有積極作用，其作用機制可能是多糖作為益生元調節(jié)了脂肪酸合成酶的活性[32]。當歸莖葉同樣也存在黃酮類和多糖類化合物，在本研究中，日糧中添加當歸莖葉粉可降低肉雞血清中的三酰甘油、總膽固醇和低密度脂蛋白，同時增加血清中高密度脂蛋白的含量，且以3 %的添加組最優(yōu)，與以上研究結果一致。此外，血脂水平的降低，減少了機體內糖異生途徑，從而使血清中葡萄糖含量也顯著下降。血清中AST 和ALT 含量反映了肝臟的健康狀況。本試驗中，肉雞日糧中添加當歸莖葉粉顯著降低了血清中AST和ALT 水平，其中3%的試驗組AST 最低，2%試驗組ALT 最低。血清ALT 和AST 水平的任何異常升高都可能意味著肝損傷（肝細胞變性），因此AST和ALT水平的降低可能是因為中草藥中的某些活性物質具有保肝作用。然而，由于中草藥對家禽或其他動物血液參數(shù)影響的研究非常有限，仍需進一步研究其對動物的影響。

3.4 日糧中添加當歸莖葉粉對肉雞抗氧化性能的影響

畜禽在生長發(fā)育的過程中，由于與外界的持續(xù)接觸，包括呼吸、外界污染、放射線照射等因素，使得畜禽體內不斷產生自由基，而畜禽體內也會對產生的自由基進行清除，從而保證機體的正常代謝，但是機體內對自由基清除能力有限，當自由基的產生速率超過機體清除速率時，自由基在體內開始大量積累，使機體處于氧化應激狀態(tài)，進而導致機體功能障礙。由于肉仔雞消化道生理構造的特殊性以及集約化飼養(yǎng)模式，造成肉雞體內脂肪易于積累，因此相比于其他動物，肉雞發(fā)生脂質過氧化反應概率更高。MDA 是脂質過氧化產物，因此可作為機體抗氧化能力評價指標[33]。SOD 是機體內部保護的第一道防線，它可以清除超氧陰離子自由基保護細胞免受氧化損傷[34]。GSH-Px 是機體內一種廣泛存在的過氧化物分解酶，且僅對還原性GSH有專一性，使有毒的過氧化物變?yōu)闊o毒的羥基化合物，從而保護細胞膜的功能不受過氧化物的干擾及損害。T-AOC 代表機體體內酶類和非酶類抗氧化物的總體水平，能全面反映動物機體的抗氧化狀態(tài)[35]。先前的研究證實，植物中的多糖類物質、黃酮類物質和有機酸類物質能增強動物的抗氧化能力[36-38]。Xue 等[39]表明牛膝多糖降低鏈脲佐菌素誘導的大鼠血清MDA 含量，并提高GSH-Px 和SOD 活性；Hao 等[40]的研究表明在小鼠飼糧中添加杜仲綠原酸能提高GSH-Px、SOD 的水平，并降低了小鼠機體的MDA 含量；此外，對四氯化碳誘導的肝損傷小鼠給予黃芪多糖可增強肝臟的抗氧化能力，提高GSH-Px 和SOD 水平，同時降低MDA 含量[41]。當歸莖葉不僅含有多種多糖類和黃酮類化合物，同時也富含綠原酸。本試驗結果表明，日糧中添加當歸莖葉粉對肉雞血清中的SOD 水平和MDA 含量無顯著影響，但T-AOC 和GSH-Px 活性明顯增加，說明當歸莖葉粉對改善肉雞的抗氧化狀態(tài)具有積極作用。試驗結果與Wang 等[42]和Guo等[12]的研究結果一致。

4 結論

飼糧中添加ASL可以提高肉雞的生產性能、屠宰性能。改善肉雞的血脂代謝水平，降低血清中的血糖含量，提高肉雞的抗氧化能力，飼糧中ASL 的推薦添加量為3%。